免疫自身抗体

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,免疫自身抗体,自身抗体检测的意义,诊断与鉴别诊断,病情活动性评估和监测,协助转归和预后的评判,预警,诊断：综合手段,临床,+,实验室,+,影像,+,病理,抗体依赖,抗体部分依赖,SLE,SS,MCTD,RA,APS,GPA,GBM(Goodpasture),AIH,PM/DM,SSc,PBC,抗体非依赖,系统性血管炎：,BD,TA,PAN,GCA,RPC,ANA,斑点型,/RNP,5-10%,血清阴性,Jo-1,阳性率,70%,Scl70,AMA-M2,自身抗体是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,ANA,抗体谱,自身免疫性肝病抗体谱,ANCA,磷脂抗体谱,RA,抗体谱,器官特异性免疫病相关抗体,甲状腺：,TG-Ab,、,TPO-Ab,炎性肠病：,ASCA,皮肤：天疱疮抗体,/,类天疱疮抗体,胃：抗胃壁细胞抗体、抗内因子抗体,I,型,DM,：,IAA,、,ICA,、,GAD,抗核抗体,ANA,概念：抗核酸和核蛋白抗体的总称,细胞核内和细胞浆内成分,ANA,产生机制：,分子模拟,/,自身抗原改变,/,细胞凋亡,检测底物,鼠肝、鼠肾（大,/,小鼠组织不含,SSA/RO,抗原）,人喉癌上皮细胞(,Hep-2),ANA,的诊断价值和除外价值,ANA,阳性,诊断,CTD,？,ANA,阴性,除外,CTD,？,假阳性,未加稀释的正常人血清,1/3,呈阳性,低滴度,ANA,可见于感染、肿瘤、正常人,意义未明的核型,作为,CTD,的筛选试验必须,强调滴度、核型,假阴性,重症,SLE,，抗体与大量抗原结合沉积于组织,主要成分为,抗,dsDNA,，疾病缓解期,大量蛋白尿,时从尿,/,肠道丢失,技术：甲醇、乙醇固定导致,SSA,抗原丢失,某些核抗原成分在,胞浆内,或胞浆比核质更丰富,(,如,SSA/RO,，,Jo-1,，,rRNP,等,),球蛋白亦丢失,弥漫性结缔组织病,ANA 18,项,抗,ENA,a-Jo-1,a-Scl70,a-rRNP,IIF,法原理,荧光显微镜下,ANA,的染色型别,均质型（,H,omogeneous,）,H,：,抗组蛋白、抗,dsDNA,、,ANuA,斑点型（,S,peckle,）,S,：,与抗,ENA,有关,核膜型（,Membranous,）,M,抗,dsDNA,、板层素抗体、,gp210,抗体,核仁型（,N,ucleolar,）,N,RNA,聚合酶、,PM-Scl-SSc,着丝点型（,Centromere,）,C,：,CENP,，,ACACREST,胞浆型：,AMA,、抗,Jo-1,、抗,rRNP,抗,dsDNA,抗,rRNP,AMA,RNA,多聚酶,/,抗,Scl-70,板层素抗体,Gp210,抗体,抗,Jo-1,抗,SSA,H,M,S,N,胞浆型,着丝点型,纺锤体型,核点型,ANA,分类,抗,DNA,（,dsDNA,ssDNA),抗组蛋白（,Histone),抗非组蛋白（,Extractable Nuclear Antigen,ENA,）,抗核仁（,Nucleolus,）,书写习惯：,ANA(+),型别 滴度,抗,DNA,抗,ssDNA,抗体：针对嘌呤和嘧啶碱基，在多种疾病中及正常人血清中存在，无特异性,抗,dsDNA,抗体：针对脱氧核糖核酸骨架，对,SLE,有较高的,特异性,抗,dsDNA,阳性者,85% 5,年内发展为,SLE,抗,dsDNA,与疾病活动度相关,抗,dsDNA,与,LN,相关,：循环免疫复合物在肾小球基底膜沉积,或肾小球原位免疫复合物形成,检测方法及结果意义,放射免疫法,(Farr):,敏感,20%,间接免疫荧光法,(,短膜虫或马疫锥虫为底物,):,特异,1:10,酶联免疫吸附法,(ELISA):,敏感,100,书写习惯：抗,dsDNA-IF (+) 1:320/ ELISA: 800U/L,抗,dsDNA-SLE,特异性抗体,与,SLE,疾病活动相关，阳性者即使目前病情稳定，,80%,在,5,年内出现病情活动。