芳酸及其酯类药物的分析课件

芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 1第 六 章 Analysis of Aromatic carboxylic acids & esters 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 2 Contents4 Chemical structure & feature123 IdentificationDetection of specific impurities Assay 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 3 第 一 节 水 杨 酸 类1 阿 司 匹 林 aspirin 2对 氨 基 水 杨 酸 钠 PAS-Na3 双 水 杨 酯 salsalate 4 COOHOR贝 诺 酯 benorilate水 杨 酸 SA salicylic acid 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 4 结 构 式阿 司 匹 林aspirinCOOHOCOCH3 对 氨 基 水 杨 酸 钠 PAS-NaCOONaOH NH2双 水 杨 酯 salsalateCOOH OCO OH 贝 诺 酯 benorilate OCOCH3COO NHCOCH3 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 5 1. 苯 甲 酸 钠 sodium benzoate2. 甲 芬 那 酸 mefenamic acid3. 羟 苯 乙 酯 ethylparoben4. 丙 磺 舒 probenecid第 二 节 苯 甲 酸 类苯 甲 酸 benzoic acidCOOH R R 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 6 结 构 式 HO COOC2H5羟 苯 乙 酯ethylparoben甲 芬 那 酸 mefenamic acid COOHNH CH3 CH3 COONa苯 甲 酸 钠 sodium benzoate COOH(CH3CH2CH2)2N SO2丙 磺 舒 probenecid 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 7 第 三 节 其 他 芳 酸 类氯 贝 丁 酯 clofibrate布 洛 芬 ibuprofen COOHR RR 其 他 芳 酸 类 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 8 结 构 式Cl O CCH3 CH3COOC2H5氯 贝 丁 酯 clofibrate布 洛 芬 ibuprofen CHCH2 CHCH3CH3 COOHCH3 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 9 特 点v均 有 苯 环 、 羧 酸 或 其 酯v水 杨 酸 类 和 苯 甲 酸 类 结 构 中 的 羧 基 直 接 与 苯 环 相 连v除 了 酸 性 基 团 外 ， 各 自 具 有 本 身 的 官 能 团v分 子 中 苯 环 、 羧 酸 和 取 代 基 的 相 互 影 响 ， 使 芳 酸 的 酸 性 强 度 各 有 不 同 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 10 COO-COO- OHCOO- SO2N(C3H7)2 OCOO 2 3FeFe 紫 堇 色COO OOCFe 3(OH)26赭 色 COO(C 3H7)2N SO2 3Fe米 黄 色 pH5.06.0T.S.FeCl3 pH46中 性 溶 液 三 氯 化 铁 反 应 鉴 别 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 11R C NO OH Fe/3 Fe3+紫色 R C NO OHH H2NOH NNHO C H N C N(DCC)R C OHOR C OO C NNH布 洛 芬 NHC NO CR O羟 肟 酸 铁 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 12 重 氮 化 偶 合 反 应 具 体 方 法 见 芳 香 胺 类 药 物 的 鉴 别 氧 化 反 应 异 羟 肟 酸 铁 反 应甲 芬 那 酸 H2SO4 深 蓝 色(O) K2Cr2O7 并 产 生 绿 色 荧 光 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 13 Cl O CCH3CH3COOC2H5+NH2OH HCl+2KOH Cl O CCH3CH3CO NHOK+C2H5OH+H2O+KClFe3+ H+ Cl O CCH3CH3C ONH OFe/3 紫 色 氯 贝 丁 酯 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 14 水 解 产 物 的 反 应 ASA酸 水 解 生 成 SA和 CH3COOHHOOC SO 2N(CH2CH2CH3)2 NaOHONa+CO 2 +Na2SO3+HN C3H7C3H7HNO3Na 2SO4 分 解 产 物 的 反 应 UV特 征 吸 收 IR吸 收 光 谱丙 磺 舒 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 