根系活力测定[TTC法]

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,根系活力的测定,TTC,法,制作人,：,刘新,单 位,：,生命科学学院 植物生理学教研室,一、实验目的,H,2,O,无机盐,合成氨基酸和植物激素（,ABA,、,CTK,、,GA,等）,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量,测定根系活力，为植物营养研究提供依据。,理解植物根系活力的内涵,掌握根系活力测定的原理与方法,二、实验原理,氯化三苯基四氮唑（,TTC,）是标准氧化电位为,80mV,的氧化还原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙（,TTF,）。,生成的,TTF,比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化,TTC,TTF,根系活力,脱氢酶,丙二酸,碘乙酸,琥珀酸,延胡索酸,苹果酸,促进,抑制,（无色，溶于水）,（红色，不溶于水）,三、实验材料,水培或砂培小麦、玉米等植物根系。,四、实验步骤,制作,TTC,标准曲线,吸取,0.25mL TTC,加入,10mL,容量瓶,Na,2,S,2,O,4,加少许,Na,2,S,2,O,4,乙酸乙酯,乙酸乙酯定容,0.25mL,0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL,TTC,含量（,g,）,25,50,100,150,200,乙酸乙酯作参比，测定,485nm,下光密度值，绘制标准曲线,四、实验步骤,测定根系活力,0.5g,根尖样品,0.4,TTC,和磷酸缓冲液的等量混合液,10ml,根充分浸没于溶液中,37,下暗保温,1,3h,加入,1mol/L,硫酸,2ml,取出根吸干水分,与,3,4ml,乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎,红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到,10ml,空白试验作参比测,485nm,下吸光度,与此同时做一空白实验，先加硫酸，再加根样品，其他操作同上,查标准曲线，求四氮唑还原量,五、实验结果,四氮唑还原强度,（,mg/g(,根鲜重,)/h,）,四氮唑还原量（,mg,）,根重（,g,）,时间,(h),六、思考题,1.,植物的根与地上部分有何关系,?,2.,反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹果酸各起何作用？,3.,测定根系活力时最好选择根的哪个部位？为什么？,4.,为什么要以杀死根系作为空白对照？,