动物细胞培养79221

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,动物细胞培养79221,复习回顾：植物细胞工程采用的技术手段有哪些？其理论基础是什么？,所采用技术的理论基础,植物细胞工程,通常采用的技术手段,植物组织培养,植物体细胞杂交,植物细胞全能性,植物细胞工程常用的技术手段有哪些？,这些技术的理论基础是什么？,植物组织培养,植物体细胞杂交,植物细胞的全能性,动物细胞全能性如何？,动物细胞工程,221动物细胞培养和核移植技术,动物细胞工程,通常采用的技术手段,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体,动物细胞核移植,是其他动物细胞工程技术的基础。,动物细胞工程常用的技术手段有哪些？,动物细胞培养、 动物细胞核移植、,动物细胞融合、 单克隆抗体,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。,植物细胞工程常用的技术手段有,:,植物组织培养、植物体细胞杂交,提问：,1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？,从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。,原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。,聚焦一、动物细胞培养过程,幼龄动物,取动物器官,和组织,剪碎组织,胰蛋白酶处理,细胞培养,单个细胞,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础,接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。,50代以后,失去接触抑制,接触抑制,动物细胞生长特性,部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。,为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？,分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难。,聚焦一、动物细胞培养过程,用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？,细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。,胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.28.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.27.4。,聚焦一、动物细胞培养过程,胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？,胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。,聚焦一、动物细胞培养过程,5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。,聚焦一、动物细胞培养过程,简述动物细胞培养的操作过程,分离组织（低幼动物）,分散细胞（胰蛋白酶）,原代培养（细胞增殖）,传代培养（细胞增殖）,分装,聚焦一、动物细胞培养过程,小结过程：,幼龄动物或胚胎的组织、器官,细胞悬浮液,（单个细胞）,胰蛋白酶,动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。,（分解弹性纤维）,10代细胞,原代培养,50代细胞,传代培养,细胞株,无限传代,细胞系,遗传物质未改变,遗传物质改变,接触抑制,剪碎,聚焦一、动物细胞培养过程,动物细胞培养不能,最终培养成生物体,细胞株：,从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。,细胞系：,传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。,1、无菌、无毒的环境,动物细胞培养的条件,添加一定量的抗生素,定期更换培养液,培养液和培养器具无菌处理,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境,2、营养,补充合成培养基中缺乏的物质,葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等,培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境,2、营养,3、温度和PH,36.5,+,0.5度,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境,2、营养,3、温度和PH,4、气体环境：,O2和CO2,（95%空气和5% CO2 ）,2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,1、较植物组培培养基有何独特之处？,独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等,这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强,聚焦三、动物细胞培养的应用,1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,2、获得烧伤病人植皮所需的细胞,3、获得细胞用于检测有毒物质,4、为治疗及预防疾病提供理论依据。,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 （ ）,A.动物细胞融合 B.单克隆抗体,A,D,A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。,A,4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）,无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O,2,，不需要CO,2,CO,2,能调节培养液PH,A、,B、,C、,D、,D,5、动物细胞培养的特点 （ ）,细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代,A、,B、,C、,D、,A,7.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（ ）,A.培养基不同；,B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；,C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；,D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。,A,8.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是( ),B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、,无机盐、生长素和动物血清等,D,9.下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（ ）,A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育,D,10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：,1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自,_,。,（2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是,，然后用,酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是,。,动物胚胎或幼龄动物,剪碎,胰蛋白,使细胞与培养液充分接触，便于培养,（3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有,_等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第,代，到这时的培养称为,_,。,（4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用,处理，然后配置成,，再分装。,动物血清,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬液,1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是,A都需用培养箱,B都须用液体培养基,C都要在无菌条件下进行,D都可体现细胞的全能性,C,巩固练习：,外界条件适宜，植物细胞不需要。动物细胞培养一般需要培养箱。,2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是,C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能,D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株,A,3、动物细胞工程技术的基础是,A.动物细胞融合 B.单克隆抗体,D,愈伤组织条件适宜可以传代培养不分化。,4、细胞株的特点是,A遗传物质没有改变，可以无限传代B遗传物质发生改变，不可无限传代C遗传物质没有改变，不可无限传代D遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代,5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:,A原代培养 B传代培养,C细胞株 D细胞系,C,D,6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞,A.容易产生各种变异,B,.,具有更强的全能性,C.取材十分方便,D,.,分裂增殖的能力强,D,9.回答下列有关动物细胞培养的问题：,在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面,时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的,。此时，瓶壁上形成的细胞层数是,，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是,。,随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现,的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成,细胞，该种细胞的黏着性,，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量,。,相互接触,单层,胰蛋白酶,衰老甚至死亡,接触抑制,不死性,降低,减少,9.回答下列有关动物细胞培养的问题：,检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到,期的细胞用显微镜进行观察。,在细胞培养过程中，通常在,条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中,的活性降低，细胞的,速率降低。,给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作,进行攻击。,中,冷冻,酶,新陈代谢,抗原,谢谢大家！,