愈伤组织培养（PPT41页)

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第二章,愈伤组织培养,主要教学内,容,容,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,诱,诱,导,导,与,与,分,分,化,化,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,继,继,代,代,培,培,养,养,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,形,形,态,态,发,发,生,生,及,及,调,调,控,控,愈,伤,伤,组,组,织,织,培,培,养,养,的,的,应,应,用,用,愈,伤,伤,组,组,织,织,一,、,、,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,诱,诱,导,导,与,与,分,分,化,化,愈,伤,伤,组,组,织,织,，,，,原,原,是,是,指,指,植,植,物,物,受,受,伤,伤,之,之,后,后,于,于,伤,伤,口,口,表,表,面,面,形,形,成,成,的,的,一,一,团,团,薄,薄,壁,壁,细,细,胞,胞,，,，,在,在,组,组,织,织,培,培,养,养,中,中,，,，,则,则,指,指,外,外,植,植,体,体,的,的,增,增,生,生,细,细,胞,胞,产,产,生,生,的,的,一,一,团,团,不,不,规,规,则,则,、,、,疏,疏,松,松,的,的,薄,薄,壁,壁,细,细,胞,胞,。,。,一,般,般,情,情,况,况,下,下,，,，,植,植,物,物,组,组,织,织,均,均,能,能,诱,诱,发,发,形,形,成,成,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,。,。,由,外,外,植,植,体,体,形,形,成,成,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,，,，,标,标,志,志,着,着,组,组,织,织,培,培,养,养,的,的,开,开,始,始,。,。,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,形,形,成,成,条,条,件,件,一,个,个,成,成,熟,熟,的,的,植,植,物,物,细,细,胞,胞,经,经,历,历,了,了,脱,脱,分,分,化,化,之,之,后,后,，,，,之,之,所,所,以,以,还,还,能,能,再,再,分,分,化,化,而,而,形,形,成,成,完,完,整,整,的,的,植,植,株,株,，,，,是,是,因,因,为,为,这,这,些,些,细,细,胞,胞,具,具,有,有全,能,能,性,性。,外,植,植,体,体,的,的,选,选,择,择,与,与,灭,灭,菌,菌,植,株,株,茎,茎,的,的,切,切,段,段,、,、,叶,叶,、,、,根,根,、,、,花,花,和,和,种,种,子,子,，,，,或,或,把,把,其,其,中,中,的,的,某,某,些,些,组,组,织,织,切,切,成,成,片,片,或,或,块,块,状,状,等,等,均,均,可,可,作,作,为,为,外,外,植,植,体,体,。,。,植,物,物,生,生,长,长,调,调,节,节,物,物,质,质,通,常,常,情,情,况,况,下,下,，,，,诱,诱,导,导,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,培,培,养,养,基,基,中,中,都,都,含,含,有,有,较,较,高,高,浓,浓,度,度,的,的,生,生,长,长,素,素(,如,如2,4-D),和,和,较,较,低,低,浓,浓,度,度,的,的,细,细,胞,胞,分,分,裂,裂,素,素(,如,如6-BA),。,。,愈,伤,伤,组,组,织,织,诱,诱,导,导,成,成,败,败,的,的,关,关,键,键,主,主,要,要,受,受,外,外,植,植,体,体,的,的,类,类,型,型,及,及,培,培,养,养,基,基,组,组,成,成,，,，,特,特,别,别,是,是,激,激,素,素,的,的,种,种,类,类,和,和,浓,浓,度,度,水,水,平,平,的,的,影,影,响,响,。