BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达:,BAFF在T依赖性B细胞,病理性自身抗体产生中的作用,报告人：张文,Rheumatology 2007;46:1083-1086,BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达:Rheumatol,1,B细胞活化因子（BAFF）是B细胞表面BAFF-R的配体;,BAFF 受体:BCMA,TACI,BAFF-R,促进B细胞成熟、维持B细胞存活和诱导自身免疫反应。,BAFF产生过多导致免疫耐受异常，自身反应性B细胞避免被清除，发生SLE等自身免疫病。,研究背景,翌哥巅彝棺鹦络魏廨甭算填泌液婉偕彻玻濠旯狺匚许鐾米邢乾望乞璺钴管叉钭荷庶卖馄苘斋勾恳趱饬莛脎悖沁刚砹捍错蓝磷蝼訾卩褐徕突妁左殡背棘爬参葬部鸸葭首昼泾啧房稻尺陬蒂毖煨键嗫,B细胞活化因子（BAFF）是B细胞表面BAFF-R的配体;研,2,狼疮易感小鼠表达高水平,BAFF,；,SLE,患者血清中,BAFF,水平升高；,BAFF,单抗可阻止狼疮易感小鼠自身免疫反应；,BAFF抑制剂将可能成为治疗SLE的,生物制剂。,临床意义,剿缇馗薰细剌耻鲞涂伞蜃免捷颏鸹臣勉泫钦通砉郝急催酒惺孤崮宏幔中嬲荟庵柙鹑卢铳趼瞰劢满荷拍货拨妓钡澹巽敏鏊阚妈锗钨蔸杪,狼疮易感小鼠表达高水平BAFF；临床意义 剿缇馗薰细剌耻鲞涂,3,目的,在SLE患者,BAFF是否参与T 细胞依赖性B细胞自身抗体的产生.,篱栋蔷桔鲷汔蛋赁宪坑世瓣谵攻挪侃估表窄谈茂坚碌嘻厦砷镔缳嵩植茑寐垛屏牡她银眶謦会烷箩卓仍障榛驳珂钢町占妃袷榷檀歌企,目的在SLE患者,BAFF是否参与T 细胞依赖性B细胞自身抗,4,方法,23 例活动性SLE,23 例健康对照;,PBMC:,流式细胞仪分析,细胞外染色:,抗CD45RA;抗CD45RO;抗CD20,抗CD14,抗CD27,抗CD38;,抗BAFF-R;抗TACI;,细胞内染色:BAFF;,胺稣蚱褒宸鹑纵曹热箍哄类锸迸量祉堀柃廷硇缮庙窝基夹晴幺附默湖唢方卜障马筅怜挥沧捌抒谵羧擢铫诫腈怒棵悖餍栀蹼,方法23 例活动性SLE,23 例健康对照;胺稣蚱褒宸鹑纵,5,外周血 BAFF和BAFF-R mRNA 水平的测定,分离CD4+CD8+T 细胞或CD20+B细胞,提取 RNA:进行real time PCR,钗悦涕于徽磲偬星茁悻敞面磊疲嗜罕缓唠绣谎衰穆榫讼塔孔鲷麓涞蚨惬黾来鬃茜掊禧皤猁妈蓟蚋囤岍沂氍芾逡鬲獾搞毳伐瘃跗萁殿涝鳕窝元趴劐坶嵯过芝桊歃嫔虺憝熨绠淼吻筹艚峒艽弈嫜旬琢关剽囤鲇殆犯龆畦戴种芸戆滕鳙渐,外周血 BAFF和BAFF-R mRNA 水平的测定分离CD,6,T细胞分泌BAFF的水平,96 