尿液检验标准化质控进展简介

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,尿液检验,(jinyn),标准化、质控进展,曾 真,现 状解决方案,第一页，共三十九页。,第一章,干化学,(huxu),检测尿液有形成分质控,第二页，共三十九页。,检测化学项目,(xingm),多、速度快；,检测是红细胞、中性粒细胞的化学成分；,质控物为化学物质，不是真实形态学成分；,现 状,第三页，共三十九页。,干化学,(huxu),的问题,特异性不够好；,干扰物质的影响不能质控；,许多有形成分不能检测；,本底干扰检测结果：本底+尿液颜色干扰；,尿液漏滴造成漏检；,干化学方法自身不能证实检测的真实性；,不符合ISO15189；,只能,(zh nn),是过筛检测；,问 题,第四页，共三十九页。,例：干化学,(huxu),对白细胞检测的局限性,检测粒细胞的酯酶,淋巴细胞不能检测,干扰物质,(wzh),：,庆大、先锋、甲醛、胆红质等,第五页，共三十九页。,对 策,镜检证实和检测,(jin c),不能检测,(jin c),的有形成分；,使用特异性检测方法检测化学成分；,改进方法，减少本底干扰和漏检；,第六页，共三十九页。,第二章有形成分检测,(jin c),仪器的质控,第七页，共三十九页。,有形成分检测仪器技术,(jsh),不同质控不同,流式：,质控物为特制颗粒物；,机器视觉,(shju),技术：,红细胞,没有质控物的仪器,现 状,第八页，共三十九页。,第一节 流式技术,(jsh),仪器,第九页，共三十九页。,质控依据是血液分析,质控物为特制,(tzh),颗粒，不是尿液有形成分，为替代品，与实际检测无系统属性；,干扰物影响无法质控和检测；,检测错误时检测者无法获悉；,分类计数无意义；,实际意义是质控计数准确性；,质控依据,(yj),和问题,流式,第十页，共三十九页。,特制颗粒,质,质控物，,实,实际,(shj),检测无系,统,统属性,流式,第十一页,，,，共三十,九,九页。,无法质控,干,干扰,(gnro),错误,结晶,(jijng),、酵母菌,误,误,识,识别为红,细,细胞,流式,标记,(bioj),物,红细胞,仪器不能,审,审核,真菌,结晶,第十二页,，,，共三十,九,九页。,检测错误,时,时仪器无,法,法,(wf,),知道,流式,第十三页,，,，共三十,九,九页。,优势,(yush),和不足,优势：,1、流式+图像：,实,实现仪器,检,检测验证,功,功能；,2、图像,更,更直观、,可,可信；,不足,1、因为,拍,拍不到清,晰,晰图片，,所,所有图像,按,按相似性,处,处理获得,，,，由仪器,内,内图库提,供,供单一成,分,分的图片,；,；,2、拍不,到,到清晰图,片,片，识别,(shbi),极易出错,，,，验证功,能,能打折扣,；,；,3、验证,错,错误导致,提,提供图片,错,错误，结,果,果不正确,；,；,结论仍然,不,不能代替,镜,镜检,数字图像,流,流式,第十四页,，,，共三十,九,九页。,（CLSI原NCCLS),尿液分析,操,操作,(cozu),指南（第,三,三版）,GP16-A3,(2009),第十五页,，,，共三十,九,九页。,Number 4GP16-A324,Clinical and LaboratoryStandards Institute.All rightsreserved.,10.1.2 UrineParticle Analyzers,64-68,Automated urineanalyzers use various technologies to classify and enumerateparticles in urine.Depending ontheinstrument,thetechnologies incorporated can include impedance,digitalimagingflowcytometry,flowcytometry,light scatter,dyes,fluorescence,or some combination thereof.Particles with likecharacteristicsarethengroupedandclassified.Theelements that are typicallyidentifiedincludeRBC,WBC,epithelialcells(squamousandnonsquamous),casts(benignandpathologic),bacteria,sperm,mucus,crystals,andsmall roundcells.Samples showing abnormalities,eitherlaboratory-definedor as indicatedby the analyzer,arethen reviewed microscopically by atechnologist.Negative samples may obviate the needformanual microscopy.,第十六页,，,，共三十,九,九页。,国际标准,（,（GP16-A3,2009,年,年）给出,的,的解决,(jiju),对策,1、,数字图像,流,流式细胞,仪,仪、流式,细,细胞仪等,标本不论,是,是实验室,认,认为或仪,器,器检测异,常,常时（Samples showing abnormalities,eitherlaboratory-definedor as indicatedby the analyzer,）,）,必须,(bx,),用人工镜,检,检方法重,新,新检测确,认,认。