,抗组蛋白抗体,AHA,组蛋白是染色质的基本结构核小体的重要组成部分,.,由,H1,，,H3,H2A,H2B,H4,组成,在多种,自身免疫性结缔组织病,（如,SLE,、,SS,、,RA,、,SSC),中出现；,药物引起的狼疮,中阳性率达,95%.,不同药物所致的抗组蛋白的亚单位抗体不同,异烟肼：,H1,H2A,H2B,H3,和,H4,的滴度基本一致,肼苯哒嗪：抗,H3,和抗,H4,抗体,普鲁卡因酰胺：抗,H2A-2B,复合物抗体,.,抗,ENA,抗体（,4+7,）,抗,ENA,抗体（,4+7,）,双扩散,-4,（特异）,抗,Sm,抗,SSA,抗,SSB,抗,RNP,（抗,U1RNP,）,滴度：,1,：,1,1,：,4,1,：,16,免疫印迹,-7,（敏感）,抗,抗,SSA 52/60KD,抗,SSB 45/47KD,抗,抗,Jo-1 55KD,抗,Scl-70 70/86KD,抗,后,3,个可单开双扩散法,抗,ENA,的测定-免疫双扩散法,不同稀释倍数,仅第一种为阳性,免疫印迹法,正确看待免疫印迹法的检测结果,免疫印迹中条带只表明在电场泳动中出现,1,）分子量相同的区带，,2,）由于形状、所带电荷而泳动速度相同可造成不同分子量蛋白在相同部位出现条带,免疫印迹中的多肽抗体并不一定是某种特异性抗体,印迹阴性并不代表该抗体一定阴性,片段的集合完整蛋白,片段的出现是否齐备,与双扩散法相互验证,与临床是否吻合,双扩散法：,针对整蛋白（有二级结构），更特异,抗,Sm,抗体,抗原：核内小核糖核蛋白，其抗原决定簇主要在与,u1,u2,u4-u6RNA,连接的,B,和,D,蛋白多肽上,三条带同时出现时有一定意义,抗,Sm,抗体阳性往往 抗,RNP,抗体阳性,-linkset,SLE,中阳性率：,30%,左右，,SLE,的,标记抗体,，几乎只出现于,SLE,与,疾病活动度不相关,抗,RNP,抗体,抗核内的核糖核蛋白（,u1RNP,抗体）,若,抗,Sm,抗体阳性，抗,U1RNP,往往也阳性,-linkedset,抗,RNP,抗体阳性常出现抗,Sm,抗体,28,、,29KD,高滴度抗,RNP,抗体是,MCTD,的特异性抗体,区分,CTD,与非,CTD,2530%SLE,出现抗,RNP,阳性,与双手肿胀,雷诺氏现象,肌炎和指,(,趾,),端硬化和肺动脉高压相关,抗,SSA,、,SSB,抗体,抗,SSA,多在胞浆中,，,52KD,与,SS,相关，,60KD,与,SLE,相关,抗,SSA,在,SLE,中阳性率,40%,，抗,SSB,在,SLE,中阳性率,10-15%,抗,SSB,阳性，抗,SSA,也应阳性；抗,SSA,阳性，抗,SSB,可以阴性,母亲抗,SSA,和抗,SSB,抗体阳性,新生儿狼疮及婴儿心脏传导阻滞,常与亚急性皮肤型狼疮、平滑肌受累、光过敏、血管炎、皮损、紫癜、淋巴结肿大、,高球,/RF,、,NS,损伤、,WBC,减少、,晚发,SLE,有关,故,ANA-,时，,SSA,可,+,抗,rRNP,抗体,抗原：核糖体,60s,亚基,P0,，,P1,，,P2,磷酸化蛋白，主要位于,胞浆,与,SLE,中枢神经系统表现相关,对,SLE,高度特异,，出现于,1015%,的,SLE,常常在,SLE,活动期中存在,与抗,dsDNA,的消长相平行,但其不会随病情的缓解立即消失,可持续,1-2,年后才转阴,与,SLE,病情活动性不完全同步,抗,Scl-70,抗体,抗原：,DNA,拓扑异构酶,1,硬皮病（,SSc,）中抗,Scl-70,阳性率,40%,左右，,为,SSc,的标记抗体,，提示弥漫性,SSc,双扩散法：小牛胸腺浸出物,与肺间质病有关,-,抗,Scl-70,阳性,SD,病人,发生,肺间质病变,的危