《HPV型别检测》PPT课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,HPV,检测在宫颈癌诊治中的应用,胡飞红,在,2003,年，香港天后级艺人，,梅艳芳,身患癌症，在她刚刚过完,40,岁生日后离开人世,宫颈癌与,HPV,关系,豪森，德国人，,2008,年,10,月诺贝尔奖获得者,研究了人乳头状瘤病毒与宫颈癌的关系,HPV,型别与宫颈病变,HPV,病毒通过皮肤表面的微小创口侵入,更多的,HPV,病毒侵入到创口周围组织并进入上皮细胞,病毒复制,HPV,检测在宫颈癌诊治中的临床意义,常用,HPV,检测方法的分析,1.,细胞学检查,传统巴氏涂片（,CV,）,液基薄层细胞学技术,(TCT),2.,组织学检查（,肉眼观察。阴道镜观察。组织检查,）,3.,感染组织中,HPV,蛋白的检测,4.,HPV,感染的血清学检查,检测人体血清中是否存在有针对,HPV,产生的抗体，通过免疫学方法进行检测,。,检测人体血清中是否存在有针对,HPV,产生的抗体，通过免疫学方法进行检测。,HPV,基因检测,5.,HPV,基因组检测,1.,基于,PCR,靶向扩增,2.,基于,PCR,产物分析,杂交分析,1。基于PCR靶向扩增,2.,基于,PCR,产物分析,2.,基于,PCR,产物杂交分析,（4）基因芯片技术,杂交捕获法,杂交捕获一代（,HC-,),试验可检测,9,种高危型,HPV,包括,16,、,18,、,31,、,33,、,35,、,45,、,51,、,52,和,56,。所用的反应载体是试管；,杂交捕获二代试验,(HC,),原来的试管法改为,96,孔平板法，能同时检测,13,种高危型,HPV(16,、,18,、,31,、,33,、,35,、,39,、,45,、,51,、,52,、,56,、,58,、,59,和,68),。,杂交捕获法,捕获杂交法,（,通过对病毒,DNA,解链,杂交捕获,光信号放大获取结果）,基本实验步骤如下：,1.,样本,DNA,双链被释放并分解为核苷酸单链,;,2.DNA,单链与,RNA,探针结合为,RNA,DNA,杂交体,;,3.,特异性抗体将,RNA,DNA,杂交体固定在试管壁或微孔壁上,;,4.,结合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与,RNA,DNA,杂交体结合,使信号放大,;,5.,碱性磷酸酶使酶底物发光,判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定,RNA,DNA,杂交体的含量,。,HCII,唯一通过,FDA,批准可在临床使用的,HPV,技术,DNA,裂解,RNA-DNA,杂交 抗体捕获 化学发光 计算机判读,新发展的一项诊断技术，在,HPV,分型中用寡核苷酸原位合成法，原理是将疾病的特征性基因片段或致病病原体片段固定芯片上，制成诊断芯片，提取患者样本中核酸行标记作探针，利用探针与芯片杂交，扫描杂交结果，判断基因型分型是否被感染，可诊断,HPV,潜在感染，行早期预防,基因芯片技术,HPV,基因芯片检测,总结。,总之，目前的,HPV,分型检测技术主要基于聚合酶链反应。,HPV,特定型别在宫颈疾病发展中的重要作用，考虑到,HPV,型谱的多样性和多重性,HPV,联合感染的高发率，准确的,HPV,检测显得尤为重要。不断寻求更准确，快速有效的检测技术。,注：,如何对待,HPV,感染？,1.HPV,感染较为常见,2.,多数,HPV,可以被清除,“,一过性”感染不致宫颈病变,3.,少数持续性感染会引发宫颈病变,4.HPV,致,CINI,、,CINII,、,CINIII,到浸润癌需要相当长的时间，一般是,810,年,5.,致宫颈癌的是高危型,HPV,6.HPV(+),只说明是一种感染，并非是一种疾病,7.,没有,HPV,感染可以不得宫颈癌,因此避免,HPV,感染可以避免发生宫颈癌,8.,目前治疗,HPV,感染的方针是“治病不治毒”,对于,HPV,感染的检查与治疗的轻视和过分恐惧都不适宜,谢谢！,