实验五白细胞分类计数

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,实验五白细胞分类计数,一、白细胞分类计数,白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分类,100,个白细胞，计算得出各种白细胞所占百分比。,9/24/2024,2,瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性,美兰（M,+,）,和带负电的酸性,伊红（E,-,）,离子。细胞的染色既有,物理的吸附作用,，又有,化学的亲和作用,。各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可呈不同的着色特点。,瑞氏染色原理：,9/24/2024,3,血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质，故与酸性染料伊红结合而染成红色，呈,嗜酸性,。,细胞核的核蛋白为酸性物质，故与碱性染料美兰结合，染成深蓝色或深紫红色，呈,嗜碱性,。,中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色，呈,嗜中性,。,染色原理：,9/24/2024,4,器材,光学显微镜,推片，载玻片,试剂,Wright染液,甲醇 600ml,磷酸盐缓冲液（PH6.46.8）,香柏油,标本来源,EDTA-K,2,抗凝全血,9/24/2024,5,操作,1),推片：血膜,厚薄适中，边缘整齐，外观呈舌形，头、体、尾分明,。,2,）干燥,3,）标记,9/24/2024,6,2染色,1）准备：血膜干透后，用蜡笔在两端划线，以防止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。,2）加染液：在涂片上滴加瑞氏染液,数滴,，以染液覆盖整个血膜为度，稍静置1min。,3）加缓冲液：滴加缓冲液等量或多些，与上述染液充分混匀。,4）染色：染色10min.,5）冲洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。,6）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。,9/24/2024,7,血涂片制作,9/24/2024,8,良好血涂片外观,羽（子弹头）状尾部,周边有空白,无划痕,羽,状,尾,部,9/24/2024,9,不良血涂片,9/24/2024,10,2瑞氏染色操作,9/24/2024,11,3白细胞分类：,先用低倍镜选择厚薄适宜，染色良好，细胞分布均匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，,油镜,下分类计数。分类时要有,秩序,的连续进行，避免主观选择视野。通常分类计数,100,个白细胞，计算并报告各种白细胞所占比例。,低倍镜下所见,结果记录方式：,Ne,正 一,Ly,正,Mo,正,Eo,正,Ba,正,9/24/2024,12,体尾交界处,理想区,域,细胞重叠 细胞太稀,理想区域,9/24/2024,13,各类成熟白细胞的形态学：,中性粒细胞（,Ne,）,：,在瑞氏染色血涂片上呈圆形，直径,10,13m,，,胞浆染粉红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。,9/24/2024,14,嗜酸性粒细胞（,Eo,）,：,较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，,呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红色，,胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。,9/24/2024,15,嗜碱性粒细胞（,Ba,）,：,胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。,9/24/2024,16,淋巴细胞（,Ly,）,：,胞体呈圆形，直径介于,6,15m,之间，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见，直径,6,9m,，,核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。,9/24/2024,17,单核细胞（,Mo,）,：,在瑞氏染色涂片上为,12,20m,，,胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形,多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土样颗粒,。,9/24/2024,18,正常成人外周血白细胞分类参考值：,Ne 50%,70%,Ly 20%,40%,Mo 3%,8%,Eo,0.5%,5%,Ba,0%,1%,参考值,9/24/2024,19,1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分明，无溶血、无空洞。,2.很多因素影响涂片时血膜的厚度。,血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚,，反之则血膜薄。,3.按一定顺序，有秩序地连续进行，避免选择视野。,4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态是否有异常。退化细胞不计数。,注意事项,9/24/2024,20,RBC异常,9/24/2024,21,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,嗜碱性粒细胞（右）,单核细胞,血小板,9/24/2024,22,实验报告（注意,学号,）,1原理,2方法,3各类细胞百分比报告,4讨论,9/24/2024,23,谢谢,