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单击此处编辑标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,培养基的分类和成分,自养异养微生物碳源的区别,比较消毒和灭菌,举例说明消毒和灭菌,制备培养基的程序,溶化操作中搅拌的作用,为什么将平板倒置,课题,1,微生物的实验室培养,专题,2:,微生物的培养与应用,了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。,一、课题目标：,掌握,培养基的制备,、,高压蒸气灭菌,和,平板划线法,等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。,无菌技术的操作。,二、课题重点和难点：,三、技能目标：,课前预习,一、平板划线法 稀释涂布平板法,1.,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线 接种环 烧红 菌液中沾取一环菌液 迅速伸入平板内划,35,条平行线 第一区域划线的末端开始往第二区域内 最后一区域的划线与第一区相连,2.,稀释 不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面 稀释度足够高时,9,试管灭菌,1 1,酒精,0.1 810s,均匀 转动培养面 分布均匀 二、临时,4,0,c,甘油,-20,0,c,预习自测：,C D D D B,接种方法有：,平板划线法,和,稀释涂布平板法,平板划线法,:,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面,.,在数次画线后,可以分离到,由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是,菌落,.,微生物的接种技术,（二）、纯化大肠杆菌,菌落：,单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落,。,菌落,是鉴定菌种的重要依据。,一个菌落就是一个种群,菌落,细菌的菌落特征因种而异,问题讨论,1-1,（,1,）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？,操作的第一步灼烧接种环是,每次划线前灼烧接种环是,划线结束后灼烧接种环,是消灭接种环上的微生物,；,消灭接种环上残留菌种,（使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。）,是防止细菌污染环境和感染操作者。,（,2,）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？,答：以免接种环温度太高，杀死菌种。,（,3,）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线,？,答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。,问题讨论,1-2,（,2,）应从操作的各个细节保证,“,无菌,”,。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。,（,1,）要注意防止杂菌污染，比如试管、移液管要经过灭菌，操作在酒精灯附近进行（移液管和试管口应在离火焰,1-2cm,处）。,问题探讨,2,（,1,）培养未接种的培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。,（,2,）原有培养基灭菌不彻底或杂菌污染。,
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