,。,1,、,、,植,植,物,物,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,形,形,成,成,结,结,构,构,根,据,据,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,的,的,性,性,质,质,和,和,细,细,胞,胞,组,组,成,成,的,的,特,特,点,点,，,，,可,可,以,以,将,将,它,它,们,们,的,的,结,结,构,构,分,分,为,为致,密,密和松,散,散两,种,种,类,类,型,型,。,。,致,密,密,型,型,松,散,散,型,型,2,、,、,愈,伤,伤,组,组,织,织,形,形,成,成,的,的,过,过,程,程,外,植,植,体,体,中,中,已,已,分,分,化,化,的,的,活,活,细,细,胞,胞,，,，,在,在,外,外,源,源,激,激,素,素,的,的,诱,诱,导,导,下,下,通,通,过,过,脱,脱,分,分,化,化,后,后,形,形,成,成,愈,愈,伤,伤,组,组,织,织,，,，,这,这,一,一,过,过,程,程,被,被,大,大,致,致,划,划,分,分,为,为,四,四,个,个,时,时,期,期,，,，,即,即诱导期、分裂期、形成期和分化期。,诱导期,：,是细胞,准,准备进,行,行分裂,的,的时期,。,。,特点：,代,代谢活,化,化了，,细,细胞内,的,的合成,代,代谢迅,速,速进行,，,，但细,胞,胞的大,小,小和外,植,植体时,一,一样，,没,没有多,大,大改变,。,。,诱导期,的,的长短,：,：,由一系,列,列内部,（,（植物,种,种类、,生,生理状,况,况）和,外,外部因,素,素（光,照,照、外,源,源激素,）,）决定,。,。,例如菊,芋,芋的诱,导,导期有,时,时还不,需,需要1,天,天，胡,萝,萝卜的,诱,诱导期,则,则要好,几,几天，,但,但菊芋,块,块茎经,过,过5个,月,月的贮,藏,藏后，,诱,诱导期,则,则须延,长,长到40h以,上,上。,可以从,内,内外因,两,两方面,着,着手，,改,改变诱,导,导期长,短,短,外因：,添,添加生,长,长激素,如,如2,4D,来,来刺激,处,处于静,止,止状态,的,的组织,。,。,分裂期,是指细,胞,胞通过,一,一分为,二,二的分,裂,裂，不,断,断增生,子,子细胞,的,的过程,。,。,外植体,的,的细胞,一,一旦经,过,过诱导,，,，其外,层,层细胞,开,开始迅,速,速分裂,，,，使细,胞,胞脱分,化,化。,在细胞,分,分裂期,，,，其形,成,成结构,和,和生理,生,生化都,发,发生深,刻,刻的变,化,化：,1.数,目,目迅速,增,增加。,2.平,均,均鲜重,下,下降。,3.体,积,积小，,内,内无液,泡,泡。,4核,和,和核仁,增,增大到,最,最大。,形成期,是指外,植,植体经,过,过诱导,期,期和分,裂,裂期后,形,形成了,无,无序结,构,构的愈,伤,伤组织,的,的时期,。,。,这一时,期,期愈伤,组,组织内,细,细胞的,特,特点是,：,：,大而,不,不规则,，,，高度,液,液泡化,，,，整个,组,组织是,比,比较松,散,散的。,细胞,增,增殖速,度,度快,适,适合用,液,液体培,养,养或悬,浮,浮培养,。,。,生长,旺,旺盛的,愈,愈伤组,织,织呈乳,黄,黄色或,白,白色，,有,有光泽,，,，也有,浅,浅绿色,或,或绿色,的,的；老,化,化的愈,伤,伤组织,多,多转变,为,为黄色,甚,甚至褐,色,色。,愈伤组,织,织形成,分化期,是指停,止,止分裂,的,的细胞,发,发生生,理,理代谢,变,变化，,导,导致形,成,成由不,同,同形态,和,和功能,的,的细胞,形,形成的,愈,愈伤组,织,织。,分化期,的,的主要,表,表现：,细胞分,裂,裂部位,和,和方向,发,发生改,变,变。,分化组,织,织瘤状,结,结构和,维,维管组,织,织的形,成,成。,体积不,再,再减小,。,。,出现各,种,种类型,的,的细胞,。,。,二、愈,伤,伤组织,的,的继代,培,培养,愈伤组,织,织在培,养,养基上,生,生长一,段,段时间,以,以后，,由,由于营,养,养物质,枯,枯竭，,水,水分散,失,失，以,及,及代谢,产,产物的,积,积累，,必,必须转,移,移到新,鲜,鲜培养,基,基上培,养,养，即继代培,养,养。