食品中亚硝酸盐含量的测定

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品中亚硝酸盐含量的测定,一、实验目的,1.,掌握样品制备、提取的基本操作技能。,2.,进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。,3.,掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。,二、实验原理,样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条,件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成,重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的,的染料，其颜色的深浅与亚硝酸盐的含量成正比，,可与标准比较定量。通过分光光度计比色测定，计,算出样品中亚硝酸盐的含量。反应如下：,三、仪器与试剂,1.仪器,小型绞肉机,分光光度计,2.试剂,亚铁氰化钾溶液：称取106,g,亚铁氰化钾溶于水，,并定容至1000,ml。,醋酸锌溶液：称取220,g,醋酸锌，加30,ml,冰醋酸，,溶于水并定容至1000,ml。,硼砂饱和溶液：称取5,g,硼砂溶于100,ml,热水中，,冷却后备用。,0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4,g,对氨基苯磺,酸，溶于100,ml 20%,的盐酸中，避光保存。,0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2,g,盐酸萘乙二胺,溶于100,ml,水中，避光保存。,亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000,g,于硅胶干,燥器中干燥24小时亚硝酸钠，加水溶解移入500,ml,容,量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每,ml,相当于200,ug,亚,硝酸钠。,亚硝酸钠标准使用溶液：临用前，吸取亚硝酸钠,标准溶液5.00,ml,置于100,ml,容量瓶中，加水稀释,至刻度。此溶液每,ml,相当于10,ug,亚硝酸钠。,四、实验步骤,1.样品处理,称取经绞碎并混合均匀的样品20克于100,ml,烧杯中，,加硼砂饱和溶液40,ml，,搅拌均匀后，以70以上的热,水100150,ml,将样品全部洗入250,ml,容量瓶中，放入沸,水浴中加热15分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加,入亚铁氰化钾溶液20,ml，,摇匀后，再加入醋酸锌溶液,20,ml，,以沉淀蛋白质。然后，加水至刻度，混匀，放,置半小时后，弃去上层脂肪，清液用滤纸或脱脂棉过,滤，弃去初滤液510,ml，,滤液备用。,2.测定,吸取上述滤液40,ml,于50,ml,容量瓶中，同时吸取0.0、,0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0,ml,亚硝酸,钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、,8.0、12.0、16.0、20.0,ug,的亚硝酸钠）分别置于,50,ml,容量瓶中，各加水至25,ml,处。在样品管及标准管,中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4,ml，,混匀后静置,35分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐,酸萘乙二胺溶液2,ml，,加水至刻度，摇匀，静置15分,钟后，用1,cm,的比色皿，以零管调节零点，于波长,538,nm,处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的,亚硝酸盐含量。,五、结果计算,X,=,式中：,X,样品中亚硝酸盐的含量，,g/kg；,A,样品溶液中亚硝酸盐的含量，,ug,；,m,样品的质量，,g。,测定时吸取样品液的体积与样品定容体,积之比。,六、注意事项,1.,盐酸萘乙二胺有致癌的作用，使用时注意安全。,2.,显色后稳定性与室温有关，一般显色温度为,1530时，在2030分钟内比色为好,。,