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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,动物细胞融合与单克隆抗体,一、动物细胞融合:,2,、原理:,细胞膜具有一定的流动性,1,、概念:,选修,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,诱导方式,物理法:,化学法:,生物法:,灭活的病毒(特有的方法),3,、过程:,(与植物细胞融合的基本原理相同),离心、电激、振动,聚乙二醇,细胞完成融合的标志:,细胞核融合为一个核,融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,成为杂交细胞,意义,:,突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能,5,、动物细胞融合的应用:,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,制备单克隆抗体(重要应用),主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,(同左),生物:灭活的病毒,物理(离心、振动,、,电刺激),化学(聚乙二醇),诱导方法,用胰蛋白酶处理使细胞分散后诱,导细胞融合,酶解法去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,二、单克隆抗体:,其由何种细胞产生?,主要分布在哪里?,如何得到抗体?,提问,?,关于抗体,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应,B,细胞,不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异性差,灵敏度低,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一的效应,B,细胞,(但不能在体外大量增殖产生大量的抗体),抗原,动物体内,抗体,刺激,效应,B,细胞,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因,1,、每一个,B,淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,不同种类的,B,淋巴细胞分泌的抗体不同,2,、,B,淋巴细胞在体外培养时不能无限增值,骨髓瘤细胞能够无限增值,制备单克隆抗体,1,、原理:,B,淋巴细胞能产生抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,,杂交瘤细胞具有两个亲本的特性,即能迅速大量增殖,又能产生足够数量的单一抗体。,2,、单克隆抗体的制备过程:,获得杂交瘤细胞,动物细胞培养,提取单克隆抗体,将抗原注入小鼠体内获得效应,B,淋巴细胞,效应,B,淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,筛选能够产生所需抗体的细胞群,再在培养液或小鼠腹腔中培养,从培养液或小鼠腹水中提取,细胞融合后培养液中有几种细胞,B,细胞、 骨髓瘤细胞,B,与,B,融合、瘤瘤融合,自身融合的细胞:,未融合的细胞:,杂交瘤细胞,:,B,细胞与骨髓瘤细胞融合,5,种,在整个制备的过程中要经过几次筛选,?,筛选得到杂交瘤细胞,,筛选先在多孔培养板上,在每孔只有,一个杂交瘤细胞,下培养筛选出特异抗体的细胞群,3,、单克隆制备过程中用到的生物技术手段,动物细胞融合,动物细胞培养,4,、单克隆抗体的应用,:,应用,:,疾病的诊断、治疗和预防。,优点,:,特异性强、灵敏度高,产量大,实例,:,各种癌症、肝炎病毒、,SARS,病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断;,在疾病治疗方面,单克隆抗体犹如人体卫士,能识别,“,自己,”,与,“,异己,”,,一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。,若在单抗上带上抗癌药物制成,“,生物导弹,”,,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。,谢谢观赏,
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