,通过继,代,代培养,，,，可使,愈,愈伤组,织,织无限,期,期地保,持,持在不,分,分化的,增,增殖状,态,态。,由于代,谢,谢产物,的,的积累,会,会产生,毒,毒害作,用,用，如,果,果长时,间,间不继,代,代培养,，,，就会,使,使愈伤,组,组织变,成,成黑褐,色,色，继,而,而死亡,。,。,用继代,培,培养维,持,持愈伤,组,组织生,长,长，是,长,长期保,存,存愈伤,组,组织的,一,一种方,法,法。,一般来,说,说，愈,伤,伤组织,的,的增殖,生,生长只,发生,在不与,琼,琼脂接,触,触的表,面,面，而,与,与琼脂,接,接触的,一,一面极,少,少细胞,增,增殖，,只,只是细,胞,胞分化,形,形成紧,密,密的组,织,织块。,因,因此，,由,由于愈,伤,伤组织,的,的迅速,增,增殖，,整,整个愈,伤,伤组织,小,小方块,变,变成了,一,一个不,规,规则的,馒,馒头状,的,的组织,块,块。,它是愈,伤,伤组织,表,表面或,近,近表面,瘤,瘤状物,生,生长的,结,结果。,青苹,果,果愈,伤,伤组,织,织增,殖,殖培,养,养,乌桕,愈,愈伤,组,组织,增,增殖,培,培养,三,愈,愈伤,组,组织,的,的形,态,态发,生,生,形态,建,建成：外,植,植体,在,在适,宜,宜的,培,培养,条,条件,下,下经,过,过脱,分,分化,和,和再,分,分化,形,形成,完,完整,植,植株,的,的过,程,程。,在组,织,织培,养,养中,，,，从,外,外植,体,体形,成,成器,官,官或,无,无性,系,系的,形,形态,发,发生,，,，有,下,下面,两,两种,方,方式,：,：,不定,芽,芽方,式,式指愈,伤,伤组,织,织通,过,过再,分,分化,形,形成,不,不定,芽,芽再,生,生植,株,株。,这,这是,组,组织,培,培养,中,中常,见,见的,器,器官,发,发生,方,方式,。,。,愈伤,组,组织,的,的器,官,官发,生,生顺,序,序有,三,三种,情,情况,：,：,（1,）,）先,形,形成,芽,芽，,再,再在,芽,芽的,基,基部,长,长出,根,根形,成,成小,植,植株,。,。,（,（2,）,）先,产,产生,根,根，,再,再从,根,根的,基,基部,分,分化,出,出芽,形,形成,小,小植,株,株；,（3,）,）仅,单,单独,分,分化,根,根或,芽,芽，,即,即无,根,根的,芽,芽或,无,无芽,的,的根,。,。,形态,发,发生,方,方式,（,（一,）,）,形态,发,发生,方,方式,（,（二,）,）,胚状,体,体方,式,式指由,培,培养,细,细胞,诱,诱导,分,分化,出,出的,胚,胚芽,、,、胚,根,根、,胚,胚轴,的,的胚,状,状结,构,构，,进,进而,长,长成,完,完整,植,植株,。,。,四、,愈,愈伤,组,组织,形,形态,发,发生,的,的调,控,控,影响,因,因子,：,：,（一,）,）外,植,植体,本,本身,（二,）,）培,养,养基,（三,）,）培,养,养环,境,境,1,遗,遗传,型,型材料,的,的基,因,因型,对,对愈,伤,伤组,织,织的,器,器官,分,分化,有,有决,定,定性,的,的影,响,响。,2,器,器官,和,和部,位,位对有,些,些植,物,物而,言,言，,不,不同,的,的器,官,官或,组,组织,所,所形,成,成的,愈,愈伤,组,组织,，,，在,生,生理,上,上或,形,形态,上,上存,在,在明,显,显差,异,异。,3,年,年龄年龄,较,较幼,的,的外,植,植体,，,，不,仅,仅易,于,于诱,导,导形,成,成愈,伤,伤组,织,织，,而,而且,也,也容,易,易诱,导,导分,化,化成,植,植株,。,。,（一,）,）外,植,植体,本,本身,1,生,生长,调,调节,剂,剂细胞,分,分裂,素,素/,生,生长,素,素的,比,比例,是,是控,制,制芽,和,和根,形,形成,的,的重,要,要条,件,件之,一,一。,细,细胞,分,分裂,素,素/,生,生长,素,素比,例,例高,时,时有,利,利于,芽,芽形,成,成；,而,而这,一,一比,例,例低,时,时，,有,有利,于,于根,的,的形,成,成。,2,无,无机,营,营养,元,元素营养,元,元素,的,的缺,失,失会,导,导致,愈,愈伤,组,组织,生,生长,不,不良,，,，如,：,：,缺铁,：