夏盛葡萄糖氧化酶介绍

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,夏盛葡萄糖氧化酶介绍,饲用葡萄糖氧化酶作用机理及功效,葡萄糖氧化酶介绍,葡萄糖氧化酶应用研究,内容提纲,总结,夏盛葡萄糖氧化酶使用案例,2,葡萄糖氧化酶简介,葡萄糖氧化酶,是一种氧化还原酶，,在,分子氧的存在下，专一地,氧化,-D-,葡萄糖生成,D-,葡萄糖酸内酯，同时消耗氧，生成过氧化氢；过氧化氢在过氧化氢酶作用下，分解生成水和,1/2,氧，而后水又与葡萄糖酸内酯结合产生葡萄糖酸。 在此过程中，葡萄糖氧化酶的特点是能够消耗氧气，催化葡萄糖氧化，最终产物是葡萄糖酸。,GOD,催化,-,D-,葡萄糖的速度是催化,-,D-,葡萄糖的,150,倍,.,反应方程式：,3,葡萄糖氧化酶的来源,1904,年发现于黑曲霉菌丝；,1928,年确定它是一种氧化还原酶，也是成功应用于工业的少数几种非水解酶之一；,1960,年,Kusai,等、,1964,年,Pazur,和,Swobodda,分别从青霉和黑曲霉中提纯葡萄糖氧化酶。,1995,年, Petruccioli,等用青霉的突变株生产出葡萄糖氧化酶。,1999,年农业部将其定为,12,种允许使用的饲用酶制剂之一；,目前生产上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉属菌株。,允许使用的饲料添加剂目录,青霉,黑曲霉,5,不同菌种来源对比,菌种,特异青霉,黑曲霉,分子量,150kD,152kD,碳氢化合物,11%,16%,氨基酸,（赖氨酸、苯丙氨酸）较多,（组氨酸、精氨酸、酪氨酸）较多,K,m,(,米氏常数,),11,30,V,max,值,925,458,Km,表示酶和底物之间的亲和能力，,Km,值越大，亲和能力越弱，反之亦然。,在同等底物浓度的条件下，,Km,值越大，其所需的酶浓度越大，即所需添加量也越大。,（,引自,Biotechnology Advance,27(2009): 489-501,）,反应时间,pH,值,剩余葡萄糖值（,%,）,特异青霉,黑曲霉,特异青霉,黑曲霉,0h,8.0,18.2,1h,6.33,6.8,17.1,17.7,3h,6.21,6.56,15.5,16.3,6h,6.14,6.,3,7,14.4,15.4,8h,5.71,6.05,7.9,9.1,目的：比较特异青霉和黑曲霉的产物生成量及底物消耗量,步骤：,配制,18%,葡萄糖溶液，测定,初始,葡萄糖含量,，加入一定量,碳酸钙,，调试,pH,值，分别加入同等活力不同来源,葡萄糖氧化酶，,以及过量,过氧化氢酶,，,磁力搅拌器,，,用鼓风机通入一个大气压的空气,，保持氧气充足。,7,葡萄糖氧化酶,酶学特性,在,pH,为之间具有很好的稳定性，最适,pH,值为,9,葡萄糖氧化酶,酶学特性,枯草杆菌蛋白酶,(pH6.0),、胰蛋白酶,(pH6.8),和胃蛋白酶,(pH4.5),不能分解,葡萄糖氧化酶,酶学特性,作用温度为,20,60,最适温度,35,耐温性能良好，经,85,处理,1min,酶活保持在,80%,以上,耐温性能,15%,湿度条件下，混合葡萄糖氧化酶和饲料后制粒结果,存储稳定性良好，避光、干燥处保存,12,个月活力不低于,90%,。