HIV筛查实验室的质量管理与控制教材

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2017/4/21,#,HIV,筛查实验室的质量管理与控制,质量保,证,证,一、人,员,员培训,人员要,求,求,3名以上技术人,员,员,至少1人具有,中,中级职,称,称、2年以上,血,血清学,检,检验工,作,作经验,上岗要,求,求,上岗前,必,必须接,受,受技术,培,培训并,获,获得合,格,格证书,每年接,受,受复训,一,一次,培训内,容,容,HIV检测相,关,关基础,知,知识、,检,检测技,术,术及管,理,理要求,、,、实验,操,操作、,质,质量管,理,理与控,制,制、生,物,物安全,。,。,使用新,方,方法前,对人员,进,进行培,训,训,获得资,格,格,开展相,应,应工作,检验人,员,员,检测人,复核人,签发人,不能一,人,人同时,承,承担多,个,个角色,！,！,二、环,境,境条件,HIV筛查实,验,验室,实验室,或,或检测,区,区域应,分,分为清,洁,洁区、,半,半污染,区,区和污,染,染区，,应,应符合,二,二级生,物,物安全,实,实验室,（,（BSL,-,-2）要求,。,。,配备开,展,展HIV抗体检,测,测所需,的,的设备,：,：生物安,全,全柜、酶标,仪,仪、洗,板,板机、,恒,恒温孵,育,育箱、,离,离心机,、,、加样,器,器、冰,箱,箱等。,三、样,品,品的采,集,集和保,存,存,尽量避,免,免,溶血,细菌污,染,染,抗凝不,完,完全,假阳性,内源性HRP,红细胞,破,破裂释,放,放活性,物,物,纤维蛋,白,白原干,扰,扰,注：血,清,清置4冰箱5天内完,成,成检测,四、检,测,测方法,和,和试剂,选,选择,试剂,必须是HIV,-,-1/2混合型,，,，并且,经,经国家,食,食品药,品,品监督,管,管理局,注,注册批,准,准、批,检,检合格,、,、在有,效,效期内,，,，经临,床,床质量,评,评估敏,感,感性和,特,特异性,高,高。,更换试,剂,剂批号,时,时应进,行,行平行实,验,验。,检测方,法,法,使用可,靠,靠的检,测,测方法,，,，常用,：,：ELISA和快速,检,检测。,五、设,备,备维护,与,与校准,酶标仪/洗板机,加样器,温度计,高压锅,国家法,定,定部门,定,定期校,准,准（每年至,少,少1次）,精密仪,器,器,生产厂,家,家校准,（,（每年至,少,少1次）,均须做,好,好日常,维,维护及,使,使用记,录,录,蛋白印,迹,迹仪,流式细,胞,胞仪,病载仪,六、文,件,件和文,件,件管理,1.标准操,作,作程序,（,（SOP）,至少建,立,立以下SOP,样品的,接,接收、,登,登记、,处,处理和,保,保存,检测方,法,法和步,骤,骤,试剂使,用,用和保,存,存,仪器的,使,使用、,维,维护和,校,校准,质量控,制,制要求,及,及程序,结果解,释,释与报,告,告,保密程,序,序,实验室,数,数据、,相,相关文,件,件记录,与,与保存,不确定,样,样品追,踪,踪和处,理,理,实验室,安,安全防,护,护、清,理,理及消,毒,毒,SOP应包括,的,的内容,标题和,编,编号,编写和,修,修订日,期,期,编写和,修,修订人,员,员姓名,方法、,目,目的和,应,应用范,围,围,检测设,备,备,试剂及,有,有效期,安全防,护,护相关,步,步骤,结果的,解,解释和,报,报告,附录,每年修,订,订一次,2.实验原,始,始记录,原始记,录,录表,试剂厂,家,家,测定方,法,法,试剂批,号,号,试剂效,期,期,操作人,员,员姓名,复核人,员,员姓名,检测日,期,期,3.结果报,告,告,试剂盒,质,质控品,外部质,控,控品,满足要,求,求,不满足,要,要求,分析结,果,果,重新检,测,测,复核人,签,签字,签发人,签,签字,4.HIV标本的,保,保存记,录,录,标本保,存,存记录,标本类,型,型,贮存量,贮存温,度,度,贮存起,始,始时间,标本保,管,管人,标本复,核,核人,5.样品登,记,记和保,存,存,收样,建立唯,一,一编码,登记相,关,关信息,保存,姓名、,性,性别、,年,年龄、,检,检测日,期,期,6.文件存,档,档,实验原,始,始记录,、,、打印,数,数据、WB试验的,反,反应条,带,带或照,片,片、样,品,品登记,表,表、样,品,品保存,记,记录表,等,等应妥,善,善存档,保,保存10年以上。