尿路恶性肿瘤尿液中的标记物培训课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,*,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,FDP,：膀胱癌细胞产生血管内皮生长因子，增加外周血管的通透性，外渗的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，在纤维蛋白酶作用下分解为FDP（纤维蛋白降解产物）。敏感性和特异性分别为68%、78%。,端粒酶,：在生殖细胞和肿瘤细胞中出现，体细胞中不表达，敏感性和特异性分别为74%、79%。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,2,FDP：膀胱癌细胞产生血管内皮生长因子，增加外周血管的通透性,透明质酸和透明质酸酶,：二者合用敏感性、特异性达92%、85%。,FCM,：敏感性、特异性分别为58%、83%（非整倍体细胞）。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,3,透明质酸和透明质酸酶：二者合用敏感性、特异性达92%、85%,BLCA-4,：为核基蛋白的一种，对膀胱癌诊断的敏感性、特异性达96%、100%。,其它标记物,：细胞角蛋白、Lewis X抗原、微卫星及表面分子，如M344抗原、19A211、DD23、CD44等。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,4,BLCA-4：为核基蛋白的一种，对膀胱癌诊断的敏感性、特异性,膀胱癌新的肿瘤标记物-NMP22,膀胱镜检+组织活检,：膀胱癌诊断的金标准,缺点：侵入性，不适合大量人口普查，主观影响因素大。,尿细胞学检查,：诊断膀胱癌及术后监测复发常用非侵入性检查。缺点：假阴性高、敏感性差。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,5,膀胱癌新的肿瘤标记物-NMP22尿路恶性肿瘤尿液中的标记,目前，迫切需要侵入性小，更敏感、更客观的诊断技术。,NMPs,(nuclear matrix protein,核基蛋白）是细胞核的动态骨架，决定细胞核的形态，维持DNA的三维结构，是细胞核的结构单位。,NMP22,（NMPs的一种）是尿路上皮特异性肿瘤相关标记物。在BTCC中NMP22因肿瘤细胞凋亡由细胞核释放进入尿中。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,6,目前，迫切需要侵入性小，更敏感、更客观,NMPs的生物学特性,1974年Berezney和Caffy首次提出NMPs的概念。研究证明：NMPs主要由核纤层蛋白、核孔复合体、核糖蛋白网架结构构成，是细胞核内部框架结构的关键部分。决定胞核的形态，调控有丝分裂过程。在DNA复制，RNA合成，激素的连接，基因表达的调控中起重要作用。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,7,NMPs的生物学特性1974年Berezney和Caffy首,NMPs与肿瘤的关系,NMPs在许多重要的生理活动中起关键作用，许多细胞癌变都伴随着NMP的改变。,许多肿瘤特异性NMPs被发现：Robert(1996)对癌变和正常膀胱组织进行比较后发现了6种存在于癌变组织中的蛋白，而正常组织中无表达，它们是NMPs,BLCA-1 BLCA6。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,8,NMPs与肿瘤的关系 NMPs在许多重要的生理活,Mark(1996）对膀胱癌病人的尿液进行检测后发现一种核基质蛋白NMP22的含量特别高，用NMP22值预测膀胱癌病人术后复发的危险性，有较高的敏感性和特异性。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,9,Mark(1996）对膀胱癌病人的尿液进行检测后发现一种核基,NMP22的检测,单抗的制备,：膀胱癌细胞核-提纯NMP22-免疫小鼠-获取单抗（mAB302-22,Mab302-18)-制备酶联免疫反应试剂盒（ELLIS）。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,10,NMP22的检测 单抗的制备：膀胱癌细胞核-,检测,：试剂盒（标准品、参照品、检验样品）-与NMP22结合-洗涤后与标有地高辛的单抗反应-与抗地高辛酶联抗体反应-邻苯二胺显色-与标准品吸收光度曲线比较。（抗原在尿液中的浓度直接反映于呈色强度）,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,11,检测：试剂盒（标准品、参照品、检验样品）-与NMP,临界值,的确定,David等用尿NMP22值诊断膀胱癌的研究中用6.4u/ml和10.0u/ml作临界值，结果与膀胱镜检和活检对比：,敏感性 特异性,6.4u/ml 68.2%79.8%,10.0u/ml 48.5%91.8%,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,12,临界值的确定 David等用尿NMP22值诊断膀,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物培训课件,NMP22与其它方法的比较,Craig 对330名可疑病人进行尿NMP22测定、尿脱落细胞检查与组织活检对比：,敏感性 特异性 P值,NMP22 100%85%,（临界值10u/ml)0.001,尿脱落细胞 33%100%,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,14,NMP22与其它方法的比较Craig 对330名可疑病人进,Albert 按分期分级进行了比较：,敏感性（%),NMP22测定 尿脱落细胞检查,Ta 83.3 20.0,T1 97.7 64.4,G1 86.2 37.9,G2 97.2 44.4,G3,90.0 80.0,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,15,Albert 按分期分级进行了比较：尿路恶性肿瘤尿液中的标记,Landman 等对47例证实为膀胱癌的病人，分别用NMP22、端粒酶、BTA、尿细胞学检查进行比较（敏感性%）。