分光光度测定方法-4

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第三节,分光光度测定方法,一,、,普通分光光度法,二,、,示差分光光度法,三,、,双波长分光光度法,一,、,普通分光光度法,1.单组分的测定,通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。,2.多组分的同时测定,假设各组分的吸收曲线互不重叠，那么可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。,假设各组分的吸收曲线互有重叠，那么可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。,A1=a1bCa b1bCb,A2=a2bCa b2bCb,二,、,示差分光光度法,普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差，可需采用示差法，即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。,设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs cx)。那么：,Ax=b cx,As=b cs,x s=b(cx cs=bc,测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差。,三,、,双波长分光光度法,不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(,1,和,2,)；,以参比波长,1,处的吸光度,A,1,作为参比，来消除干扰。在,分析浑浊或背景吸收较大,的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。,A,A,2,A,1,(,2,1,),b c,两波长处测得的吸光度差值,A,与待测组分浓度成正比。,1,和,2,分别表示待测组分在,1,和,2,处的摩尔吸光系数。,关键问题:,测量波长2和参比波长1的选择与组合,以两组分x和y的双波长法测定为例：,设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的吸光度差分别为:,Ax和Ay，那么该体系的总吸光度差Ax+y为：,Ax+y=A x+A y,如何选择波长1、2有一定的要求。,选择波长组合1、2的根本要求,选定的波长1和2处干扰组分应具有相同吸光度，即：Ay=A y2 A y1=0,故：Ax+y=A x=(x2x1)bcx,此时：测得的吸光度差A只与待测组分x的浓度呈线性关系，而与干扰组分y无关。假设x为干扰组分，那么也可用同样的方法测定y组分。,可采用作图法选择符合上述两个条件的波长组合,。,在选定的两个波长,1,和,2,处待测组分的吸光度应具有足够大的差值。,