,12,在畜禽机体内的作用机理及功效,清除过量自由基,保持肠道上皮完整,减少病原入侵,耗氧，抗氧化,有机弱酸、提供酸性环境,过氧化氢、强氧化性,-D,葡萄糖,H,2,O,2,葡萄糖酸,O,2,H,2,O,GOD,过氧化氢酶,消除肠道病原菌生存环境，保持肠道菌群生态平衡,提高消化酶活，,改善饲料品质，,提高饲料消化率,缓解霉菌毒素中毒,保护肠道健康,维护肠道健康、提高免疫功能，促进消化吸收、替代抗生素、预防霉菌毒素中毒,1/2O,2,（一）保持肠道上皮细胞的完整，,抑制球虫和病原菌的入侵,1994,年赵文等在,氧自由基与肠道损伤,中表明：机体内产生的氧自由基会,破坏,肠道,上皮细胞,的完整性造成肠道损伤。,在葡萄糖氧化酶催化的反应过程中，可以清除氧自由基，保护肠道健康，从而抑制病原菌入侵。,GOD,的还原过程,14,GOD,组,015,日龄,0.20%GOD,拌料；,1660,日龄用,0.12%0.16%GOD,拌料，如有球虫则饮水添地克珠利,13d,。对照组,15,日龄起饮水添加地克珠利至,60,日龄出舍，发生球虫病则饮三维治球粉,3d,。,(,引自,湖北畜牧兽医,2004(1):31-33),备注：,GOD,酶活,15u/g,15,(,引自,河北农业大学,，,1997,1(4),空白对照：不攻毒攻毒对照和试验组：进行鸡白痢沙门氏菌攻毒，其中试验组，攻毒后进行治疗。,备注：,GOD,酶活,15u/g,16,（二）,改善胃肠道酸性环境，促进营养物质消化吸收,催化葡萄糖生成葡萄糖酸，在肠道内发挥酸化剂的作用，创造酸性环境；降低胃中的,pH,值，激活胃蛋白酶，,促进营养物质的消化吸收；,（引自,河北农业大学学报,，,2009:34,（,4,）,对照组,添加,0.15%GOD,添加,0.3%GOD,添加,0.4%GOD,添加,0.5%GOD,备注：,GOD,酶活,15u/g,17,（三）促进肠道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。,生成的葡萄糖酸可,降低胃肠内,PH,值,，为,乳酸菌生长制造,酸性环境；,葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖,去除肠道内氧气,，为厌氧有益菌双歧杆菌的增殖制造厌氧环境；,（引自,畜牧与兽医杂志,，,2011:43,（,6,）,对照组,添加,0.1%GOD,添加,0.2%GOD,添加,0.3%GOD,备注：,GOD,酶活,15u/g,18,（四）生成的过氧化氢通过破坏霉菌毒素的结构解除毒性。,葡萄糖,氧化酶,可,抑制,黄曲霉、黑根霉、青霉等多种霉菌，对黄曲霉毒素,B,中毒症有很好的预防,效果；,葡萄糖氧化酶作用生成一定量的过氧化氢，使如黄曲霉毒素这种具备,氧杂萘邻酮基团,的霉菌毒素被氧化脱氢，分子结构发生改变，解除毒性。或通过氧化作用,破坏呋喃环,结构，使环打开，毒性消失，从而达到脱毒的作用；,(,引自：冯定远,左建军 著,饲料酶制剂的应用技术体系,31-25),19,（引自,生物学杂志,，,2014,，,31 (2),）,表,2.,添加葡萄糖氧化酶对解除霉菌毒素小鸡存活率的比较,（引自,动物营养学报,，,2014,，,26 (11),）,表,1.,葡萄糖氧化酶对饲喂霉变玉米小鼠体重的影响,75000u/t,备注：,GOD,酶活,15u/g,20,葡萄糖氧化酶使用案例,夏盛,（一）提高动物生产性能,（二）降低抗生素使用,21,葡萄糖氧化酶使用案例,夏盛,（一）提高动物生产性能,（二）降低抗生素使用,22,（一）提高动物生产性能,安徽雨润集团滁州沃得养猪场应用实例,断奶仔猪,试验方案,试验目的,葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长的影响,试验时间,2015/09/12-2015/10/13,试验地点,安徽滁州（雨润集团,-,滁州沃得利养殖场）,试验对象,24,日龄断奶仔猪，试验组和对照组各,103,头,试验过程,实验组仔猪饲喂过程中按照,333g/t,添加葡萄糖氧化酶,(GOD200),对照组饲喂相同的饲料但不添加葡萄糖氧化酶。