实验9高温对植物细胞膜的伤害

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验九 高温胁迫对植物细胞膜的伤害,1.实验目的,学习电导仪法测定膜相对透性的方法,理解逆境对植物膜透性的影响,植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选择透性是其最重要的功能之一。,当植物受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，,膜的透性增加，选择透性丧失，细胞内部分电解质外渗，,将植物组织浸入去离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导率愈大。,膜结构破坏的程度与,逆境的强度,、,持续的时间,、,作物品种,的抗性等因素有关。因此，质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生理指标，广泛应用在植物抗性生理研究中。,本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁迫情况下植物受害的程度。,2.实验原理,当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗，其中包括,盐类、有机酸,等，这些物质进入环境介质中，如果环境介质是蒸馏水，那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增加，表现在电导率的增加上。植物受伤害愈严重，外渗的物质越多，介质导电性也就越强，测得的电导率就越高（不同抗性品种就会显示出抗性上的差异。）,本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁迫情况下植物受害的程度。,伤害率,本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害,电导率 K=GQ,Q:电极常数（电导仪本身决定）,G:实测电导值,伤害率（）,处理电导率,煮沸电导率,100,3 材料、仪器设备及试剂,（一）材料：梧桐叶片；,（二）仪器设备：,1.电导仪；2.打孔器；3.真空干燥器；,4.恒温水浴锅；,4 实验步骤,1)打取叶圆片：自选叶片，洗净吸干，避开叶脉打取30个叶圆片,放入1支试管,再打取30个叶圆片,放入另1支试管,依此类推,每支试管皆放入30个叶圆片；,2)试管分别编号为：1A,1B,2A,2B 5A,5B，每管加入15ml,纯水,抽真空20min；,3)水浴处理：5组(,1A1B,2A2B 5A5B)分别在60水浴0，10，20，30，40min，取出后用自来水冷却10分钟；,高温处理时间（,min,）,CK（0）,10,20,30,40,重复1,1A,2A,3A,4A,5A,重复2,1B,2B,3B,4B,5B,4)测量电导率,：用电导仪测定浸泡溶液的电导率（分组单独领取电导仪，详细使用方法分组指导）；,5)煮沸电导率,：测过电导率的10支试管再放入100沸水浴中15min，以杀死植物细胞，使细胞内物质全部渗漏出来，取出试管后用自来水冷却10min，测其煮沸电导率。,电导仪的使用方法,电源开关“开”，预热；,打开（测量/校正）拨至“测量”；（补偿/一般）拨至“一般”；（1/10,-2,）拨至“1”；量程范围选“10,3,”，使待测值介于0.10.999之间。,每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并用吸水纸轻轻拭干。,处理电导率C,t,A B,煮沸电导率C,100,A B,伤害率,（C,t,C,100,）,100,A B,伤害率,平均值,CK（0）,10 min,20 min,30 min,40 min,5 数据记录与处理,表1 高温对叶片伤害率的影响,6 实验结果及分析,计算电导率时，取2支试管的平均值,计算伤害率,比较,不同时间处理,的叶片细胞透性的变化情况，记录结果，并加以解释,以伤害率同处理时间的关系作图,7 注意事项,整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶片，以免污染；,水浴加热隔几分钟摇一次，测量前也要摇匀；,煮沸时单管要分开，否则沸水窜入试管；,每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极，并轻轻拭干。,