妊娠及新生儿的生物化学检验

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,妊娠和新生儿的,生物化学检验,1,掌握:妊娠与相关疾病常用化学指标HCG、E3、Prog、AFP的检测；胎儿肺成熟度评价,熟悉:正常妊娠；临床生化检验工程在妊娠相关疾病诊治中的应用；产前与新生儿筛查的生物化学检验,了解：正常妊娠母体和胎儿的生物化学改变；胎儿纤维连接蛋白、抑制素A、妊娠相关血浆蛋白测定,本章教学要求,：,2,妊娠：是胚胎及胎儿在母体内发育成长的复杂过程,新生儿期：自分娩出结扎脐带起至出生后满,28,天,第一节 概述,3,一、正常妊娠,一妊娠、胚胎和胎儿发育,从末次月经第一天算起，妊娠期通常持续280天40周，正常分娩发生在37-42周。全程分为3个时期：,早期妊娠：0-13周,中期妊娠：14-27周,晚期妊娠：28周以后,4,5,6,7,二胎盘,是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是胚胎与母体组织的结合体，由胎儿局部羊膜、叶状绒毛与母体局部底蜕膜构成。具有多种功能。,8,1.,胎盘的功能,胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御以及合成功能，是维持胎儿在子宫内营养发育的重要器官。,9,不转运,大多数蛋白质；甲状腺素；,母体,IgM,、,IgA,；,母体和胎儿红细胞,限制性被动运输,游离甾体类化合物；甾体类硫酸盐；,游离脂肪酸,被动运输,分子量,5kD,、脂溶性物质；,氧、二氧化碳；钠、氯、尿素、乙醇等,跨细胞膜主动运输,葡萄糖,；多种氨基酸；,Ca,2+,受体介导的细胞摄取,母体,IgG,、胰岛素,、低密度脂蛋白,胎盘运输方式,10,2.胎盘激素妊娠期雌激素75%95%来源于胎儿-胎盘复合体,蛋白类激素,hCG、胎盘催乳素placental lactogen, PL等,类固醇激素,孕酮Prog、雌酮E1、雌二醇E2和雌三醇E3等,11,三羊水,羊水：,胚胎发育期间羊膜腔内的液体,。为胎儿在子宫内生活的环境，由胎盘、胎儿肾脏、肺、皮肤及羊膜等器官产生，体积和化学组成被控制在一个动态的范围内，其功能是,保护胎儿和减少胎动引起的母体不适感。,12,1.羊水的来源,早期：由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液，类似于细胞外液。,中期：胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度和渗透压降低，尿素、肌酐和尿酸浓度增加，羊水外表活性蛋白质增加。,2.羊水量 随妊娠时间而不同,10周30ml 20周40ml,38周1000ml 足月800ml,13,3.,羊水颜色和透明度,妊娠早期,(,early trimester of pregnancy),：无色或淡黄色、清晰、透明；,妊娠晚期,(,late trimester of pregnancy),：乳白色、清晰或稍混浊。,14,二、母体及胎儿的生物化学改变,1,、血液学变化,2,、物质代谢变化,3,、肾功能变化,4,、内分泌变化,一母体适应,16,二胎儿功能发育,妊娠,10,周内的人胚称为胚胎，自,11,周称胎儿，,是生长成熟的时期。胚胎和胎儿功能发育主要表现在以下几个方面,1,、肺功能：羊水泡沫试验、,L/S,等,2,、肝功能：结合胆红素,3,、肾功能：葡萄糖、肌酐,4,、血红蛋白,17,第二节 妊娠相关的生物化学检验,一、妊娠与相关疾病,一人绒毛膜促性腺激素HCG,定义：妇女受精卵移行至子宫内着床后形成胚胎，由胎盘滋养层细胞分泌产生，具有促性腺发育的一种糖蛋白激素。,构造: 两个肽链：多肽链分子量1.7万,多肽链分子量3.2万HCG特有,18,检测方法,1、定性检查,1血凝抑制试验和胶乳凝集抑制试验,2尿液HCG定性试验：胶体金法,2、定量检查：时间分辨免疫荧光分析、ELISA、化学发光或电化学发光免疫方法,19,单克隆抗体胶体金标记免疫层析定性检查,A: 吸水材料，试纸条上端,B：吸水材料，试纸条下端,C：金标区金标记鼠IgG、金标记鼠抗人-HCG单抗,T：测试区 羊抗人HCG多抗,R：质控区 羊抗鼠IgG抗体,20,质控线：羊抗鼠IgG抗体+金标记鼠IgG 紫红色,反响线：金标记鼠抗人-HCG单抗+人尿液HCG抗原有/无+羊抗人HCG多抗,双抗体夹心法,21,参考区间,HCG,定性：非孕期阴性，妊娠后阳性,定量：,6U/L,临床意义,1.,早期妊娠诊断,血清中,HCG,略高于尿中，用,ELISA,和胶体金标记法，在妊娠后,7,10,天即能测出。,23,24,2.,滋养层,细胞,肿瘤诊断及预后判断：,葡萄胎、恶性 葡萄胎、绒毛膜上皮癌、男性睾丸畸胎瘤等,，,尿HCG,，且较正常妊娠妇女明显增高。,3.协助诊断异位妊娠及流产,1异位妊娠宫外孕 约50%尿HCG阳性,如果48小时内血清HCG升高程度60%，那么异位妊娠的可能性大，宫外孕血清孕酮水平较低,2不全流产 HCG持续阳性,完全流产 HCG由阳性转阴性,25,二胎盘催乳素PL,胎盘催乳素PL也称绒毛膜促生长催乳素hCS。