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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,静脉采血及血清制备,静脉采血非抗凝全血2ml/小组,二氧化碳结合力测定（CO,2,-CP）,滴定法、分光光度法,一,、原理,二、测定方法,三、参考值,四、临床意义,五、注意事项,六、,方法学评价,七、小结,一、原理,1.样品中的CO,2,-CP主要以 HCO,3,-,的形式存在，在样品中加入过量的标准盐酸溶液，使酸与 HCO,3,-,起中和反应，释放出CO,2,，然后以标准氢氧化钠溶液滴定剩余的酸，用酚红指示剂指示终点。以氢氧化钠的消耗量计算出样品中 HCO,3,-,含量。,2.光度法：二氧化碳结合力在碳酸酐酶的作用下，使碳酸氢根分解同二氧化碳迁出引起pH值发生变化，借助联合指示剂显色，在546nm波长测定吸光度值，计算其含量。,二、操作,1.,滴定法测定,加样：,充分振摇12分钟，以试剂R,3,滴定各管至呈樱桃红色，静置10秒后不退色为终点。,试剂 标准管 样品管,新鲜血清,（l）100,标 准 液,（l）100 ,试 剂 R,2,（l）500 500,试 剂 R,1,（滴）2 2,计算：,样品CO,2,-CP（mmol/L）,=,25.0,2.,分光光度法测定,加样：,试剂 空白管 标准管 样品管,工作试剂（ml）3 3 3,蒸 馏 水（l）100 ,标 准 液（l）100 ,样 品（l）100,充分混匀，置37水浴恒温3分钟后，室温冷却测定。,分光光度计测定方法：波长546nm，试剂空白调零，测定标准管和样品管吸光度，按公式计算。,样品,CO,2,-CP（mmol/L）,=,C,（26mmol/L）,三、参考值,成人：21.0 29.0mmol/L,儿童：18.0 28.0 mmol/L,四、临床意义,CO,2,-CP反应了体内的碱储备量，其,量增加,可能是呼吸性酸中毒或代谢性碱中毒；其,量减少,可能是代谢性酸中毒和呼吸性碱中毒。,1.CO,2,-CP 降低,代谢性酸中毒：,糖尿病、饥饿使酸性物质生成增多，急、慢性肾功能不全致酸性物质排泄减少，剧烈腹泻、肠瘘、大面积烧伤,等碱性物质丢失过多，均可导致代谢性酸中毒，引起CO,2,-CP不同程度降低。,轻度代谢性酸中毒CO,2,-CP 22 18 mmol/L(5040容积%)，中度代谢性酸中毒CO,2,-CP 18 14.47 mmol/L(4030容积%)，,重度代谢性酸中毒CO,2,-CP 14.47 mmol/L(30容积%)，极度代谢性酸中毒CO,2,-CP 4.49 mmol/L(10容积%)。CO,2,-CP下降与BUN增高呈负相关。呼吸性碱中毒：,脑溢血、肺炎、支气管哮喘、癔病等因换气过度，使CO,2,排出过多而降低。,2.CO,2,-CP增高 代谢性碱中毒：,各种原因引起的剧烈呕吐，如急性胃炎、幽门梗阻、胃痉挛、妊娠呕吐等，使酸根大量丢失导致CO,2,-CP增高。,呼吸性酸中毒：,慢性支气管炎、阻塞性肺气肿、广泛性肺纤维化、慢性肺心病等所致通气和换气功能障碍，均可引起增高。,CO,2,-CP表示呼吸和代谢两方面的综合结果。在代谢性酸碱平衡失调时，它能及时地反映体内碱储备的增减变化。在呼吸性酸碱平衡失调时，必须在肾以 或H,+,形式增加或减少算得排出，对回吸收 做出相应代偿反应时，方能表现出体内碱储备 的变化，因而CO,2,-CP不能及时反映血中CO,2,的急剧变化。对伴有通气障碍而发生的酸碱平衡失调的判断，其实用价值受到限制。,五、注意事项：,1.标本应减少与空气接触，并迅速分离血清或血浆，即时测定。,2.样品加入试剂R,2,后振摇要充分，并防止液体溅出管外。,3.滴定操作在出现橙黄色退色减慢时，速度要减慢，防止滴定过量。,4.样品一定要新鲜血清；若使用血浆，只能用肝素抗凝而不能用其它抗凝剂，样品收集后应尽快分离血清或血浆，及时测定。,5.小心人体呼吸排出CO,2,对检验结果的影响。,六、方法学评价,1.本方法准确度：不准确度应20%精确度较低、只能作为对照测定或急诊、手术应急。,2.方法有比色法和滴定法两种，比色法精度更高。,3.滴定法终点不易准确判断,4.受样本保存时间限制,5.操作简便,小结,1.终点判断2.结果对比3.下次课预习血清总胆固醇测定,谢谢,！,
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