微生物平板划线法

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,平板划线实验,STEP,STEP,1,细菌的培养,细菌的培养,细菌培养是一种用人工方法使细菌生长,繁殖,的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，它可以造福人类，也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养，即将其接种于,培养基,上，使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。,STEP,STEP,2,培养基,在土壤、水、食品、空气以及人和动、植物中，不同种类的细菌混杂地生活在一起。若要研究其中某种细菌，就必须将各种细菌进行,分离,，以得到只含有这一种细菌的,纯培养,。当细菌分离成纯种后，常需要,接种,到有关的,培养基,中，以测试其各种生物学性状，不同的细菌需要不同的培养基进行培养,。,培养基的种类,按其物理性状分为：,固体培养基,液体培养基,半固体培养基,按用途分为：,基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基,STEP,STEP,3,细菌接种方法,常见的几种细菌的培养和基接种方法举例,平板划线接种法,斜面培养基,接种法,液体培养基,接种法,穿刺接种法,菌种,葡萄球菌和大肠杆菌的混合菌液,大肠杆菌培养物,大肠杆菌培养物枯草杆菌培养物,变形杆菌培养物痢疾杆菌培养物,培养基,普通琼脂平板,琼脂斜面,培养基,普通肉汤,培养基,半固体琼脂,培养基,平板划线法,平板划线法主要是借,划线,而将细菌在,琼脂平板,表面分散开，使,单个细菌,能固定在某一点，生长繁殖后形成单个的菌落从而达到,分离纯种,的目的。常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌的生长状况和观察某些生化反应。,平板划线法,接种方法,（,一,）标记,在培养皿底面，用记号笔注明接种的菌名、接种者姓名、日期等。,平板划线法,接种方法,（二）灭菌接种环,点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环，并放置火焰中,烧灼灭菌,，先将接种环的接种丝部分置于火焰中，待,金属丝,烧红并蔓延至,金属端,，再直接烧灼,金属环,直至烧红，然后由,金属环至金属杆,方向快速通过火焰，随后再反方向通过火焰，如此,23,次。然后将接种环移开火焰，待其,冷却,。,平板划线法,接种方法,（,三,）取菌种,左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的,试管,，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管塞，将试管管口迅速通过火焰,23,次进行灭菌。,将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管口及试管塞再次通过火焰,23,次灭菌，塞好试管塞，放至原来的位置。,平板划线法,接种方法,（,四,）分离划线接种细菌（四区接种法）,（,1,）左手手掌持琼脂平板培养基，大拇指与中指轻轻将平皿盖子拿起，右手持接种环在琼脂平板上端来回划线，涂成一细菌薄膜（约占平板的,1/10,），视为一区。划线时使接种环与接种平板面呈,3040,度角，以腕力在平板表面行轻而快地来回滑动动作。,平板划线法,接种方法,（,2,）旋转琼脂平板,90,度，烧灼接种环，以杀灭环上的残留细菌，将接种环触及培养基表面以使其冷却。灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线（约占平板,1/5,），此视为二区。,平板划线法,接种方法,（,3,）旋转琼脂平板,90,度，灼烧接种环灭菌并使之冷却。将灭菌接种环接二区连续平行划线（约占平板,1/4,），此为三区。,（,4,）旋转琼脂平板,90,度，接种环不必再灭菌，接三区连续平行划线，划满平板其余部分，此视为四区。,各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐渐稀释的目的。,平板划线法,接种方法,平板划线法,接种方法,（,5,）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养皿倒放，送进,37,温箱培养。,（,6,）培养,1824h,后将培养皿取出。观察琼脂平板表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、表面结构、透明度、颜色等性状。,Thank you!,