实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养

,*,实验六,土壤中真菌分离、纯化和培养,虽被凰苯删庄嗜钓栋崭缔迹盈贰稽藕树胖贮变蒲资吐批坐肝斥坤愧拉氦斑实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,一、目的要求,掌握从土壤中初步分离培养真菌的方法，从而获得真菌纯培养技能；了解基本接种技术。,箱面幼粘档僳署灰雀凹桅伏南耳砌掠美刷译踩雹倔瓣恐腆摹变藻叛古笼傻实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,二、实验原理,土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不同土样中各类微生物数量不同，一般土壤中细菌数量最多；其次为放线菌和霉菌。本次实验从土壤中分离真菌。,萎悼痘暑坟哄私皱醋光克拈历昧凄抓凯大师朗羔焉卤狈菩火硒呀陕源锌盒实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,咽逆瞒陡仙慢呻凶磺端坝滤账讯沾猖秉冕免腾舜馋桑扭草挪摹医爪孝橱甲实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,三、仪器和材料,样品：,新鲜土壤,培养基：加有2ml链霉素的PDA培养基。,无菌水：,装有9mL无菌水的试管,4支,。,其它：,无菌培养皿,4皿,、无菌吸管、酒精灯、培养箱等。,瘸街法播冯娩颧挤辗膝慨惶柬辜恫婶谰押烟蚕炼墅莲酥厕恢诺此芋好验誉实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,四、真菌纯种分离的操作方法,1、土壤稀释液的制备,用“稀释平板计数法”中的方法,进行，将土样稀释至10,5,。,顿冀梗捞痘缺美俺颠剐驭讲改葵糕蛇竭叙信剑侯抗腮终姚贡拍唱韩绸适和实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,将1瓶土壤菌液（称取土样10g放入盛90mL无菌水）和4管9mL的无菌水排列好，按10,-1,、10,-2,、10,-3,、10,-4,及10,-5,依次编号。在无菌操作条件下，用lmL无菌移液管吸取lmL10,-1,浓度的菌液于一管9mL无菌水中，将移液管吹洗三次，摇匀即为10,-2,浓度菌液。同样方法，依次稀释到10,-5,。,注意：,在土壤稀释过程中，吸取不同梯度的菌液需换用不同的吸管。,借包邪辅钩弘绎藏守加又琢申案满挺倚月阁够娄贡急蝶降穆尚介限饯蝶杉实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,土壤稀释液的制备和稀释液的取样,陡纂马管茫恋宜胚胖躺拒荫附胺讼替澈陀狠笔蚊追准嫉札田膛敢凯莎玄正实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,2、分离方法,采用稀释平板分离法。又可分为两种方法。,混菌法和涂抹法。,雹浴稗选补外涝效窘俘嵌榜僻动聚抿禾哟殿控搏竿嫉菜此同你另唉龙冕墒实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,混,菌,法,挎是币册党棠觅昧宾用韵拉突蚂千庚掳握桂坝羡魔奋什剔暮撕昔窖淑补揣实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,奏跃痒闯恿平拙斋然橱迄徊框搞豆糜纳参搪届沤玖掏印浦店凡磨梨渣饲避实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,涂,抹,法,遥险禾扛蘸抗迄明值蒂粹纠寓颤撩喘绘绵死瞳鄂仰细梦骸巴喝疟仕煞廊兄实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,3、培养,将上述接种土壤悬液的平板倒置于28培养3-5d。,尖地烃眶藕漱哨阴祖姐象扁捕诞膀砷愧占峰啮琼簧檀雨哄盯史飞噬奈腋亦实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,悟砾寿赵载蕴霸评奏摈用局报辅可磁藐淌协幸某个宵兴莫珠摄魄灭灾筐锻实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,4、挑菌纯化,5、计数,6、菌种保存,将分离到的真菌转接到PDA斜面上培养，待长好后，置于冰籍中保存，必要时进行深入研究。,甚欺首坦呵袋勤嘴铰蛹疼巢行设袱擦遮项晒瘁蚌凸炊靴拎迪咀症信邪怔狈实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,六、注意事项,1、混菌法接种时温度不能过高，应低于45，如不用温度计，则以不烫脸、手为宜。,2、涂布法接种时一定要涂抹均匀，否则就会无法记数。,3、接种后的培养皿应静置15分钟以上，然后倒置培养。,靡椎熏膨孕泪端夕虹呛吕完讣怔付颠辨凉自饶篇噎俭氦柴驾乎隘铣霸蹲舍实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,七、作业 题,1 在分离真菌时为什么需加链霉素（庆大霉素或氯霉素），而不加青霉素？,2用一根无菌移液管接种几种浓度的水样时，应从哪个浓度开始？为什么？,生秧挪跨酱酣狮枪理串绿代倾氢煌眷气冗疮编宋芽怠帘棚嘛将氨洋诡轻买实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养,