险性较抗,Scl-70,阴性的,SD,病人增加,10,倍，阳性者易出现皮肤硬化快速进展和,SRC,抗,Jo-1,抗体,抗原是组氨酰,tRNA,合成酶，,胞浆中,PM/DM,的标记抗体,PM/DM,病人中,2535%,阳性，合并肺间质变的,PM/DM,病人中高达,6070%,阳性,抗,Jo-1,抗体综合征：,急性发热,对称性关节炎,技工手,雷诺现象,肌炎,并,肺间质变,三炎：肌炎、关节炎、间质性肺炎,三症：发热、技工手、雷诺,肌炎特异性抗体,MSA,PL-7,：苏氨酰,tRNA,合成酶,PL-12,：丙氨酰,tRNA,合成酶,EJ,：甘氨酰,tRNA,合成酶,OJ,：异亮氨酰,tRNA,合成酶,KS,：天冬酰,tRNA,合成酶,Mi-2,：组蛋白乙酰基转移酶复合物的解旋酶组分（,H,）,Ku,：,DNA,结合蛋白（,SN,）,SRP,：信号识别颗粒,抗合成酶抗体,发热,关节炎,雷诺现象,技工手,间质性肺炎,抗,SRP,阳性率,4%,秋季急性起病,多发性肌炎,严重肌无力,累及,心脏,死亡率较高,抗,Mi-2,阳性率,1520%,95%DM,皮肤病变：,披肩疹、,V,形症,肌炎特异性抗体,MSA,皮肤病变为主，,肌炎轻,ACA,（抗着丝点抗体）,抗原为,CENP-A,、,B,、,C,CREST,(,软组织钙化,雷诺现象,食道功能障碍,指端硬化,毛细血管扩张,),综合征,80%,阳性,（,calcinosis,/,Raynaud phenomena,/,esophageal Dysmotility,/,sclerodactyly,/,telangiectasia,）,在,SS,和自身免疫性肝病中也可存在,PBC,中阳性率,53.5%,，阳性者易出现,门脉高压和消化道出血,ACA,阳性的,SS,更易出现淋巴瘤,，高球少，,RP,多,抗,PCNA,（抗增殖性核抗原）：,抗原,-DNA,多聚酶,的辅因子,对,SLE,高度特异，阳性率低,15%,SLE,特异，但阳性率低,ANuA,（抗核小体抗体）,对,SLE,的特异性,98%,可见于药物性狼疮,早期,SLE,、非活动期,SLE,检出率高于抗,dsDNA,抗,RNP,与抗,rRNP,二者抗原不同，抗,RNP,的抗原是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而抗,rRNP,的抗原是主要在胞浆内核糖体亚基中的磷酸蛋白,抗,RNP,与雷诺现象、肺动脉高压相关，是,MCTD,的特异性抗体；,抗,rRNP,与,NPSLE,相关，是,SLE,的特异性抗体,N Engl J med 358;9,CTD,诊断时,ANA,的检测策略,自身免疫性肝病,生化：,1,）转氨酶增高,ALT,、,AST,2,）胆管酶增高,ALP,、,GGT,（胆红素、,TBA,）,3,）排除其他病因：,饮酒、病毒、药物,自身免疫性肝炎,- AIH,原发性胆汁性肝硬化,-PBC,原发性硬化性胆管炎,-PSC,自身免疫性肝病,AIH,抗体谱,PBC,抗体谱,ANA,a-SMA,a-KLM,a-SLA,AMA,AMA-M2,Gp210,SP100,自身免疫性肝病的抗体谱,AIH,型,ANA,、,a-SMA,、,pANCA,型 抗,KLM,、抗,LC1,型 抗,SLA/LP,PBC AMA-M2,抗,gp210,、抗,SP-100,PSC ANA,、,a-SMA,、,ANCA,自身免疫性肝病抗谱,鼠肝鼠肾,-KLM,鼠胃,-,抗平滑肌抗体；抗肌动蛋白抗体,Hep2-,抗核点抗体；鼠肝,-ANA,鼠肾,-AMA,；猴肝,-SLA,AMA,抗细胞浆成分：靶抗原,-,丙酮酸脱氢酶,E2,（,PDC-E2,）和,X,蛋白,AMA-M2,在,PBC,中阳性率,96%,，特异性,97%,；,滴度与疾病严重度和预后不相关,M1M9 