细胞芽孢染色法目及要求

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,细胞的芽孢染色法,一、实验目的及要求,学习并掌握细菌的芽胞染色法，初步了解芽孢杆菌的形态特征。,二、实验原理,芽胞又称内生孢子，能否形成芽孢及芽孢的形状、芽孢在孢囊的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。,芽胞壁厚，透性低，不易着色，一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色（芽胞呈无色透明状），而一旦染上色后又难以脱色。,芽胞染色法根据芽胞特点设计，除了用着色力强的染料外，还需要加热，以促进芽胞着色。当染芽胞时，菌体也会着色，然后水洗，芽胞染上的颜色难以渗出，而菌体会脱色。然后用对比度强的染料对菌体复染，使菌体和芽胞呈现出不同的颜色，因而能更明显地衬托出芽胞，便于观察。,三、实验器材,1.,菌种：枯草芽孢杆菌。,2.,染色剂：,5%,孔雀绿水溶液、,0.5%,番红水溶液,3.,仪器、材料：二甲苯、香柏油、蒸馏水、,95%,乙醇、显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸。,四、实验方法,（,Schaeffer,Fulton,氏染色法）,1.,制片：常规方法涂片、干燥、固定。,2.,染色：,(1),涂片上滴加,3,5,滴,5%,孔雀绿水溶液。,(2),用试管夹夹住载玻片一端，微火加热，自载玻片上出现蒸汽时，计时,5min,。加热过程中切勿使染料蒸干，及时补加染液。待玻片冷却后，用自来水冲洗至孔雀绿不再褪色为止。,(3)0.5%,碱性番红复染,2min,，水洗。,(4),制片干燥后油镜观察。芽孢呈绿色，菌体红色,五、实验报告,绘图标识枯草芽孢杆菌及芽孢形态，芽孢的着生位置。,六、思考题,1,为什么芽孢染色要加热,?,为什么芽孢及营养体能染成不同的颜色,?,2,试设计实验如何鉴定某一产芽孢菌株的芽孢形态、着生位置及所属分类地位。,