白血病MICM分型应用

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,MICM,分型的应用,1,一、骨髓细胞学检查发展过程,1. FAB,分型（,M,，,1976,年）,2. MIC,分型（,MIC,，,1986,年）,3. WHO,分型（,MICM,，,2001,年）,2,（一）,FAB,分型,主要手段：细胞形态学,+,细胞化学染色,将急性白血病分为：,1. AML,（,M1M7,）,2. ALL,（,L1L3,）,3,（二）,MIC,分型,在形态学（,M,）的基础上增加了免疫学（,I,）、细胞遗传学（,M,）。,M I C,4,（三）,MICM,分型,+,骨髓活检,5,二、,WHO,分型,2001,年,WHO,根据细胞组织来源将血液恶性肿瘤分为四类：,髓细胞系,淋巴细胞系,组织,/,树枝状细胞系,肥大细胞系,6,（一）髓细胞系恶性肿瘤,1.,骨髓增生性疾病（,MPD,）,2.,骨髓增生异常,/,骨髓增生性疾病（,MDS/MPD,）,3.,骨髓增生异常综合征（,MDS,）,4.,急性髓细胞白血病（,AML,）,7,1. MPD,Ph,染色体,t,（,9,；,22,）（,q34;q11,）,BCR/ABL,阳性的慢性髓细胞白血病（,CML,）,慢性中性粒细胞白血病（,CNL,）,慢性嗜酸性粒细胞白血病,/,高嗜酸性粒细胞综合征（,CEL/HES,）,真性红细胞增多症（,PV,）,慢性原发性骨髓钎维化（伴髓外造血）（,CIMF,）,原发性血小板增多症（,ET,）,不能分类的,MPD,8,2. MDS/MPD,慢性粒,-,单核细胞白血病（,CMML,）,不典型慢性髓细胞白血病,(aCML),幼年型粒,-,单核细胞白血病（,JMML,）,不能分类的,MDS/MPD,9,3. MDS,难治性贫血（,RA,）,难治性贫血伴有环状铁粒幼细胞（,RARS,）,难治性血细胞减少伴多系增生异常（,RCMD,）,难治性血细胞减少伴多系增生异常和环状铁粒幼细胞（,RCMD-RS,）,难治性贫血伴原始细胞增多,1,型（,RAEB-1,）,难治性贫血伴原始细胞增多,2,型（,RAEB-2,）,未归类的,MDS,5q-,综合征,10,4. AML,伴有特殊细胞遗传易位的,AML,伴有,t(8;21)(q22;q22),的,AML,，,AML1(CBF,)/ETO,的,AML,（,FAB,：,M2b,）,伴有,inv(16)(q13;q22),或,t(16;16)(p13;q22),CBF,/MYH11,的骨髓异常嗜酸性粒 细胞增多的,AML,（,FAB,：,M4EO,）,伴有,t(15;17)(q22;q11-12),PML/RAR,a,及变异的急性早幼粒细胞白血病（,APL,）,（,FAB,：,M3,）,伴有,11q23(MLL),异常增生的,AML,（,M1,、,M2,、,ALL,）,伴有多系血细胞增生异常的,AML,由,MDS,或,MDS/MPD,转化而来的,发病前无,MDS,病史,治疗相关的,AML,或,MDS,与烷化剂有关,与拓扑异构酶,II,抑制剂相关,其他,11,4. AML,不能归类的,AML,极微分化,AML,（,FAB,：,M0,）,未成熟的,AML,（,FAB,：,M1,）,成熟的,AML,（,FAB,：,M2a,）,急性粒,-,单核细胞白血病,（,FAB,：,M4a,b,）,急性原单核细胞及单核细胞白血病,（,FAB,：,M5,）,急性红白细胞白血病,（,FAB,：,M6,）,急性巨核细胞白