,NMP22和端粒酶比BTA、尿细胞学检查具有更高的灵敏度。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,16,Landman 等对47例证实为膀胱癌的病人，分别用NMP2,分期,分级,Ta T1或更高 Cis G1 G2 G3,NMP22 81 82 67 69 86 93,端粒酶 80 91 100 65 72 93,BTA 40 64 33 13 36 79,尿细胞学 40 26 67 6 63 79,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,17,分期,NMP22与膀胱癌分期分级的关系,David 等对临床分期不同病人的尿NMP22值比较：,例数 平均值u/ml 中位数u/ml P值,Ta 44 31.1 8.42,T1 61 69.3 59.3 0.02,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,18,NMP22与膀胱癌分期分级的关系David 等对临床分期不同,Miyanga 等将病人分为表浅组（Tis,Ta,T1),浸润组（T2、T3、T4）进行比较，阳性率前者为70%，后者为100%，两组差异有统计学意义（P0.05)。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,19,Miyanga 等将病人分为表浅组（Tis,Ta,T1),浸,NMP22,与膀胱癌分级的关系,David 等对分级不同病人的尿NMP22进行比较:,例数 平均值u/ml 中位数u/ml P值,G1 13 12.4 3.02 0.001,(G1 vs G2),G2 27 24.2 9.14 无显著差异,G3 26 34.5 39.5 0.001,(G1 vs G3),尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,20,NMP22与膀胱癌分级的关系David 等对分级不同病人的尿,影响NMP22的因素,年龄、性别、种族、吸烟等,Gennaro 等报道：健康组样本中50岁比50岁值要低，女性高于男性。与种族、吸烟无明显相关性。,不受非泌尿系良性疾病的影响,：如糖尿病、心脏病、自身免疫病等。,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,21,影响NMP22的因素年龄、性别、种族、吸烟等尿路恶性肿瘤尿液,泌尿系疾病对NMP22的影响,：,Miyanaga 等对面280位住院和门诊病人、20位健康者进行比较：,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,22,泌尿系疾病对NMP22的影响：尿路恶性肿瘤尿液中的标记物22,NMP22 u/ml,阳性比 阳性率 中位数 范围,TCC 38/47 80.9%40.1 0.0-6731.3,有TCC史 11/32 34.4%6.1 0.5-555.7,其它尿路癌 11/26 42.3%6.0 0.0-544.9,尿结石 13/26 50.0%11.1 1.4-3207.7,尿路感染 19/19 100%150.6 27.2-58228.4,BPH 5/32 15.6%4.2 0.0-258.9,其它疾病 15/43 34.9%5.0 0.0-206.6,肾脏疾病 11/43 25.6%5.9 0.3-197.1,健康者 0/20 0.0%1.8 0.2-6.8,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,23,不同时段的尿液影响,:,Miyanaga 等分别取6,12,18时,三个不同时段的尿液标本检测,结果显示不同时段的尿液标本值,无统计学差异.,血尿的影响,:,Schacfer研究报道,尿标本中含有3.0X10,6,/ml 红细胞时,相当于10个/HP,NMP22值很少超过10u/ml.,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,24,不同时段的尿液影响:尿路恶性肿瘤尿液中的标记物24,血清NMP22与尿NMP22的关系,:,Miyanaga,Akaza等对血清,尿NMP22分别测定,结果两者之间无显著差异.,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,25,血清NMP22与尿NMP22的关系:尿路恶性肿瘤尿液中的标,尿NMP22检测的优点,敏感性强:比脱细胞检查更敏感,尤其在 Ta期和高分化肿瘤时,准确性强.,不受血尿影响:BTA等方法因含有血样造成检查结果有误,无痛苦，无创伤的检测,方法简单，快速，费用相对低，结果受主观影响小,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,26,尿NMP22检测的优点敏感性强:比脱细胞检查更敏感,尤其在,尿NMP22检查适应范围,临床血尿病人的初期筛查,膀胱癌病人的临床诊断,膀胱癌病人的术后定期复查,膀胱癌术后转移，复发的判断,高危人群中膀胱癌的普查,尿路恶性肿瘤尿液中的标记物,27,尿NMP22检查适应范围临床血尿病人的初期筛查尿路恶性肿瘤,