生化试剂的基本知识课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,全球信赖的迈瑞,A world together,生化试剂的基本知识,.,全球信赖的迈瑞,1,全球信赖的迈瑞,A world together,主要内容介绍,生化试剂的分类,反应速度特性,显色原理,性能评价方法,.,全球信赖的迈瑞,2,全球信赖的迈瑞,A world together,生化试剂的分类,按照化学性质分,酶类：包括,ALT,，,AST,，,ALP,，,ACP,，,r-GT,，,-HBDH,，,LDH,，,CK,，,CK-MB,-AMY,，,MSO,，,ADA,，,ChE,等。,底物,/,代谢产物类：包括,TG,，,TC,，,HDL-C,，,LDL-C,，,UA,，,UREA,，,Cr,，,Glu,，,TP,，,Alb,，,T-Bil,，,D-Bil,，,TBA,，,NH,4,+,，CO2,等。,无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl等。,特种蛋白类：包括apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。,.,全球信赖的迈瑞,3,全球信赖的迈瑞,A world together,生化试剂的分类,按照临床应用分,无机离子：包括Ca，P，Mg，Cl等。,肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，,D-Bil，TBA，TP，Alb等。,肾功能：UA，UREA，Cr等。,心肌酶谱：CK，CK-MB，LDH，-HBDH，AST，MSO。,糖尿病：GLU等。,前列腺疾病：ACP，p-ACP等。,胰腺炎：-AMY。,.,全球信赖的迈瑞,4,全球信赖的迈瑞,A world together,生化试剂的分类,按照临床应用分,胰腺炎：-AMY。,血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。,痛风：UA。,有机磷中毒：ChE。,免疫性疾病：C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM，,Kappa链，Lambda链。,.,全球信赖的迈瑞,5,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性,按照反应速度，可以将生化试剂分为二大类：,终点法试剂；,动力学法试剂：又可再分为零级动力学法和一,级动力学法,.,全球信赖的迈瑞,6,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,终点法,终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应，反应进行到完全，使全部底物(被测物)转变成产物，称终点法，更确切地说应称平衡法，这是最理想的分析类型。整个反应达到平衡，由于正向反应的平衡常数很大，可认为所有的被测定物已转变为产物，反应液的吸光度不再增加(或降低)，吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。,终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感，只要这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可，是最理想的反应模型。,.,全球信赖的迈瑞,7,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,终点法,属于终点法的试剂主要有：,TG,，,TC,，,HDL-C,，,LDL-C,，,UA,，,Glu,，,TP,，,Alb,，,T-Bil,，,D-Bil,，Cr（氧化酶法），,NH,4,+,，CO2，,Ca，P，Mg，Cl,，,apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。,.,全球信赖的迈瑞,8,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,动力学法,零级动力学法,指反应过程中反应速度维持不变，达到最大，与底物浓度无关，因此，在整个反应过程中，反应物可以匀速地生成某个产物，导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加，减小或增加的速度(A/min)与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶活性的测定。,实际上，由于底物浓度不可能足够大，随着反应的进行，底物消耗到一定程度后，反应速度不再维持不变，同样从启动反应到达到最大速度需要一定时间。因此，零级动力学法是针对于特定时间段而言的，各试剂商对这段时间有严格规定。,.,全球信赖的迈瑞,9,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,动力学法,属于零级动力学法的试剂主要有：,ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY，MSO，ADA，ChE，TBA等,.,全球信赖的迈瑞,10,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,动力学法,一级动力学法(固定时间法）,在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一次方成正比,由于底物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小，这类反应达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反应较多，经过一段延迟时间才能进入稳定反应期，必需在特定时间段内进行监测，各试剂商对这段时间有严格规定。