,质量控,制,制,一、实,验,验室质,量,量控制,的,的定义,为达到,质,质量要,求,求所采,取,取的作,业,业技术,和,和活动,。,。,定义,二、酶,免,免或发,光,光法抗,体,体检测,的,的室内,质,质量控,制,制,1、室内,质,质量控,制,制的质,控,控品,试剂盒,内,内部对,照,照,判断试,验,验有效,性,性，但不能作,为,为室内,质,质控品。,室内质,控,控品,监控检,测,测的重,复,复性。,可,可只设,弱,弱阳性,质,质控，,以,以试剂,盒,盒临界,值,值的23倍为宜。,3、室内质,控,控血清,的,的制备,收集阳,性,性血清,（无溶,血,血、黄,疸,疸、脂,肪,肪）,56、30min灭活,3000r/min离心15min,正常人,血,血清或10%小牛血,清,清PBS溶液稀,释,释,测量值,分装，-20冻存,4、,质量控,制,制方法,Levey-Jennings质控图,使用累,积,积和技,术,术或趋,势,势分析,技,技术的,图,图形提,供,供系统,偏,偏移和,漂,漂移的,状,状况。,质控图,参,参数,在不同,的,的批次,检,检测取,得,得的至,少,少20个数据,至少做5个批次,的,的检测,，,，每个,批,批次中,不,不少于4个质控,品,品检测,结,结果,平均值,标准差,变异系,数,数,控制限,样本量,足,足够,样本量,较,较少,质控的,规,规定和,使,使用,目前很,多,多质控,规,规则已,被,被采用,，,，最常,用,用的是1,2S,和1,3S,规则。,告警（1,2S,）：当,外,外部对,照,照的S/CO值超过2S范围时,，,，系统,处,处于告,警,警状态,，,，应予,注,注意，,是,是否可,以,以继续,检,检测需,要,要进一,步,步观察,。,。若将1,2S,做失控,标,标准，,有,有较高,的,的假失,控,控概率,，,，所以,一,一般不,采,采用。,警告,:,1,2S,规则违,背,背,失控（1,3S,）：当,外,外部对,照,照的S/CO值超过3S范围时,，,，系统,处,处于失,控,控状态,，,，本次,结,结果不,能,能被接,受,受。,失控,:,1,3S,规则违,背,背,位移：,连,连续几,次,次（3-5次）外,部,部质控,都,都落在,均,均值的,一,一侧。,提,提示试,验,验条件,发,发生了,较,较大改,变,变。,发生位,移,移,出现以,下,下情况,也,也应该,应,应该暂,停,停实验,，,，找出,原,原因。,连续两,次,次同一,方,方向超,出,出2S,连续四,次,次同一,方向超,出,出1S,失控原,因,因的处,理,理和分,析,析,处理,出现数,据,据违背,控,控制规,则,则,填写失,控,控报告,单,单,上交实,验,验室主,管,管,是否发,出,出检验,报,报告,决定,失控原,因,因的分,析,析,立即重,新,新测定,同,同一质,控,控品,用新的,质,质控品,重,重测失,控,控项目,检查仪,器,器状态,检查试,剂,剂,联系仪,器,器厂家,排除人,为,为或偶,然,然误差,排除质,控,控品变,质,质或污,染,染,失控,失控,失控,失控,“即刻,法,法”质,控,控,样本量,较,较少，,无,无法绘,制,制“L-J”质控,图,图时，,前,前20个数据,可,可采用,“,“即刻,法,法”。,该,该方法,只,只需3个测定,值,值即可,开,开始进,行,行质控,。,。,先将测,定,定值从,小,小到大,排,排列，X,1,最小，X,n,最大；,计算X和S；,计算SI,上限,值和SI,下限,值。,SI,上限,=（X,最大,-X）/S，SI,下限,=（X-X,最小,）/S,；,；,对照SI值表，,检,检查是,否,否失控,。,。,SI值表,n,n,3s,n,2s,n,n,3s,n,2s,3,1.16,1.15,12,2.55,2.29,4,1.49,1.46,13,2.61,2.33,5,1.75,1.67,14,2.66,2.37,6,1.94,1.82,15,2.71,2.41,7,2.10,1.94,16,2.75,2.44,8,2.22,2.03,17,2.79,2.47,9,2.32,2.11,18,2.82,2.50,10,2.41,2.18,19,2.85,2.53,11,2.48,2.23,20,2.88,2.56,当SI,上限,和SI,下限,n3s时说明,该,该值已,在,在3s范围之,外,外，属,“,“失控,”,”。,注：“,即,即刻法,”,”只能,在,在前20次内使,用,用，超,出,出即可,采,采用L-J质控图,法,法。,谢谢！,