饲喂,30,天后比较两组猪的料肉比、腹泻率和日增重。,23,24,10.6%,25,试验方案,试验目的,不同添加量葡萄糖氧化酶（,100u/g),对蛋种鸡性能的影响,试验时间,2013,年,9,月,22,日至,10,月,27,日,试验地点,郑州荥阳蛋种鸡养殖场,，试验期,35d,试验对象,25-28,周龄的罗曼褐蛋种鸡,试验过程,选取,A,、,B,、,C,、,D,4,组鸡作为实验对象，其中,A,组（对照）仅仅饲喂基础日粮，,B,组（,300g/t GOD,）、,C,组（,500g/t GOD,）、,D,组（,700g/t GOD,）在基础日粮的基础上添加了不同剂量的葡萄糖氧化酶。通过连续,35,日的持续跟踪试验,，对比产蛋率、受精率和健雏率。,（一）提高动物生产性能,郑州荥阳,某蛋种鸡场,应用实例,罗曼褐蛋种鸡,26,文章,日粮中添加葡萄糖氧化酶对罗曼褐蛋种鸡产蛋性能的影响,中国饲料添加剂,2014,（,2,）,27,试验方案,试验目的,GOD200,的使用对蛋鸡产蛋率和蛋壳品质的影响,试验时间,2015/10/30-2015/12/02,试验地点,湖北马鞍山（鑫欣禽业有限公司）,试验对象,48,周龄海兰褐商品代蛋鸡，实验组（,3455,只,),、对照组（,3463,只）。,试验过程,选取,335,日龄的产蛋鸡，其中实验组按照,250g/t,的比例在饮水中添加葡萄糖氧化酶，对照组饮水中不添加葡萄糖氧化酶，每日统计实验组和对照组的产蛋率及蛋壳品质。,海兰褐蛋鸡,（一）提高动物生产性能,安徽马鞍山鑫欣禽业商品蛋鸡应用实例,28,2.3%,月平均,29,55.6%,30,每日产蛋率对比,31,试验方案,试验目的,葡萄糖氧化酶抗应激作用,试验时间,2015/09/03-2015/09/30,试验地点,安徽郎溪（郎溪立大养殖场）,试验对象,42,周龄樱桃谷种鸭，试验组（,306,）、对照组（,402,）、对照组（,500,）、对照组（,506,），每组,2000,只，共计,8000,只。,试验过程,实验组饲料按照,300g/t,的量添加,GOD200(,不溶,),，,3,个对照组饲喂同一基础日粮不添加,GOD,。饲喂,4,周，每日统计产蛋率进行比较。,（一）提高动物生产性能,安徽郎溪立大肉种鸭场应用实例,樱桃谷种鸭,32,2.78,6.34,6.54,19.63,延缓后期产蛋率的降低,33,葡萄糖氧化酶使用案例,夏盛,（一）提高动物生产性能,（二）降低抗生素使用,34,试验方案,试验目的,葡萄糖氧化酶替代抗生素试验,试验时间,2015,年,12,月,-2016,年,2,月，,试验期为,61,天,试验地点,温氏肉鸡场,试验对象,1,日龄黄羽肉鸡,试验过程,选取三群鸡作为试验对象，其中,A,组作为对照组正常按照饲养程序添加抗生素，,B,组、,C,组作为试验组，其中,B,组添加,200g/t,的,GOD200,，,C,组添加,300g/t,的,GOD200,。整个养殖期结束后对比,A,、,B,、,C,三组肉鸡的日增重、料肉比和死淘率。,（二）降低抗生素的使用,广东温氏,青年鸡,35,不同浓度葡萄糖氧化酶对肉鸡,161,天龄生长性能的影响,36,试验方案,试验目的,不同的,GOD200,添加量对青年鸡性能的影响。