纳豆菌的提取及纳豆的制作

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,开题报告：,纳豆菌的提取和纳豆的制作,实验原理,食品纳豆中含有的纳豆菌，主要指枯草芽孢杆菌（,Bacillus,natto,），在通过其发酵 大豆的过程中，通过枯草芽孢杆菌对蛋白质和糖类特别的直接利用功能，在枯草芽孢杆菌的生长过程中，又利用大豆本身的营养成分，分泌和合成了很多种酶类、维生素、氨基酸及其它只有纳豆特有的营养素和生理活性物质，使得发酵后的大豆中更富营养，称之为纳豆。,实验方法,工艺流程 ：,大豆：浸泡约,12h,使体积增加,2,倍左右 蒸煮、消毒,冷却 铺层 发酵 后熟,接种,菌,&,糖,&,盐,实验材料及菌种,菌种：筛选出发菌源为产自日本的纳豆,培养基：牛肉膏蛋白胨培养基,250ml,酪蛋白培养基,250ml,无菌水,100ml,，移液枪（,1001000ul,），枪头,6,个，培养皿,6,个，试管,6,个，烧杯（,500ml,）,2,个，玻璃棒,2,支，涂布棒一支，接种环,2,支，锥形瓶（,250ml)2,个，瓶塞,纳豆菌的分离提取步骤,菌株分离：取上述品种的纳豆若干粒，放入装有,25mL,无菌水和十余颗玻璃珠的锥形瓶中，室温下浸提。振荡多次，获得菌悬液，以十倍稀释法稀释至,10-2,，,10-3,，,10-4,，涂布于牛肉膏蛋白胨培养基。放入恒温培养箱中，,30,培养,24h,。,镜检：确定培养出的微生物的形态特点。,酪蛋白平板筛选：挑取经培养后牛肉膏蛋白胨平板培养基上的单菌落，利用平板划线法接种于新鲜的酪蛋白平板，,30,培养,24h,后观察平板透明圈情况并进行测量，选取透明圈直径大者转接酪蛋白斜面培养。,食品纳豆的制作具体实验步骤,1.,将大豆彻底,清洗,后用,3,倍量的水进行,浸泡,。浸泡时间是夏天,812h,，冬天,20h,。以大豆吸水重量增加,22.5,倍为宜,笔者认为,2,倍最好。,2.,在实验室用普通灭菌锅在充分放汽后，,121,摄氏度高温高压处理,1520min,，以豆子很容易被用手捏碎为宜，宜蒸不宜煮，煮的水分太多。,3.,在大豆被蒸熟前,在浅盘中,铺好锡箔纸,，用筷子等尖细物在锡箔上,打多个气孔，灭菌备用,。,搅拌,时要用的橡胶手套也要用开水灭菌。,4.,大豆蒸熟后,不开蒸锅的盖子，直接倾去锅内的水。将蒸锅的,大豆无菌转移到灭菌盆或罐内,，立即盖盖，以免杂菌污染。,5.,在已灭菌的杯中用,10ml,开水溶解盐（约,0.1%,）、糖（约,0.2%,）和,0.01%,纳豆菌,，如果觉得体积太小，不易均匀喷洒于大豆中，也可用,2030ml,的水，注意水的多少会影响纳豆的粘滞性和嚼感，将混合液喷洒于大豆中搅拌均匀。,6.,把接种好的大豆均匀地,平铺于灭好菌的锡箔纸上,，厚约,23cm,，不宜太厚。将锡箔纸折过来（或用另一种锡箔纸）铺盖于豆层上面。然后在上面再,铺接种好发酵剂的大豆,，厚约,2-3cm,，上面也盖上一层纱。注意：如果发酵中勇气不好，做出的纳豆会以苦，如果勇气太大，纳豆表面会过干，不利于充分发酵。发酵环境的湿度要高。,7.,3742,摄氏度培养,2024h,。,也可以在,30,摄氏度以上的自然环境中发酵，时间适当延长。当发酵完时，纳豆基本上做成了，揭掉锡箔纸或纱时，会看到豆子表面部分发灰折色，室内漂满纳豆的芳香。稍有氨味是正常的，但氨味过于强烈，则有可能有杂菌生长了。,实验日程安排,第一周：配置牛肉膏蛋白胨培养基，酪蛋白培养基各,250ml;100ml,无菌水；包好,12,个培养皿，,6,个试管；高压蒸汽灭菌,第二周：制备纳豆的稀释液,10,-2,、,10,-3,、,10,-4,，利用涂布平板法对菌进行培养,第三周：对培养出的细菌镜检，将枯草芽孢杆菌进行筛选，接种到酪蛋白平板上进行筛选,第四周：对筛选出的菌株进行纯化，接种于酪蛋白的斜面上进行大量培养,第五周：提前一天将大豆清洗后浸泡；用普通灭菌锅在充分放汽后，,121,摄氏度高温高压处理,1520min,；铺好锡箔纸打多个气孔，灭菌备用；大豆无菌转移到灭菌盆或罐内；,10ml,开水溶解盐（约,0.1%,）、糖（约,0.2%,）和,0.01%,纳豆菌，混于大豆中，铺好锡箔纸进行发酵培养。,2024h.,