药物分析吩噻嗪类含量测定

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析,第四节,含 量 测 定,性质,：弱碱性、紫外光吸收特性、金属离子配合呈色,测定方法,：酸碱滴定法、分光光度法、高效液相色谱法和液相色谱-质谱联用技术,一、酸碱滴定法,(一)非水溶液滴定法,结构,：母核上10位取代基的,烃胺-NR2、哌嗪基及哌啶基,具有,碱性,1. HClO,4,非水溶液滴定法基本原理,当,HA酸性较强,时，反应不能定量完成，必须,除去或降低HA的酸性,，使反应顺利地完成。,BH,+,A,-,+,HClO,4,BH,+,ClO,4,+,HA,游离碱类盐,被置换出的弱酸,因此，要根据不同情况采用相应测定条件。,10ml30ml,若供试品为,氢卤酸盐,再加5%,醋酸汞,的冰醋酸液,3ml5ml,供试品,+,冰醋酸,结,果,HClO,4,滴定,空白试验校正,指示剂,碱性溶液,pK,b,10,，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入,醋酐,，使碱性增强，突跃更明显, 供试品：以消耗标准液体积计算, 溶剂： HAc，一般用量1030ml, 滴定剂：,4,无水HAc溶液, 指示剂：电位法,HClO,4,在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的观察。排除方法：,（,1,）,改用中性溶剂,（,2,）,加抗坏血酸,（,3,）,电位法指示终点,4、适用范围,主要,用于K,b,10,-8,的有机碱盐的含量测定,。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pK,b,为813的弱碱性药物采用本法滴定。,K,b,为,10,-8,10,-10,时，宜选,冰醋酸,作为溶剂；,K,b,为,10,-10,10,-12,时，宜选,冰醋酸与醋酐,的混合溶液；,K,b,10,-12,时，应用,醋酐,作为溶剂。,冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大。,【示例11-31】盐酸氯丙嗪测定ChP（2010）,取本品约0.2g ，精密称定，加冰醋酸10ml与醋酐30ml，溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每,1ml,高氯酸滴定液(mol/L)相当于mg 的C,17,H,19,N,2,。,提取后HClO,4,非水滴定法：,取本品约置,分液漏斗,加氨水碱化,乙醚提取6次，合并,水浴加热挥干乙醚,残渣,丙酮溶解,HClO,4,非水滴定法,溴甲酚绿-结晶紫指示液,紫红色,蓝紫色,【示例11-32】盐酸氯丙嗪注射液测定JP（15）,每1ml高氯酸滴定液(mol/L)相当于mg 的。,（二）乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法,本类药物的盐酸盐的水溶液显,酸性,，在,乙醇-水溶液,中，可用,NaOH滴定剂,滴定，电位法指示滴定终点。,V,1,V,2,等当点,突跃体积,滴定体积,V=,V1-V2,二、分光光度法,（一）直接分光光度法,在254nm的波长处，C,17,H,19,ClN,2,的吸收系数（ ）为915计算。,（二）提取后分光光度法-,排除辅料干扰,【示例11-36】盐酸氯丙嗪口服液USP32-NF27,对照品：50 同法测定As。,萃取除去抗氧剂的干扰,（三）提取后双波长分光光度法,提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却,不能,除去吩噻嗪类药物的,氧化物,。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，,氧化物,在吩噻嗪类药物的,测定波长处产生吸收,，干扰测定。,定量依据,样品在二波长下吸收度差值,（,A,）：,即，吸收度差值（,A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。,【示例11-37】,盐酸氯丙嗪注射液的含量测定,（ USP32-NF27）,测定波长：,254nm（,最大吸收波长）,277nm（等吸收波长）,空白对照液：,盐酸溶液,计算公式：,式中：,C,(mg/ml)为对照品溶液的浓度；,V,(ml)为所取供试品的体积；,括号内的公式分别为供试品溶液(U)和对照品溶液(S)在下标所示波长处的吸光度差。,（,五）钯离子比色法,吩噻嗪类药物在的缓冲溶液中，与钯离子(Pd,2+,)形成红色配合物，在500nm波长附近具有最大吸收,由于,钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色,，,消除了,药物中,氧化物,对测定,的干扰,。,比色液的浓度,：,50 250,g/mL,显色稳定性：,10分钟后可稳定约2小时,【示例11-38】盐酸异丙嗪注射液USP32-NF27,精密称取适量置分液漏斗,依次加氯化钾,氢氧化钠碱化,甲醇,合并正庚烷提取液,正庚烷提取3次,盐酸酸化,合并盐酸提取液,并定容至50ml,对照品,称取标准品和对照品溶液各2ml +PdCl,2,显色，,测A,470,三、高效液相色谱法,（一）反相高效液相色谱法,(RP-HPLC),固定相：,十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）,流动相：,水甲醇或水乙腈系统，极性较强,极性较强,的组分在分离时,先,流出柱子，,极性较弱,的组分,后,流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样品的分析。杂环类药物分析一般,在流动相中加入含氮碱性竞争试剂(,扫尾剂:,醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈,等,),以,抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用,。,（二）离子对高效液相色谱法,(Ion-RP-HPLC),常用的离子对试剂：,烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。,影响离子对形成的条件,反离子的性质与浓度,流动相的组成,pH,离子强度等,影响待测组分的保留,四、液相色谱-质谱联用技术,液相色谱-质谱联用技术集HPLC的高分离效能和MS的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是进行药物及有关物质定性分析的常用方法。,色谱图,：,图11-4 血浆中7种抗抑郁类和5种抗精神病类药物的LC-MS/MS检测典型色谱图,