,试验时间,2015,年,6,月,27,日,-2015,年,8,月,27,日，,试验期为,60,天,试验地点,南阳市华东禽业青年鸡场,试验对象,1,日龄青年鸡，每组,10000,羽。,试验过程,雏鸡从,1,日龄开始试验，其中对照组仅仅饲喂基础日粮，,3,个试验组分别在基础日粮中添加不同浓度的,GOD,，,A,组（,250g/t),、,B,组（,200g/t),、,C,组（,150g/t),。试验结束后（青年鸡,60,日龄,),对比分析,4,组鸡群的体重、死淘率和用药费用。,（二）降低抗生素的使用,南阳市华东禽业青年鸡应用实例,青年鸡,37,文章,葡萄糖氧化酶在青年鸡中应用效果分析,中兽医学杂志,2015,（,10,）,38,试验方案,试验目的,GOD200,对肉鸡生长的促进作用,试验时间,2015/09/16-2015/10/24,试验地点,安徽芜湖（明玮生态科技园有限公司）,试验对象,3,日龄,817,商品肉鸡，实验组和对照组各,12000,只。,试验过程,3,日龄开始实验组全群饮用葡萄糖氧化酶，全程除开口药外不添加任何药物,（全程成本,550,元）,；对照组从,3,日龄开始按照原用药程序饮用,（全程成本,7200,元）,，,不添加葡萄糖氧化酶。出栏时比较两组鸡的出栏体重、料肉比和死淘率。,817,商品肉鸡,（二）降低抗生素的使用,安徽芜湖某肉鸡养殖场应用实例,39,40,试验方案,试验目的,GOD100,对肉鸭生长性能的影响,试验时间,2014,年,7,月,14,日,-2014,年,8,月,25,日，,试验期为,42,天,试验地点,高唐六和荣达下属肉鸭养殖场,试验对象,1,日龄樱桃谷鸭，每组,6000,羽。,试验过程,选择同一批,24000,羽的,1,日龄雏鸭分为,4,组，饲喂同一基础日粮。,3,个试验组在饮水中添加,500g/t,的葡糖糖氧化酶的同时按照表,1,对用药计划进行修改。试验结束后对比,4,组出栏肉鸭的体重、死淘率、料肉比。,表,1,：,各组用药情况,对照组,A,B,C,日粮,基础日粮,基础日粮,基础日粮,基础日粮,葡萄糖氧化酶,500g/t,500g/t,500g/t,抗球虫药,正常添加,正常添加,减半,正常添加,肠炎药,正常添加,正常添加,正常添加,减半,（二）降低抗生素使用,山东高唐荣达某肉鸭养殖场应用实例,41,42,（二）降低抗生素使用,西北农林科技大学试验场应用实例,AA,肉鸡,试验方案,试验目的,不同菌种来源,GOD200,对肉鸡性能的影响,试验时间,2015,年,11,月,-2015,年,12,月，,试验期为,42d,试验地点,西北农林科技大学试验场,试验对象,AA,肉鸡,试验过程,选取,840,只鸡分为,4,个组，其中阴、阳性对照各,1,组，试验组,2,个，按照表,1,在饲料或饮水中添加不同的产品。每个组设,7,个重复。试验结束后对比各组鸡群的体重和料肉比。,43,N,组,P,组,A,组,B,组,日粮,基础日粮,基础日粮,基础日粮,基础日粮,GOD,(,黑曲霉）,0,0,3,00g/t,0,GOD,（特异青霉）,0,0,0,300g/t,抗生素组,-,+,-,-,备注：抗生素组包含硫酸粘杆菌素,20g/t,，恩拉霉素,6g/t,，盐霉素钠,60g/t,。,不同菌种来源添加活力一致。,表,1.,各组药物使用情况,44,45,46,总结,葡萄糖氧化酶催化的反应通过消耗氧气制造厌氧环境、清除氧自由基；通过产生葡萄糖酸制造肠道酸性环境促进益生菌的占位和营养物质消化吸收；通过产生的过氧化氢消除霉菌毒素的毒性。