hPL也是由胎盘合体滋养层细胞产生与分泌，分泌后大局部进入绒毛间歇和胎盘血窦，很少出现于胎体内。,妊娠4-5周左右可在血清中检测出PL，15-30周迅速上升，34周达顶峰，在分娩前胎盘分泌PL量达1-2g/24h，是所有人类激素中分泌量最高的激素，产后迅速下降，产后2小时即不能检测出来。,26,检测方法,ELISA,、,CLIA,、,ECLIA,参考区间,未妊娠妇女：,0.5mg/L,妊娠,22,周：,妊娠,30,周：,妊娠,42,周：,3-8mg/L,27,临床意义,1、妊娠期PL异常增高：妊娠期糖尿病、母子血型不合,2、PL减低：胎盘功能低下、妊娠期高血压、子娴前期、子娴、异位妊娠、葡萄胎、先兆流产、胎儿宫内发育缓慢、胎儿宫内窒息等,3、葡萄胎患者血中PL减低，HCG明显升高，因此HCG/PL 比值比正常妊娠高100倍。,28,三雌三醇E3,E3是雌二醇的代谢产物，约占总量90%的E3来自胎儿肾上腺合成的硫酸脱氢表雄酮DHEAS，其余局部来自胎儿的E2和母体的DHEAS。,胎盘合成的E3通过母体血液循环在肝脏代谢，和硫酸或葡萄醛酸结合形成结合性E3，再经尿排出。母体血液中的E3以结合和未结合uE3两种形式存在。胎儿产生的是uE3。,29,检测方法,ELISA,、,CLIA,、,ECLIA,、时间荧光免疫分析,参考区间,未妊娠妇女：,妊娠,21,周：,妊娠,35,周：,妊娠,41-42,周：,羊水：，,2MoM，且羊水胆碱酯酶活性升高，那么应考虑脊柱裂、无脑儿、腹裂、脐膨出的可能。,37,二、母体安康评价,1、妊娠前：血常规、尿常规、ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、红细胞抗体筛查、肝肾功能、人乳头状瘤病毒HPV检测、风疹病毒效价、快速血浆反响素试验、脱落细胞涂片、淋病奈瑟菌培养、梅毒螺旋体检查、衣原体检测、乙肝五项、HIV、HCV检测、禁忌药物的筛查。,2、补充叶酸以减少胎儿神经管病变的风险。,3、妊娠24-28周，进展葡萄糖耐量试验来筛查妊娠性糖尿病。,4、24-30周筛查妊娠妇女早产的风险。,38,三、胎儿安康评价,包括胎儿成熟度评价和胎儿先天性缺陷的筛查。,胎儿肺成熟度FLM评价是目前最主要的胎儿成熟度评价方式，能帮助判断围生期胎儿能否获得最正确生存、对分娩时机选择，降低新生儿特发性呼吸窘迫综合征IRDS，提高生存率具有重要意义。,39,卵磷脂鞘磷脂比值LS,泡沫稳定性实验FSI,荧光偏振(FPA),薄层小体计数,羊水双饱和磷脂酰胆碱DSPC测定,磷脂酰甘油(PG)测定,胎儿肺成熟度评价试验,40,卵磷脂L与鞘磷脂S是肺泡外表活性物质的主要成分，可维持肺的稳定性，在胎儿出生后能保障生命所必需的气体交换。,薄层层析色谱法TLC,一卵磷脂/鞘磷脂比值L/S,检测方法,参考区间,L/S,比值,2.0,L/S,1.49:,表示肺脏不成熟，,IRDS (,特发性呼吸窘迫综合征,),严重；,L/S,为,1.50,1.99:,表示肺脏发育不够成熟，有,IRDS,可能；,L/S,为,2.0,3.4:,表示肺脏已成熟；,L/S,为,3.5,3.9:,表示肺脏肯定成熟；,L/S,4.0:,表示过熟儿。,临床意义,羊水中的肺泡外表活性物质饱和磷脂是既亲水又亲脂的两性界面物质，具有一定的外表张力，其在乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时，并形成稳定泡沫层。,而羊水中的蛋白质、胆盐、游离脂肪酸及不饱和磷脂也能形成泡沫，但乙醇能消除这些物质所形成的泡沫。,二泡沫稳定指数FSI,检测方法,在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加乙醇量并混合，在羊水能够支持泡沫稳定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。,参考区间,FSI0.47,为肺成熟,44,三荧光偏振FPA,FPA是目前最普遍使用的定量方法。,在羊水中参加荧光染料NBD-卵磷脂NBD-PC时，NBD-PC可渗入磷脂形成的微粒和聚集体中，具有外表活性的磷脂含量越高，荧光偏振值越低。,荧光染料PC-16不仅可与脂质微粒结合，也可与白蛋白结合，由于羊水中白蛋白含量相对恒定，同样可作为参照，用含磷脂和白蛋白的校正液进展校正，报告单位为磷脂/白蛋白mg/g,45,检测方法,TDxFLM II,法、,NBD-PC,法,参考区间,正常妊娠末：,磷脂,/,白蛋白,70mg/g,NBD-PC :0.5%，会降低P值结果。以230mP为明显成熟、290mP为不成熟 。,磷脂/清蛋白mg/g临界值是70mg/g清蛋白 。,临床意义,四薄层小体计数LB,LB是肺泡II型细胞质中的特殊构造，是肺外表活性物质在细胞内存储的地方，它通过胞吐作用到达肺泡外表，可进入羊水中，因此在羊水中检测中可用于评价FLM。,检测方法,使用标准血细胞计数仪的,血小板通道,直接计数。,48,参考区间,LB,计数,50000/ul,临床意义,LB,计数,50000/ul,表示胎儿肺成熟,16000-49000/ul,表示过度状态,15000,表示胎儿肺不成熟,49,THE END,THANK YOU！,