菊花的组织培养课件(经典)

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,萧县郝集中学,菊花的组织培养,指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或,原生质体,），在人工控制的,培养基及环境条件,（温度及光照）下，得以生长和,分化,成完整植株的一种无菌培养技术。,又称：,植物离体培养,一、,植物组织培养的概念,概念：,细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。,原因：,是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质,植物组织培养原理：,植物细胞的全能性,什么叫分化？其实质是什么,?,什么叫脱（去）分化、再分化？,愈伤组织的细胞有什么特点？,如何控制细胞的脱分化与去分化？,阅读,32,页解决下列问题：,二、植物组织培养的基本过程,基因的选择性表达,二、植物组织培养的基本过程,愈伤组织,三、影响植物组织培养的因素：,1,、外植体的选取,不同植物的组织培养难度不同,同一种植物的不同组织培养难度不同,2,、培养基的配制,(MS,培养基,),大量元素：,C,、,H,、,O,、,N,、,P,、,K,、,Ca,、,Mg,、,S,微量元素：,B,、,Mn,、,Cu,、,Zn,、,Fe,、,Mo,、,I,、,Co,有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,未开花植物的茎上部新萌生的侧枝,3,、不同植物激素使用顺序,使用顺序,实验结果,先生长素，,后细胞分裂素,有利于细胞分裂但不分化,先细胞分裂素，,后生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提高,4,、不同植物激素使用量,生长素,/,细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化，,抑芽形成,比值低时,促芽分化，,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？,生长素,/,细胞分裂素,高 利于根和愈伤组织的形成,适中 利于根芽的分化,5,、,pH,、温度、光照,（菊花组培）,pH=5.8,温度控制在,1822,每日光照,12h,6,、消毒,在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境,制备,MS,固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、实验操作,移 栽,冲洗,酒精,无菌水冲洗,氯化汞,无菌水冲洗至少三次之上,配制各种母液,配制培养基,灭毒,1,、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）,2,、外植体的消毒（酒精、氯化汞）,3,、接种的无菌操作（酒精、酒精灯,灼烧）,4,、无菌箱中的培养；,5,、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,在整个操作过程中，是如何来实现,无菌,环境的？,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析,（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化,（三）是否进行了统计、对照与记录,（四）生根苗的移栽是否合格,课题延伸（略）,练习,1.,答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。,2.,答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,菊花的组织培养,再分化,材料性质、营养物质、,调节物质、环境条件,外植体的消毒,接种,基本原理,:,细胞的全能性,基本过程,:,脱分化,愈伤组织,影响因素：,操作流程：,配制,MS,固体培养基,培养,移栽,栽培,