消毒与灭菌的效果监测

, , , , , ,*,消毒与灭菌的效果监测,检验科 邵春红,医疗机构消毒技术规范,解读,医疗机构消毒技术规范,1.,消毒与灭菌的基本原则；,2.,清洗与清洁，消毒与灭菌方法；,3.,清洁、消毒与灭菌的效果监测。,院感相关标本,压力蒸汽灭,菌,空气样本的采集,采样要求,提出选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，,或怀疑与医院感染暴发有关时采样，,使用普通营养琼脂平板采样。,（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止,10min,后采样。）,采样高度（沉降法）,平板置距地面垂直高度,0.8m,1.5m,处。,空气样本的采集,布点方法,室内面积,30,，设一条对角线上取,3,点采样，即中心一点，两端各距离墙,1m,处各取一点；室内面积,30,，设东、南、西、北、中,5,点采样，其中东、南、西、北点距离墙,1m,。,采样方法,将直径,9cm,普通营养琼脂平板,放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露,5min,后盖上平皿盖及时送检。,空气样本的检测与报告,检测培养,将送检平皿置,36,1,恒温箱培养,48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。,结果处理,计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌，,则挑取可疑菌落进行鉴定。,计算公式,：每个房间所有平板菌落总数,/,采样点,/,（皿暴露时间）,报告,:,沉降法按平均每皿的菌落数报告：,cfu,/,（皿暴露时间）,例如：,2cfu/(5min,直径,9cm,平皿,),。,空气样本的结果判定,.,洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循,50333,.,非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数,cfu,（,直径平皿）。,.,儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数,4cfu/(5min,直径,9cm,平皿,),。,物体表面标本的采集,采样时间,在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。,物体表面标本的采集,采样方法,用,5cmx5cm,灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子,1,支，在规格板内横竖往返各涂抹,5,次，并随之转动棉拭子，连续采样,4,个规格板面积，被采表面,100cm,2,，取全部表面；被采表面,100cm,2,，取,100cm,2,。剪去手接触部分，将拭子放入装有,10ml,物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利用棉拭子直接涂抹物体表面采样。,采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。,物体表面标本的检测与报告,检测方法,：充分震荡采样管后，取洗脱液,1.0ml,接种平皿，将冷至,40,-45,的熔化营养琼脂培养基每皿倾注,15ml-20ml,，,37,恒温箱培养,48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。,计算公式,：物体表面细菌菌落数总数（,cfu/cm,2,）,=,平板上菌落数,采样液稀释倍数,/,采样面积。,报告方式,：菌落数,cfu,/ cm,2,小型物体表面的结果用,cfu,/,件表示,物体表面标本的结果判定,1.,洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数,5cfu/ cm,2,。,2.,儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应室、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数,10cfu/ cm,2,压力蒸汽灭,菌效果的监测,标准指示菌株,：嗜热脂肪杆菌芽孢,采样方法：,将指示剂放置于标准试验包中，置于压力蒸汽灭菌器内,最难灭菌的位置,处，执行正常灭菌过程，完毕后将指示剂送检。,压力蒸汽,灭菌效果的监测,检测方法,：将指示菌片捏碎，放入,56,培养箱培养,48h,，观察结果。如指示菌片颜色为,紫色,，说明无嗜热脂肪杆菌生长；如指示剂颜色为,黄色,则说明有嗜热脂肪杆菌生长。,报告方式,：“检出,/,未检出嗜热脂肪杆菌”。,结果判定,：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。,皮肤表面标本的采集,采样时间,按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒效果后及时采样。,采样方法,同物体表面标本，不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。,医护人员手表面标本的采样,采样时间,在接触病人或从事医疗活动前进行采样。,医护人员手表面标本的采样,采样面积及方法,被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的无菌拭子在 双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积,30cm,2,），剪去手接触部位，将拭子放入装有,10ml,物表采样液的试管中送检。,皮肤表面标本,检测方法,计算公式 同物体表面,报告方式,计算公式,：物体表面细菌菌落数总数（,cfu/cm,2,）,=,平板上菌落数,采样液稀释倍数,/,采样面积。,皮肤表面标本的结果判断,结果判定,：,皮肤消毒效果的判定标准遵循,WS/T313,中外科手消毒卫生标准。,a),卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应,10cfu/cm,2,。,b),外科手消毒，监测的细菌菌落总数应,5cfu/cm,2,。,消毒液的送检,采样要求,采集使用中的消毒剂。,采集方法,用无菌注射器抽取,1ml,被检样液，加入,9ml,消毒中和液，混匀。,消毒液的培养与报告,培养方法,：同物体表面标本,计算公式,：消毒液染菌量（,CFU/,mL,）,=,平均每皿菌落数,10,稀释倍数,报告方式,：菌落数,CFU/,mL,。,结果判断：,使用中灭菌用消毒液：,无菌生长,；,使用中皮肤黏膜消毒液染菌量,10CFU/mL,；,其他使用中消毒液染菌量,100CFU/mL,。,清洁用品的采样,采样时间,消毒后、使用前进行采样。,采样方法,布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取,1cm3cm,，直接投入,10ml,含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。,清洁用品的报告与结果判断,检测方法,：将采样管在混匀器上振荡,20s,或用力振打,80,次，取采样液检测致病菌。,报告方式,：检出,/,未检出细菌或真菌，报告为“检出,菌”。,结果判定,：,未检出致病菌为消毒合格。,其他标本,内镜样本的采样,用,10ml,中和液反复冲洗镜后取回收液于试管中送检。,透析液的采样,用灭菌试管无菌操作采集透析液,5ml,送检。,内镜标本的检测与报告,培养方法,：同物体表面标本，若临床要求培养致病菌，则收到标本后，取,0.1ml,均匀接种于普通琼脂培养基表面，放入,35,培养箱培养,48h,，观察结果。检出细菌时，则挑取可疑菌落进行鉴定。,计算公式,：内镜细菌菌落总数（,cfu,/,件）,=,平板上菌落的菌落数,10,报告方式,：“菌落数,cfu,/,件”。,院感标本送检时间,空气培养标本：周一至周三,其他标本：周三上午,谢 谢,