AMA-M2,、,M9-,预后好,AMA-M4,、,M8-,预后差,对优思弗效果佳,AMA,亚型抗体种类及其疾病相关性,AMA,亚型抗体,相关疾病,阳性率,M1,梅毒,100%,SLE,50%,进行性系统性硬化症, SS,RA,515%,血栓形成,习惯性流产,常见,M2,PBC(,高滴度,),96%,其他慢性肝病,(,低滴度,),30%,进行性系统性硬化症,(,低滴度,),725%,M3,药物性狼疮,100%,M4,PBC(,常伴,M2,阳性,活动期,晚期,PBC),55%,M5,SLE,自身免疫性溶血性贫血,少见,M6,药物性肝炎,100%,M7,急性心肌炎,心肌病,60%,30%,M8,PBC(,常伴,M2,阳性,活动期,PBC),55%,M9,PBCM2,阴性患者,(,早期,PBC),82%,PBCM2,阳性患者,3744%,PBC,中出现的自身抗体及意义,抗体,意义,抗,gp210,对,PBC,高度特异,，与其肝外表现相关，提示预后不良；,抗,SP100,多核点型,ANA,，对,AMA,阴性,PBC,（阳性率可达,60%,）有诊断价值,抗,PML,多核点型,ANA,，,抗,AMA-M2,高度特异,，可替代肝活检诊断,PBC,抗核板层,B,受体抗体,PBC,特异,，敏感性低,13%,抗磷脂抗体,肺栓塞,布,-,加综合征,下腔静脉血栓,肠缺血,肠穿孔,脾梗塞,肾梗塞,肾静脉血栓,肾衰竭,心肌梗塞,Addison,肾上腺,骨梗死,脑梗塞,CRVOCRAO,眼,胰腺炎,流产、早产、宫内发育迟缓、先兆子痫,什么时候想到,APS,？,静脉血栓、动脉栓塞、病理妊娠,APTT,延长（体内高凝、体外不凝）,APTT,与纠正实验,即刻、孵育,2h,均不能被纠正,加入磷脂可纠正,抗磷脂（,Phospholipid,）抗体,狼疮抗凝物,抗心磷脂抗体,梅毒血清试验假阳性（,RPR+,，,TPPA,确证阴性）,2GP1,2GP1,（载脂蛋白）与磷脂结合，改变表面结构，暴露抗原决定簇，介导抗磷脂抗体结合到膜磷脂。,2GP1,是必需的辅助因子，,测,2GP1,可能比测,ACL,更有意义,。,动静脉血栓形成、血小板减少、习惯性流产、神经精神狼疮有关,系统性血管炎,ANCA,血管炎抗体谱：,ANCA+AECA,血管大小的定义,大血管,-,主动脉及一级分支,中等血管：肌性动脉和小动脉 内膜,弹力层,肌层,外膜,小血管,毛细血管和后微静脉、微动脉,ANCA,以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原,靶抗原：,PR3,，,MPO,、乳铁蛋白酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶、杀菌,/,通透性蛋白,C-ANCA,（胞浆型）：主要抗原,PR3,P-ANCA,（核周型）：主要抗原,MPO,书写：,ANCA,（,+,）,P 1,：,20,，,MPO-ANCA,，,PR3-ANCA,P-ANCA,C-ANCA,不同疾病中出现的,ANCA,pANCA,（核周型）,pANCA MPO ANCA,特异性较差，,MPA,（,60%-80%,），,EPGA,IBD,，,PSC,、,PAN,、,SLE,、,RA,、,SS,与,坏死性新月体肾小球肾炎,NGGN,相关，且,与疾病活动度相平行,cANCA,（胞浆型）,cANCA,，其抗原主要是中性粒细胞颗粒内的和单核细胞溶酶体的丝氨酸蛋白酶,3,cANCAPR3 ANCA,GPA,中特异性为,95%,，与疾病活动性平行,少数,MPA,、,CSS,、,PAN,等也可阳性,类风湿关节炎相关抗体,类风湿因子（,Rheumatoid Factor,）,靶抗原为,IgG,的,FC,片段,，是抗,IgG,的,Ig,与疾病活动性有关,阳性不足以诊断,RA,，阴性不能除外,RA,多种结缔组织病（,SLE,，,SD,，,SS,，,PM/DM,）、感染疾病（,SBE,，,TB,，,hepatitis,）、肝硬化 、结节病、淋巴瘤等均可阳性，正常人,2%,阳性，老年人可达,5%,阳性,冷球蛋白血症、,SS,可出现,RF,高滴度阳性,病后半年才产生，有关节外表现者滴度高。