,在一固定时间间隔中，底物浓度的变化量正比于底物的初浓度。这是一级反应的通性。该段时间内吸光度的增加(或)降低与被测定物的浓度成正比。,.,全球信赖的迈瑞,11,全球信赖的迈瑞,A world together,反应速度特性之,动力学法,属于一级动力学法的试剂主要有：,Cr（苦味酸法），UREA（紫外监测法）,.,全球信赖的迈瑞,12,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,NAD-NADH和NADP-NADPH系统,p-NP和p-NA系统,H,2,O,2,偶联的指示系统,抗原抗体反应指示系统,其它显色反应,.,全球信赖的迈瑞,13,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,NAD-NADH和NADP-NADPH系统,NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。,作为该指示系统常用的工具酶有LDH、MDH、GLDH和G6PDH,目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、,-HBDH、Glu、UREA、NH,4,+,、CO2等。,.,全球信赖的迈瑞,14,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,p-NP和p-NA指示系统,p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。,目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。,.,全球信赖的迈瑞,15,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,H,2,O,2,偶联的指示系统,H2O2在过氧化物酶的作用下，可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性,用于此指示系统的单一色素原有TMB、ABTS等；成对色素原有酚和4AA、MBTH和DMA等。,目前利用此指示系统进行测定的临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu、Cr、UA等。,.,全球信赖的迈瑞,16,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,抗原抗体反应指示系统,特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗原浓度成正比。,目前利用此指示系统进行测定的临床项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等。,.,全球信赖的迈瑞,17,全球信赖的迈瑞,A world together,显色原理,其它显色反应,蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物，在一定浓度范围内颜色反应强度与蛋白质的浓度成正比。用于TP的测定。,溴甲酚绿(BCG)在非离子去污剂Brij35的存在下，可与白蛋白形成紧密结合的绿色复合物。用于Alb的测定。,重氮苯磺酸盐与胆红素生成红紫色偶氮胆红素。用于总胆红素和直接胆红素的测定。,甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca、Mg形成有色络合物。用于Ca、Mg的测定。,.,全球信赖的迈瑞,18,全球信赖的迈瑞,A world together,性能评价方法,主要性能指标：,稳定性：指在规定条件下经过一段时间的保存，,仍能达到相应的性能指标，如试剂空白吸光,度、线性范围、灵敏度等。,反应灵敏度：指单位浓度(或活性)的测定物反应所产生的,反应度，反应度越高，灵敏度越大。,精密度：结果间相互符合的一致程度,准确度：与参考测定程序结果的一致性,线性范围：在规定的重复性和线性偏差下，测得的浓度或活性值,与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围。,基质效应：,抗干扰性：,其它：试剂/样本比例、反应时间、价格等。,.,全球信赖的迈瑞,19,全球信赖的迈瑞,A world together,性能评价方法,稳定性：连续观测，每日试验；热加速试验。,反应灵敏度：直接计算单位浓度反应物的吸光,度变化或变化率。,精密度：按照NCCLS EP5-A进行。,准确度：按照NCCLS EP9-A2 进行。,线性范围：按照NCCLS EP6-A 进行。,基质效应：通过回收试验确定,抗干扰性：按照NCCLS EP7-A进行。,.,全球信赖的迈瑞,20,谢谢大家！,.,谢谢大家！.,21,已推出的试剂种类,共35个项目38种试剂（,按照化学性质分）,：,酶类：包括,ALT,，,AST,，,ALP,，,r-GT,，,-HBDH,，,LDH,，,CK,，,CK-MB,-AMY,等。,底物,/,代谢产物类：包括,TG,，,TC,，,HDL-C,，,LDL-C,，,UA,，,UREA,，,Cr,，,Glu,，,TP,，,Alb,，,T-Bil,，,D-Bil,，,TBA,等。,无机离子类：包括,Ca,，P，Mg等。,特种蛋白类：包括ApoA1，ApoB，Lp(a)，C3，C4，IgG，IgA，IgM，CRP，PA等。,.,已推出的试剂种类共35个项目38种试剂（按照化学性质分）：.,22,已推出和计划推出的试剂包装,已推出：,BS-200包装：试用装试剂、销售试剂,BS-300包装：装机试剂、销售试剂,日立7170包装：销售试剂,计划推出：,BS-400包装,通用包装,日立7020包装,.,已推出和计划推出的试剂包装已推出：.,23,