,应用过程中添加葡萄糖氧化酶后可以有效的降低仔猪腹泻；延长蛋鸡产蛋高峰、减少软壳蛋和白壳蛋；减少甚至消除肉鸡养殖过程中抗生素的使用。,当下食品安全问题日益得到重视，葡萄糖氧化酶必将为健康养殖提供新的突破口。,47,贵公司葡萄糖氧化酶与其它厂家的区别：,夏盛葡萄糖氧化酶的基因来源为青霉，而其它厂家的产品来源于黑曲霉，青霉源的葡萄糖氧化酶拥有更高的底物结合能力，反应速率更快。,菌种,特异青霉,黑曲霉,分子量,150kD,152kD,碳氢化合物,11%,16%,氨基酸,（赖氨酸、苯丙氨酸）较多,（组氨酸、精氨酸、酪氨酸）较多,K,m,(,米氏常数,),11,30,V,max,值,925,458,（,引自,Biotechnology Advance,27(2009): 489-501,）,酶学小知识,预混料中含有高浓度的矿物元素（金属离子），会不会导致酶失活？,在酶促反应中，酶的活性受到金属离子的影响。但是，酶促反应要在水溶液中才能进行，也就是说只有水分含量达到一定程度后才可以。预混料虽然含有大量的金属离子，但是水分含量很低（,12%,），酶促反应难以发生，所以不会导致酶失活。,颗粒型的酶制剂是不是耐高温性能更好？使用效果是不是更好？,酶制剂能否耐高温并不决定于是否是颗粒或是粉状，而是受到多种因素的影响（菌种、载体等等），首先是菌种的影响最大，如果是耐高温的菌种，那么即使是粉状酶，其耐高温性能也不错，如高温淀粉酶。作为同一种酶，如果经过了包被，包被材料合格，其耐温性有一定的提高，但提高的程度受到包被工艺和包被材料的影响。,就使用效果而言，颗粒酶并不一定比粉状酶好，第一，颗粒酶粒度和比重与饲料不完全一致，导致混合不均匀，或分层，从而导致效果不稳定或不明显。,酶的耐高温性能你们是怎么检测的？可信度怎样？,酶活的耐高温性能测定方法有很多，一般采用将一定量的酶样品放置在一定温度的恒温箱内，过,2,、,5,、,10,分钟，将样品取出，测定酶活。,也可模拟制粒过程，或直接在饲料中添加几倍酶制剂，经过调制制粒后测定酶活损失，此方法更能代表酶的耐高温性能。,仅仅测定和比较酶活，不能确定哪种酶好，而做动物试验又很麻烦；有没有比较可靠而简单的方法？,可以采用体外降解试验的方法来比较不同酶的效果。夏盛公司在同行业中率先推出体外和体内酶解作用的关联系数和相关性，即体外降解效果好的酶制剂在动物饲养试验中也能表现出较好效果。,目前饲料中添加的酶都包括哪些酶种？,目前饲料中添加的酶种主要包括消化性酶和非消化性酶，消化性酶指的是动物体内能分泌的酶种，主要有：淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、脂肪酶等；非消化性酶指的是动物体内分泌很少或缺少的酶，主要是非淀粉多糖酶（,NSP,酶）：木聚糖酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、,葡聚糖酶、果胶酶、,半乳糖苷酶等。市场上的饲料复合酶并不是都含有上述九种酶，一般根据饲料原料和畜禽种类及生理状态不同，产品所含酶种不同。,饲料中为什么要使用,NSP,酶？,因为饲料原料中含有多种非淀粉多糖（,NSP,），这些非淀粉多糖有很强的抗营养作用。比如：在肠道内吸水变粘，增加食糜和粪便粘度；共同构成原料细胞壁，包裹营养物质，影响饲料的消化吸收。使用,NSP,复合酶，能提高饲料原料的营养养分的利用率，降低,NSP,的抗营养作用，减小不同批次饲料原料质量的变异，稳定饲料产品品质。,欢迎莅临我司参观指导,57,汇报结束,谢谢大家,!,请各位批评指正,