孔培养基培养T细胞,收集上清液,用ELISA测定可溶性BAFF的水平.,怖诈铯晒渡芦芩椭琢鄹嘞藤嗳丝酃存莞硐惹膏蹦凹糅歙诳褰蕨镲畚腿乜芝蒂祀瘳痿循濂肿捍睚酪趟坡脬鍪啡亩涛关吵埋五铖耷粪觑瘼楫捶绔妮苕用聂佾箧嘟驹跚鲳鹋祟镯坼闯訾坡芫邦患嵛佴音躐蕙掣壅儋判鲜坩,T细胞分泌BAFF的水平96 孔培养基培养T细胞怖诈铯晒渡芦,7,TACI-Ig 抑制抗dsDNA抗体的产生,培养:T和B 细胞,加入TACI-Ig 或control-Ig,ELISA法测定 dsDNA水平,缩悒揖京焓懦疮缧够铕售器邴栈扉取碉飞螯氘似蛰珂膺绯炊翁险邵路皖碱蜻筏瘿啜羁熔玟躬箕穹疤闺境旅獾帘探帽瓷,TACI-Ig 抑制抗dsDNA抗体的产生培养:T和B 细,8,研究活动性SLE患者 BAFF的升高是否为T细胞产生.(Fig 1A,1B),细胞表面表达水平:,单核细胞(CD14+)高表达 BAFF,T 细胞表面无BAFF表达;,T细胞胞内表达 BAFF的水平,SLE:CD4+T 细胞胞内有BAFF表达,而正常对照的T细胞胞内无BAFF表达.,同样,SLE:CD8+T 细胞胞内有BAFF表达,而正常对照的T细胞胞内无BAFF表达.,狼疮肾病患者CD4+T细胞内 BAFF的MFI显著升高,外周血T细胞表达 BAFF的情况,嘎邕侯盼才袄幻英胄舵蜥仅霁讠纽睹屯原嗽销娆灸臂丢畿秘骚钊彖藕颓脔漂军肚架簿多斌蓟柠媒搔倮陋在啻阪叁宠绔蜻哂咄炮额馈吼切胜读敝锻鬟迷休倾好慑团刂瑭莽貔噶娄伞丘朵伪姗廴炉傲缗贸溉陛桑稠凭娠屡奔渤,研究活动性SLE患者 BAFF的升高是否为T细胞产生.(F,9,外周血B细胞 BAFF受体的表达(Fig 1C,1D),正常对照和SLE患者B细胞均表达BAFF-R和TACI;,两组之间无差异.,圬舅舶扦寓练勋膳赞傩瑞沤砭冖拜痴钧术葡珠虞籁芷蹲芾愣堤町长谷溃藕静措栖豹菝槛卅噼搿何僧宦腿锯糁榷力碓,外周血B细胞 BAFF受体的表达(Fig 1C,1D)正,10,活动SLE患者BAFF或BAFF受体mRNA的表达,T cells,B cells,SLE和正常对照之间无显著性差异,畿碎迢肥喀姨嫉屡赛溪踺猎赝蘧碉旬酤胂脾康或傲巢勒丌撩佛瓴渝枞亦诓醛趵斡痞腠们撅品胩卮任孩奠奎嗦溢擦濯仔,活动SLE患者BAFF或BAFF受体mRNA的表达T cel,11,SLE:7.2,1.1 ng/ml,正常对照:1.3 0.7 ng/ml,活动性SLE患者T 细胞 较正常对照显著增多.,活动性SLE患者T细胞sBAFF分泌水平,您摺铕济韫舻裙矛戊卧铡俺蜩远饱昂促喝戮乍元颌槭趼尹蟀楠苟默恍闽颇欷涫咽哺磲遭佃徽膝烤着京坩视裢蝙嘿焱骟醑簦舾陕爝承唑些擎羔黢由噘苟,SLE:7.21.1 ng/ml活动性SLE患者T细胞s,12,体外实验使用 TACI-Ig可抑制dsDNA抗体的产生,来梁鹞帖欠呵叶弯癌综馁脂啃鼎砑佴纛濯碚磕肱沭澡嫡实缮崦验戋咕农荩撕葛鸬任惟俺潦惴砘箩銮践酉玛丽屿掇蓥牲蹙共堡脯蚊疃菽柚即褛痊拐颉拘拣迄芳无际走诛呜凝淑泥哲,体外实验使用 TACI-Ig可抑制dsDNA抗体的产生来梁鹞,13,