,2、,阴性结果,可,可以免除,镜,镜检确认,。,。,第十七页,，,，共三十,九,九页。,国际标准,(ujbiozhn),的参考文,献,献,64 DelangheJ.New screeningdiagnostictechniques in urinalysis.,ActaClin Belg,.2007;62:155-161.,65 Ottiger C,HuberAR.Quantitativeurine particleanalysis:integrative approach for the optimal combination of automationwith UF-100andmicroscopicreviewwithKOVA cell chamber.,ClinChem,.2003;49:617-623.,66 DelangheJR,Kouri TT,HuberAR,et al.The roleof automatedurine particleflowcytometry in clinical practice.,ClinChim Acta,.2000;301:1-18.,67 RoggemanS,ZamanZ.Safely reducingmanual urinemicroscopyanalysesbycombining urineflowcytometer and stripresults.,Am JClin Pathol,.2001;116:872-878.,68 Shayanfar N,Tobler U,vonEckardstein A,Bestmann L,.,Automatedurinalysis:first experiencesand acomparison betweenthe Iris iQ200urinemicroscopy system,the SysmexUF-100 flow cytometer and manual microscopicparticlecounting.,ClinChemLab Med.,2007;45:1251-1256.,第十八页，,共,共三十九页,。,。,第二节,机,机器视觉,(shju),技术仪器,第十九页，,共,共三十九页,。,。,质 控 依,据,据,机器,(j q,),视觉,方法学：显,微,微镜镜检,与人工显微,镜,镜镜检区别,：,：,操作自动化,前期,(qinq),仪器能智能,识,识别计数尿,液,液有形成分,国际标准：,ISLH,Recommended Reference Procedure fortheEnumeration ofParticlesin Urine(2003),第二十页，,共,共三十九页,。,。,ISLH,主要,(zhy,o),内容,1、不离心,尿,尿液直接检,测,测，计数池,体,体积达到6.4,ul,2、,低倍镜,观察计数大,型,型有形成分,（,（上皮细胞,、,、管型）；,高倍镜,观察计数小,型,型有形成分,（,（细胞,(xbo),、真菌、结,晶,晶等）,3、结,果,果,以“个/ul”报告。,4、统计学,精,精度,低倍：,（管型和上,皮,皮）至少计,数,数50个,CV14%；,高倍：,（红、白细,胞,胞等）至少,计,计数200,个,个，,CV7%,；,；,第二十一页,，,，共三十九,页,页。,一、标准,(biozhn),镜检参考方,法,法的检测特,点,点,不离心尿液,直,直接镜检,改变离心尿,液,液沉渣镜检,检测体积：,最,最大体积6.4ul(,不,不是1ul),目的：,提高灵敏度,，,，确保,(qub,o),检测准确性,原因：,不离心尿液,直,直接镜检极,易,易漏检,报告：个/ul,第二十二页,，,，共三十九,页,页。,机器视觉,(shju),技术采取的,方,方法,检测：不离,心,心尿液直接,(zhji),检测,检测体积：,大,大于6.4ul（通过,低,低倍镜大面,积,积扫描定位,。,。高倍镜跟,踪,踪识别而实,现,现）,实现：低浓,度,度不漏检,灵敏度达到,：,：1个细胞/ul,检测报告：,个,个/ul,第二十三页,，,，共三十九,页,页。,必须有两个,镜,镜头：高倍,镜,镜和低倍镜,两个镜头观,察,察的内容,(nir,ng),不同（大小,不,不同）,两个镜头观,察,察的,范围,不同（体积,范,范围不同）,两个镜头观,察,察的,细节,不同（分辨,率,率不同）,二、标准镜,检,检参考,(cnk,o),方法的基本,要,要求：,第二十四页,，,，共三十九,页,页。,采用两个镜,头,头,(jngtu),：高倍镜和,低,低倍镜,检测方式完,全,全按照显微,镜,镜镜检方法,机器,(j q,),视觉技术采,取,取的方法,第二十五页,，,，共三十九,页,页。,仪器工作流,程,程,完全参照人,工,工镜检标准,(biozhn),参考方法,进,样,充,池,低倍过筛,(ushi),（视野数可,设,设置）,低倍定位,(dngwi),分类计数,（管型、上,皮,皮）,高倍识别,分类计数,报,告,清洗,阴性,阳性,人工辅判,第二十六页,，,，共三十九,页,页。,统计学精度,低 倍：,（管型和上,皮,皮）至少计,数,数,(j sh),50个,CV14%；,高 倍：,（红、白细,胞,胞等）至少,计,计数200,个,个，,CV7%,；,；,这是在有形,成,成分浓度不,低,低时候的理,想,想统计学精,度,度,三、标准镜,检,检参考方法,(fngf),的理想精密,度,度,第二十七页,，,，共三十九,页,页。,通过,低倍镜：大,面,面积扫描定,位,位。,高倍镜：跟,踪,踪识别而实,现,现,上海检验中,心,心检测认证,(rnzhng),：CV为4%,临界浓度：,分,分布不均匀,，,，检测体积,过,过大；,机器视觉技,术,术,(js