资源描述
,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十章,微生物的分类和鉴定,分类,:,在研究微生物相似性的基础上,把每一微生物编排,在一定的分类单元中,制定出检索表。,鉴定:运用现代分类系统,通过具体菌株描述,给未知物,一个具体的分类位置。,命名:按照国际命名法规,给每个新的分类群一个新的学,名。,分类学的具体任务,:,一、种以上的系统分类单元,(一),7,级分类单元,界,(,Kingdom,),(Regnum),门,(,Phylum,),(Phylum),纲,(,Class,),(Classis),目,(,Order,),(Ordo),科,(,Family,),(Familia),属,(,Genus,),(Genus),种,(,Species,),(Species),第一节 通用分类单元,(二)种的概念,种:微生物的基本分类单位,具有许多共同特征的菌株的,集合。,典型菌株(,type strain,),:,最具种特征的代表菌株。,模式种(,type species,):典型菌株的实体,常保藏于标,本室中。,菌种保藏中心,ATCC,:美国典型菌种保藏中心,CCTCC,:中国典型菌种保藏中心:,二、学名,双名法:,Bacillus subtilis,(,属名种名加词,),三名法:,Acetobacter pasteurianus,subsp.,pasteurianus,缩写:,B .,Subtilis,学名与俗名,亚种:在种内有一个稳定特征不同于模式种的菌株,,为最低等级的分类单,元。,型:非分类单位,种内特征小差异的菌株。, 菌株:同种的不同个体。,三、亚种以下的几个分类名词,第二节 微生物在生物界的地位,五界系统:,三域学说(,Woese,等),第三节 各大类微生物的分类系统纲要,一、,Bergey,氏原核生物分类系统纲要,Bergeys Manual of Systematic Bacterialogy1,2,版,Bergeys Manual of Determinative Bacterialogy 19,版,11,伯杰氏鉴定细菌学手册,1923,年第一版,1948,年第六版,1925,年第二版,1957,年第七版,1930,年第三版,1974,年第八版,1934,年第四版,1994,年第九版,1939,年第五版,由于,G+C mol%,测定,核酸杂交和,16S rRNA,寡核苷酸序列测定等新技术引入,使原核微生物分类从表型、实用性鉴定指标为主进入遗传型的系统分类,,因此,1980,年起开始编,伯杰氏系统细菌学手册,简称,系统手册,12,13,伯杰氏系统细菌学手册,1984-1989,(第一版),1986,年第一卷,:,一般医学上或工业的重要的革兰氏阴性菌,1988,年第二卷,:,除了放线菌之外的革兰氏阳性菌,1989,年第三卷,:,古细菌、蓝细菌和第一卷以外的其余的,G,-,菌,1989,年第四卷,:,放线菌,伯杰氏系统细菌学手册,2000,年,(第二版),5,卷,原核生物分为古生菌界和细菌界,相当于,Woese,的细菌域和古生菌域,古生菌界包括,2,门,,5,组,,8,纲,,11,目,,17,科和,63,属,共,208,个种,细菌界包括,16,门,,26,组,,27,纲,,62,目,,163,科和,814,属,共,4727,个种,故整个原核生物界包括,4935,种,14,二、,Ainsworth,等人的真菌分类系统纲要,目前被认同的真菌分类系统是,Ainsworth,第七版(,1983,年)的分类系统。,将真菌归在菌物界,包括:粘菌门和真菌门。,15,16,真菌分类系统,17,真菌分类系统,第四节 微生物分类鉴定方法,一、经典分类鉴定方法,传统分类的细菌鉴定程序,细菌自动鉴定系统,API,数值鉴定系统,BBL,鉴定系统,Biolog,鉴定系统,程序:,1,、获取辅助特征,2,、培养,菌悬液加入生化反应板培养自动扫描,自动鉴定打印结果,细菌自动鉴定程序,二、现代分类鉴定方法,细菌化石,(一)微生物遗传型的鉴定,(,1,),DNA,碱基比例的测定 (,G+C,),mol%,:,解链温度法(,Tm,值),(G+C)mol%,值只能做否定判断;,(,G+C,),mol%,值差别,5,,属不同的种;,差别,10,,属不同的属。,(,2,) 核酸分子杂交法,DNA-DNA,杂交(固相杂交法),单链,DNA,(待测菌株),转硝酸纤维素膜,加入放射性标志参照菌,DNA,(单链),洗去未杂交,DNA,闪烁计数器计数测定放射强度,结论:,1. DNA,同源性,60%,(同种),2. DNA,同源性,70%,(同亚种),3. DNA,同源性,60 70%,(不同亚种),4. DNA,同源性,20 60%,(同属),(,3,),16s rRNA,作为细菌进化的计时器,生物共有的,一定的信息量(,1542,个核苷酸),一定的保守性,便于比较研究,16s rRNA,核苷酸序列分析:,DNA-PCR,法,提取,DNA,PCR,扩增,16S rRNA,基因,PCR,产物纯化,16SrRNA,基因序列测定,Genbank,检索,相似性结果的一般判断:,AB,97%,同种,AB,为,8597%,同属,AB,85 %,不同属,(二)细胞化学组分的鉴定(放线菌),细胞结构 成分,壁 肽聚糖、化学组分,膜 枝菌酸(棒杆菌酸;分枝菌酸),甲基萘醌,全细胞 水解糖类,1.,细胞壁化学类型(分为,9,种类型),-,氨基酸:,DAP,(二氨基庚二酸),Gly,、,Lys,、,Asp,、,Orn,-,糖类:阿拉伯糖、半乳糖,2.,全细胞水解液的糖型,糖类型 特征糖类,A,半乳糖、阿拉伯糖、,B,马杜拉糖,C,无特征糖类,D,木糖、阿拉伯糖,E,半乳糖,3.,数值分类法(统计分类法),-,相似系数的计算;,(,1,)菌株选择(,OUT,操作分类单位),(,2,)选择实验项目,(,3,)数字编码,(,4,)计算机分析,-,列出相似度矩阵,-,将矩阵图转换成树状谱,结果分析:,1.S,(相似值),85%,(同种),2.S,(相似值),65%,(同属),3.S,(相似值),65%,(亲缘关系较远),
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