血培养注意事项

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,血培养注意事项,血培养注意事项血培养注意事项临床微生物学的任务,临床微生物学的任务,WHO,对临床微生物实验室提出三项指导性方针,（,1,）临床微生物实验室尽可能把目标集中在,快速诊断,方面；,（,2,）,显微镜检查,对建立快速的初步诊断具有很大价值；,（,3,）实验室人员必须,主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。,标本采集和处理的原则,发现感染应,及时,采集微生物标本作病原学检查,最好是病程,早期、急性期或症状典型,时，而且必须在,使用抗生素或其他抗菌药物之前,采集,标本采集时应,严格无菌操作,，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染,采集的标本均应盛于,无菌容器,内,要收集,足够量,的标本,标本采集后应,立即,送至细菌室,重视无菌部位的标本：血培养,分析当前血培养存在的问题：,报告不及时,阳性率低,采样时污染,培养一次（单部位）作为诊断依据,采血量不够（与培养基比例不正确）,采样时间不正确,血液培养操作规范,采集血培养的重要指征,1.,发热（,38,）或低温（,36,）。,2, 寒战。,3, 白细胞增多（,1010,9,/L,，特别有,“,核左移,”,未成熟的或带状的白细胞增多,),。,4, 粒细胞减少（成熟的多核白细胞,110,9,/L,）。,5, 血小板减少。,6, 皮肤粘膜出血。,7, 昏迷。,8, 多器官衰竭，血压降低，,CRP,升高及呼吸快，或同时具备上述几种体征而临床可疑菌血症应采血培养。,新生儿菌血症，应增加尿液和脑脊液培养。,对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。,血培养检测消毒程序,皮肤消毒程序,为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。,用,70%,酒精擦拭静脉穿刺部位待,30s,以上。,然后用棉签（,1,2%,碘酊或,10%,碘伏）消毒皮肤，从穿刺点向外以,2cm,直径画圈进行消毒。,最后用,70%,酒精脱碘。对碘过敏的患者，只能用,70%,酒精消毒，消毒,60s,，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。,不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。,培养瓶消毒程序,1, 用,70%,酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用,60s,。,2, 用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。,皮肤消毒和污染的预防,碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要好于碘伏,碘酊和洗必泰的消毒效果大致相当,碘酊作用,30,秒；,碘伏作用,1.52,分钟；,洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是由于没有伴随的过敏反应，所以不必擦去，但不能被用于小于,2,个月的婴儿皮肤消毒。,血培养检测采集和运送,采血量,婴幼儿和儿童，一般静脉采血,1,5ml,，采血量不超过患者总血量的,1,；成人采血量是,8,10ml,，,20,30ml,最合适，血液和肉汤的比一般为,15,至,110,。,血培养的份数和采血时间,一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。,建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培养瓶。,对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前,1h,采集，或于寒战或发烧后,1h,进行。,儿童血培养,不同于成人血培养，由于厌氧菌感染极少发生在儿童病人，因此建议只采用需氧瓶。厌氧培养只考虑针对特殊的高危群体。,皮肤消毒参照成人的方法，除新生儿以外。,儿童的采血量为不超过总血容量的,1%,。,样本拒收标准,标签错误或在血培养瓶上未贴标签,破损的或渗漏的血培养瓶,血液凝固的血培养瓶,含有抗凝剂（除了,SPS),的血培养瓶,血培养检测结果的报告程序,培养,48h,后，对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步,（中间）,报告。,血培养阳性，立即进行革兰染色。染色结果口头报告,（电话通知）,给患者的主治医生。,CLIS,推荐的抗生素敏感试验没有血培养直接敏感试验法，但根据革兰染色可以灵活地选择抗生素进行直接抗生素药敏试验，供临床参考使用。