15 红 外 吸 收 光 谱 法 水 杨 酸 的 红 外 吸 收 图 谱37002900cm-1N-H、 O-H 1660cm-1C=O 1610,15701480,1440C=C 775cm-1Ar-H 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 1637002900cm-1N-H、 O-H 1640cm-1N-H1580cm-11500cm-1 C=C 1300cm-1C-N1188cm-1C-O对 氨 基 水 杨 酸 钠 的 红 外 吸 收 图 谱 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 17 特 殊 杂 质 的 由 来 与 方 法 检 查 vAcetyl Salicylic AcidONa CO2加压， ONa COONa OH COOHH+ OH-CO2副 产 物 SACOOHO CO CH3(CH3CO)2OH2SO4,7075C。ASA Aspirin 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 18 SA 炽 灼 残 渣苯 酚 易 碳 化 物溶 液 的 澄 清 度 重 金 属Aspirin阿 司 匹 林 杂 质 检 查 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 19 主 要 检 查 成 品 药 物 中 可 能 残 留 的 间 氨 基 酚 。间 氨 基 酚 易 氧 化 呈 色 ， 而 且 有 毒 性 ， 因 此 要 严 格 控 制 。 双 向 滴 定 法 ： 利 用 间 氨 基 酚 溶 于乙 醚 ， 取 3.0g 样品 用 乙 醚 提 取 0.02mol/LHCl测 定 方 法 滴 定 V0.3ml。 HPLC法 ： 采 用 内 标 法 ， 以 磺 胺 作 内 标 （ USP） 对 氨 基 水 杨 酸 钠 中 特 殊 杂 质 的 检 查 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 20 BP收 载 的 方 法 ， 由 于 杂质 的 结 构 不 清 ， 故 采 用TLC法 中 的 供 试 品 自 身 对照 法 ： 取 羟 苯 乙 酯 丙 酮 液1.0%和 0.01%， 2ul，254nm查 荧 光 ， 前 一 个 任何 第 二 个 斑 点 的 大 小 和 强度 不 应 超 过 后 一 个 。 羟 苯 乙 酯 有 关 物 质 的 检 查 供试品 对照品 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 21 甲 芬 那 酸 是 以 邻 -氯 苯 甲 酸 和 2， 3-二 甲 基 苯 胺 在 Cu的 催 化下 缩 合 而 成 ， 因 此 成 品 药 物 中 要 检 查 铜 盐 及 有 关 物 质 。 分 光 光 度 法 ： 利 用 Cu 2+与Na-DDC呈 色 后 测 定 A 1. 铜 盐 检 查 法 原 子 吸 收 分 光 光 度 法 ： BP（ 2000） 2. 有 关 物 质 的 检 查 主 要 检 查 的 是 酰 胺 、 二 甲 基 苯 胺 和 邻 氯苯 甲 酸 各 国 药 典 均 采 用 TLC法 中 的 自 身 高低 浓 度 对 照 法 。甲 芬 那 酸 中 特 殊 杂 质 的 检 查 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 22 氯 贝 丁 酯 中 特 殊 杂 质 的 检 查对 氯 酚 （ 0.0025%）挥 发 性 杂 质 （ 0.5%）GC法 5%SE-30 2m 160 ， N2 FID 杂 质 以 归 一 化 法 求 得 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 23 一 、 酸 碱 滴 定 法（ 一 ） 直 接 滴 定 法 基 于 本 类 药 物 -COOH； 可 用 碱 直 接 滴 定 ， 如 ASA的 含 量 测 定 ， 其 原 理 如 下 ： 含 量 测 定1. 原理 ：2. 条 件 ：在 中 性 乙 醇 中 ， 以 酚 酞 作 指 示 剂 ； 摩 尔 比 为 1:1。3. 应 用 ： 多 国 药 典 用 于 双 水 杨 酯 、 苯 甲 酸 、 丙 磺 舒 、 布 洛 芬 测定 ； USP和 BP还 用 于 甲 芬 那 酸 的 测 定 。 COOHOCOCH 3 + NaOH COONaOCOCH3 + H2O 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 24 Residual titration after hydrolysisUSP23方 法 ： 取 本 品 约 1.5g， 精 密 称 定 ， 准 确 加 NaOH液 (0.5mol/L)50.0ml， 水 浴 上 煮 沸 15min， 放 冷 ， 以 酚 酞 为指 示 剂 ， 用 H2SO4液 (0.25mol/L)滴 定 剩 余 的 NaOH， 并 将滴 定 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 1ml的 NaOH液 (0.5ml/L)相当 于 45.04mg的 C9H9O4 OCOCH3COOH 2NaOH H2OOHCOONa CH3COONa2NaOH H 2SO4 Na2SO4 2H2O 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 