过氧化物酶的显示和观察专家讲座

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,细胞中过氧化物酶显示与观察,(,peroxisome),微体（,micro-bodies,）,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第1页,电镜下过氧化物酶体,电子致密关键是尿酸氧化酶结晶，即类核体,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第2页,peroxisome,Peroxisomes are simple,membrane-bound vesicles(or microbodies,as they are also called),A diameter of 0.1 to 1.0 m that often contain a dense,crystalline core of oxidative enzymes,Peroxisomes are multifunctional organelles,containing more than 50 enzymes involved in such diverse activities,glyoxysome,乙醛酸循环体,:,specialized type of peroxisome,present in plants.,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第3页,过氧化物酶体包含,2,种酶类：,氧化酶,(,oxidases),约占过氧化物酶体酶总量二分之一,各种氧化酶作用于不一样底物,将氧还原成过氧化氢,。,RH,2,+O,2,R +H,2,O,2,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第4页,过氧化氢酶,(,catalase,),是过氧化物酶体标志酶,约占过氧化物酶体酶总量,40%,作用是将过氧化氢还原成水,RH,2,+H,2,O,2,R +2H,2,O,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第5页,过氧化物酶体增殖,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第6页,试验原理,氧化还原酶类原位显示：依据氧化还原原理，使无色化合物氧化成有色物质得以定位。,过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本试验用联苯胺混合液处理标本，过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。,依据颜色反应，可判定过氧化物酶有没有或多少。,RH,2,+O,2,R+H,2,O,2,H,2,O,2,+RH,2,R+H,2,O,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第7页,试验步骤,试验一：,取洋葱鳞片表皮一薄片；,置于,0.85,NaCl,溶液中,3,5,分钟。,培养皿,1,浸在溶有,0.1%,钼酸胺,0.85,NaCl,溶液中,5,分钟。,培养皿,2,在使用联苯胺溶液前，每,2ml,加,10%,过氧化氢,2,滴。,培养皿,3,浸在联苯胺溶液中,2,分钟，至切片出现蓝色为止。,培养皿,3,在,0.85%NaCl,溶液中洗,1min,。,培养皿,4,将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检验。,试验二：,取马铃薯块茎一个，用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上，滴加,3,过氧化氢溶液。,用煮熟马铃薯重复上述过程，结果怎样？,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第8页,试验结果,1,、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色颗粒。即为过氧化物酶存在部位。,2,、滴加了过氧化氢溶液马铃薯组织四面出现气泡，提醒植物中过氧化氢酶存在。,过氧化氢酶能使,H,2,O,2,分解，生成,H,2,O,和,O,2,H,2,O,2,H,2,O,+O2,RH2 +H2O2 R +2H2O,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第9页,过氧化物酶的显示和观察专家讲座,第10页,