疫球蛋白测定及应用

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,免疫球蛋白测定及应用,谷俊莹,一、免疫球蛋白定量检测方法,（一）单向琼脂扩散法,1.原理,2.操作方法,3.影响因素 抗血清，温度，标准曲线，异常沉淀线,（二）免疫比浊法,透射比浊法 散射比浊法,1.原理,2.操作方法,3.影响因素 抗血清，缓冲液，待测血清,（三）,ELISA,法,（四）放射免疫法,（五）免疫电泳及免疫固定电泳,二、免疫球蛋白定量方法学评价及应用,依据存在于血清和其他体液内的各类,Ig,含量不同，采用不同的方法进行测定。,单相琼脂扩散实验敏感度不高，30,mg/L，,检测时间长，批内变异系数大，准确性受诸多因素影响，抗血清用量大，有商品化的检测板供应，操作简便，不需特殊设备可进行血清,IgG、A、M,定量,火箭电泳敏感度较高，0.3,mg/L，,操作简便省时，结果重复性好可进行血清,IgG、A、M,定量,免疫比浊法简便、快速，可自动化，敏感度高，0.1,mg/L，,准确性好，批内变异系数2%4%可进行血清,IgG、A、M、D,定量,放射免疫测定主要用于微量分析，敏感度10,g/L，,试剂保存期短，放射性核素污染用于血清,IgE,定量,免疫胶乳比浊法操作简便，快速、可自动化、敏感度0.1,mg/L，,但胶乳试剂制备较难，目前试剂盒品种较少、未广泛应用用于血清,IgG、A、M、D,定量,酶联免疫吸附法 方法简便，商品化试剂盒、敏感度0.1,mg/L，,重复性好、变异系数小，定量每次带标准检测，可定量血浆,Ig,以外如体液中,Ig,可用于尿、脑脊液、胸腹水,Ig,定量及血清,IgE,定量,三、免疫球蛋白定量临床意义,（一）血清,Ig,定量临床意义1.低,Ig,血症（1）先天性低,Ig,血症,（2）获得性低,Ig,血症,2.,高,Ig,血症（1）非特异型多克隆免疫球蛋白增高症,（2）特异型单克隆免疫球蛋白增殖症,3.IgD,在疾病中的意义尚不明确。妊娠末期及吸烟者,IgD,含量升高。,IgD,型骨髓瘤患者血清中,IgD,水平比正常人高10000倍，是惟一明确可作为确诊的证据,。,4.,血清总,IgE,寄生虫感染时,IgE,升高，特异性哮喘，过敏性鼻炎等患者血清中,IgE,含量升高与发病及缓解呈平行关系。,IgE,骨髓瘤。,SLE，,类风湿关节炎患者,IgE,含量升高。,（二）尿微量,Ig,定量临床意义1、肾功能状态鉴定,2、,SLE,患者肾损伤程度判断,3、糖尿病患者肾损伤程度判断,（三）脑脊液微量,Ig,定量的临床意义,CSF,中,IgG,增高见于：,中枢神经系统内源性合成增加 血中,IgG,增高,血脑屏障通透性增高。,四、M蛋白的检测,M,蛋白是,B,淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白（,monoclonal Ig），,多见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症和恶性淋巴瘤。,（一）血清蛋白区带电泳,M,区带的出现,（二）免疫球蛋白定量,某一类免疫球蛋白的显著增高,（三）轻链片段定量测定,单向免疫扩散法或,ELISA,（,四）免疫电泳或免疫固定电泳,（五）本周蛋白测定,