25 Two-step titration用 于 Aspirin片 测 定片 剂 中 有 稳 定 剂 水 解 产 物水 杨 酸 SAHAc HO C COOHCH2COOHCH2COOH枸 橼 酸Citric acid HO CH COOHCH COOHHO 酒 石 酸Trataric acid为 了 避 免 这 些 酸 类 的 干 扰 ， 采 用 两 步 滴定 法 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 26 第 二 步 COONaOCOCH 3 NaOH COONaOH NaAc H2O2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O 第 一 步 ： NaOH滴 定 所 有 的 酸 ： ASA， CA，TA， SA， HAc 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 27 Titrimetry in two phases Ch.P 2005用 于 苯 甲 酸钠 的 测 定 为 芳 酸 碱 金属 盐 ， ； 苯 甲酸 不 溶 于 水 ， 不 利 于 终点 的 正 确 判 断 因 此 ， 利 用 的 性 质 ，采 用 双 相 滴 定 法 HCl乙 醚 (苯 甲 酸 )H2O(苯 甲 酸 钠 )0.5mol/L25ml 1.5g50ml2d甲 基 橙 橙 红 色 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 28 p 直 接 紫 外 分 光 光 度 法p 离 子 交 换 -紫 外 分 光 光 度 法 当 含 有 酸 性 杂 质 对 氯 酚 时 ， 可 采 用 强 碱 性 阴 离 子 交 换 树 脂 吸附 酸 性 杂 质p 柱 分 配 色 谱 -紫 外 分 光 光 度 法 USP(24)采 用 此 法 同 时 测 定 ASA胶 囊 中 ASA和 SA。 紫 外 分 光 光 度 法 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 29 Column Partition Chromatogr. ASA capsule 等 制 剂 除 用 上 述 两 步 滴 定 法 外 ， 最 好用 色 谱 法 ， 可 以 和 以 及 等 ，经 分 离 后 同 时 测 定 ASA与 SA 如 USP用 柱 分 配 色 谱 -UV测 定 ASA Capsule 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 30 Column Partition Chromatography, CPC200300mm60mm4mm22mm层析柱玻棉 压榨棒 350mm21mm 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 31 供 试 品 液 ： CHCl3液洗 脱 液 1： CHCl3洗 脱 液 2： HAC- 乙 醚 硅 藻 土 ， FeCl3-尿 素 玻 璃棉 硅 藻 土 ， Na2CO3 供 试 品 液 ： CHCl3-HCl液洗 脱 液 1： HAC-CHCl3 (1:10) 10ml洗 脱 液 2： HAC- CHCl3 (1:100) 85ml 1-杂 质 先 洗 脱2-SA后 洗 脱max=306nm Au As 1-杂 质 先 洗 脱2-ASA后 洗 脱 max=280nmASA(mg)=C(Au/As) 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 32 C18甲 醇 -水 -正 丁 醇(30:20:1) 237nm 内 标 ： 苯 甲 酸色 谱 条 件 血 清 样 品 的 处 理 HPLC图血 清 中 ASA&SA的 测 定血 清 样 品 100 l 加 入 HClO4(30%) 50 l 、 不 同 浓 度ASA& SA对 照 品稀 释 液 、 内 标 (各浓 度 均 为 10 g/ml混 合2min离 心 进 样 10 320.溶 剂 峰 1.ASA2.内 标 物 3.SA 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 33 练 习 与 思 考A型 题 1 阿 斯 匹 林 中 检 查 的 特 殊 杂 质 是A.水 杨 醛 B.砷 盐 C.水 杨 酸 D.苯 甲 酸 E.苯 酚2 对 氨 基 水 杨 酸 钠 中 检 查 的 特 殊 杂 质 是A.水 杨 醛 B. 间 氨 基 酚 C.水 杨 酸 D.苯 甲 酸 E.苯 酚 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 34 B型 题 FeCl3反 应 B.水 解 后 FeCl3反 应 C. AgNO3反 应 D.重 氮 化 -偶 合 反 应 E. 麦 芽 酚 反 应 1. 阿 斯 匹 林 2. 水 杨 酸 3. SMZ 4. 苯 甲 酸 钠 BAD A 芳 酸 及 其 酯 类 药 物 的 分 析 35 X型 题 1. 直 接 能 与 FeCl3产 生 颜 色 反 应 的 药 物 有A。 水 杨 酸 B. 盐 酸 普 鲁 卡 因C. 对 氨 基 水 杨 酸 钠 D. 对 氨 基 酚 E. 阿 斯 匹 林2. 能 发 生 重 氮 化 -偶 合 反 应 的 药 物 有A。 水 杨 酸 B. 阿 斯 匹 林 C. 对 氨 基 水 杨 酸 钠 D. 对 氨 基 酚 E. 盐 酸 普 鲁 卡 因