,紧急口头报告,任何血培养的检测结果都会对患者的治疗造成重要的影响,初步的实验室结果（无论是涂片或培养），只要证明为血培养阳性，就必须认为是紧急状况马上向临床进行口头报告和沟通,紧急口头报告一定要在最短时间内报告（,60,分钟之内）,口头报告记录包含以下内容：,报告必须有报告者的全名,和临床负责医生联系报告的时间（无论成功或不成功）,所联系的临床负责医生的全名,报告异常结果并强调是有紧急价值,确认临床医生收到口头报告并反馈处理结果,其他须作紧急口头报告的情况：,标本不符合标准，需要重新采血,初步报告结果和最终结果不吻合,必须在书面报告上注明并提供详情, CLSI,要求每次采集,2-3,套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶。,成年病人不能只采,1,瓶血培养标本，采血量不足和只做,1,套血培养所得的结果是很难正确解释的。,Cockrill2004,年报告,:163,位病人,血培养仪,采血套数及血量,1,套,(20ml),2,套,(40ml),3,套,(60ml),检出率,65%,80%,96%,血培养的套数,一套血培养为何选择,1,个需氧,+1,个厌氧的组合,?,研究表明：用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球菌，肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。,如果血培养只做需氧瓶培养,漏检的不仅是严格厌氧菌,也会影响兼性厌氧菌的分离率及报告阳性结果的时间。,只做需氧菌不做厌氧菌培养,将有,19%,的菌株不能发现,另有,5%,的血培养延迟,1,天报告阳性结果。,2001,年,Khanna,数据,7072,份血培养，,640,份阳性，阳性率为,9,组别,阳性率,需氧瓶厌氧瓶均报阳,55,仅需氧瓶报阳,26,仅厌氧瓶报阳,19,Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219,储从家数据（,2000,年）,组别,阳性率,需氧瓶厌氧瓶均报阳,50,份,仅需氧瓶报阳,7,份,仅厌氧瓶报阳,23,份,591,份血培养，,81,份阳性，阳性率为,中华检验医学杂志，,2000,，,23,：,285,阴性培养结果分析,抗生素影响,苛养菌,特殊病原体,检验技术受限,采样运送不当,非感染性疾病,少见细菌和苛养菌,自动血培养系统培养,5,天可支持苛养菌的生长，但不能培养的菌（如柯克斯体、立克次体、,Tropheryma,等）需用多种分子生物学技术检出。,乏养菌（,Abiotrophia,）和粒座菌,(Granulicatella),。常在自动血培养系统温育,2,天后出现阳性。生长需要,VB6,和胱氨酸。用金黄色葡萄球菌菌落旁的卫星试验呈阳性。转种要用巧克力平皿。,巴通体（,Bartonella,）。建议用溶血,-,离心法培养，接种于新制备的富含营养的巧克力平皿，温育于二氧化碳环境，常需,7,天。,布氏杆菌。最好用双相培养基。大部在,3,天出现阳性、有时需,7,天。,弯曲菌。转种时需微嗜氧环境。温育至少,48h,才可见菌落。,弗郎西丝菌。转种需用含胱氨酸的培养基（巧克力平皿或大豆,-,酪蛋白汤琼脂等）。温育时间要长，有时需,10,天。,HACEK,菌群。有些菌株需,1,周出现阳性，故温育应超过,5,天。,螺杆菌。常需,5,天出现阳性，转种需微嗜氧环境和营养丰富的血平皿。,军团菌。常需温育,5,天出现阳性。转种需,BCYE(,缓冲碳末酵母浸液琼脂,),培养基，温育,48h,才可见菌落。,螺菌。血中极少见。,支原体。肺炎和人型支原体可在自动血培养系统中缓慢生长。转种要用支原体培养基（,SP4,葡萄糖琼脂，）,特别注意,血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染。,感染性心内膜炎，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。,不同部位采集血样可选择左、右手臂或颈部，避免通过静脉置管直接采集血样。,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。,标本采集量少，儿童少于,1ml,，成人少于,3ml,，血培养份数不够，可明显降低血培养的阳性率。,采血时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使用抗生素不久，均降低了血培养的阳性率。,采血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前，或停用抗生素,24h,。,特别提醒,血培养瓶存放于冰箱，取出后立即采血进行培养或血液标本采集后放置于冰箱，过低的温度均抑制细菌生长。,血液标本采集后，放于机外时间过长，细菌生长过度已达衰老期，会降低阳性率。,标本消毒时消毒酒精未完全挥发，会降低阳性率。,所用培养瓶必须仔细检查有无变色或混浊。,对两次不同部位血培养生长同一种微生物，不同（类）无菌部位标本培养中生长同一种微生物或微生物快速生长（,48h,内）的情况下，应考虑是真正的感染。,培养瓶应立即送至细菌室，如有特殊情况不能送检的，应将培养瓶置于室温，切勿放入冰箱。,台湾长庚医院,BACTEC 9240 13,台,Thank You,世界触手可及,携手共进，齐创精品工程,