持续高滴度,RF,预示疾病严重，骨侵蚀发生率高，预后差,两次或多次阳性,/,高滴度阳性,/,存在,IgM,、,IgG,、,IgA,型,对,RA,特异性提高,抗核周因子,-(APF),靶抗原位于人颊粘膜细胞的核周颗粒中,对,RA,诊断的敏感性,35%,，特异性高达,91%,RF,阴性者,40%,阳性,APF,与疾病严重程度、关节外表现及放射学进展相关，提示预后欠佳,抗角蛋白抗体,-,（,AKA,）,6,周龄雄性,Wistar,大鼠的中,1/3,食道切片为底物,以典型的角质层板层状、线状沉积的荧光为阳性,对,RA,诊断的敏感性,32-44.13%,、特异性,89-90%,RF,阴性者,34%,阳性,与,RA,的病情严重程度相关,提示预后不良,抗环瓜氨酸多肽,(CCP),抗体,对,RA,诊断高度敏感（,46.6%,）和特异性（,96.6%,）,可以在关节炎早期出现,与严重的骨关节破坏相关,与,APF,、,AKA,以及,HLA-DR4,之间有相关性,与,RF,之间无相关性,抗,MCV,（,mutated citrullinated vimentin,）,(,突变型瓜氨酸波形蛋白,),敏感性高，联合抗,CCP,提高诊断敏感性,与,RA,严重程度和疾病活动度有一定相关,抗,GPI(,葡萄糖,-6-,磷酸异构酶,),敏感性,25%,，特异性,80%,，与,RA,关节外受累,相关,5%,早期,RA,18% RA,类风湿结节,45%,类风湿血管炎,92% RA felty,其它抗体,抗血小板抗体：免疫性血小板减低,抗,GBM,抗体、抗,TBM,抗体,抗甲状腺球蛋白抗体,:,亚甲炎,皮肤组织自身免疫性疾病相关自身抗体,天疱疮自身抗体谱：,抗天疱疮抗体（抗棘细胞间抗体）、抗桥粒抗体（,抗,Dsg-1,抗体、抗,Dsg-3,抗体,）,大疱性类天疱疮自身抗体谱：,抗类天疱疮抗体（抗表皮基底膜抗体）,BP180,和,BP230,与疾病活动度相关的抗体,抗,dsDNASLE,ACL-APS,ANCA-GPA,、,MPA,RF/a-MCV-RA,有争议,抗体,vs,临床表现,连连看,抗,SSA,抗,dsDNA,抗,RNP,抗,rRNP,抗,Scl-70,广泛皮肤硬化、肺间质病变、,SRC,手肿胀、雷诺现象、肺高压,蛋白尿、镜下血尿,光过敏、皮疹、胎儿,AVB,精神症状、认知功能障碍,与,NPSLE,相关的抗体,抗,rRNP,抗磷脂抗体（与舞蹈病、癫痫病、脊髓病、中风、认知功能不全相关）,抗,NMDAR,抗体（,N-,甲基,-D-,门冬氨酸受体，抗,dsDNA,的一个组分，引起神经元非炎症性坏死，,CSF,中存在，与认知障碍、抑郁状态相关）,抗神经元抗体（,CSF,中滴度与,NPSLE,病情活动相关）,F 21,精神症状,多动症,思维松散,GPA,MPA,F 83,尿,pro trace,，,BLD 200/ul,，异形,80%,Cr 206,ANCA(+)p1:40,MPO-ANCA 118,ANA 3,项（,-,）,C3,（,-,）,GBM,（,-,）,M 37,口腔溃疡 外阴溃疡,人有了知识，就会具备各种分析能力，,明辨是非的能力。,所以我们要勤恳读书，广泛阅读，,古人说“书中自有黄金屋。,”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，,培养逻辑思维能力；,通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，,培养文学情趣；,通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。,有许多书籍还能培养我们的道德情操，,给我们巨大的精神力量，,鼓舞我们前进,。,