血病,（,FAB,：,M7,）,急性嗜硷性粒细胞白血病,伴骨髓钎维化的急性全髓增生,髓细胞肉瘤,急性双系列白血病,12,（二）淋巴细胞系恶性肿瘤,前体,B,和,T,细胞淋巴瘤,前体,B,淋巴母细胞白血病,/,淋巴瘤,前体,T,细胞母细胞白血病,/,淋巴瘤,外周,B,淋巴细胞肿瘤,慢性淋巴细胞白血病,/,小淋巴细胞淋巴瘤（,CLL/SLL,）,B,淋巴细胞幼淋巴细胞白血病,(B-PLL),多毛细胞白血病,(HCL),浆细胞肿瘤,多发性骨髓瘤（,MM,），浆细胞白血病,(PCL),Burkitt,白血病,/,淋巴瘤,外周,T,淋巴细胞肿瘤,T,淋巴幼淋巴细胞白血病,(T-PLL),T,淋巴大颗粒淋巴细胞白血病,(T-LGL),侵袭性,NK,细胞白血病,成人,T,淋巴细胞白血病,(ATLL),13,三、关于细胞形态学（,M,）,细胞形态学检查仍是诊断血液肿瘤的,“金标准”,（一）检测手段,平面显微镜,相差显微镜,激光共聚焦显微镜,（二）染色,Wright,或,Wright +Gimsa,14,（三）关于细胞形态特征的一些新认识,1.,髓细胞白血病中的原始细胞,（,1,）原始细胞,1,型（同,FAB,原始细胞,1,型）：胞浆无颗粒，染色质细，核仁清晰，,24,个。,（,2,）原始细胞,2,型（同,FAB,原始细胞,2,型）：硷性胞浆，有颗粒,20,个，染色质细，核仁清晰，,24,个。,（,3,）原始细胞,3,型：硷性胞浆，有颗粒,20,个，染色质细，核仁不清晰。,（,4,）原始细胞,4,型：核,/,浆比例下降，浆内可见,A,、,S,颗粒，核可变形，核仁可不清。,注：,原始细胞与早幼粒细胞鉴别不以颗粒来区分。,原始细胞,3.4,型强调核,/,浆比例,68,：,1,。,2.,关于毛细胞形态的一些认识：,（,1,）经典形态：细胞外周有较长的毛发或毛刺状改变。,（,2,）不典型或常见形态：胞浆内无颗粒，呈灰蓝色云雾状，边缘不清晰。,15,四、关于白血病细胞免疫学检测（,I,）,（一）常见方法：,酶联免疫,免疫荧光,（二）检测手段,免疫组织化学,（简便实用、 对单个细胞定位好）,FCS(FCM),（昂贵、科学性高、 做好不易）,（三）血细胞相关抗原（,CD,）的生物学特性,16,1,、常用,TC,抗体,（,）,TC,有关抗体,CD1CD8,最有价值（,1,、,2,、,3,、,4,、,5,、,7,、,8,）,CD2,：,CD2,是绵羊红细胞受体，其分子量为,50,58kDa,的单分子糖蛋白。,CD2,既是全,-T,细胞标记物，也是最早期的,T,细胞相关标记物。,95%,人,T,细胞、,50%70%,胸腺细胞和大颗粒淋巴细胞（,LGL/NK,）的表面表达。,CD2,是在,CD1,之前，但在,CD7,之后表达。幼稚和成熟,T,细胞以及,NK,细胞呈,CD2,+,表达。临床上，在淋巴系恶性肿瘤的诊断中，,CD2,是一种有价值的,T,细胞标记物；但某些,T,细胞恶性肿瘤，特别是周围,T,细胞淋巴瘤，可出现异常的,CD2,表达的丧失。此外，某些,AML,病例，,特别是,M3,于病程中也可显示,CD2,+,。,CD3,：,在成熟胸腺细胞、静息和激活的外周血,T,细胞表达，是鉴定,T,细胞重要标志，其胞浆和膜,CD3,是早期普通型,T,细胞白血病的主要分辨标志；已知，胞浆,CD3,可在幼稚,T,细胞（前胸腺细胞）上表达。胸腺细胞表达胞浆和（或）表面膜性,CD3,。而后胸腺淋巴细胞表达表面膜性,CD3,。所有其他造血细胞,CD3,均呈阴性反应。,17,CD4,：,CD4,相关分子是可能是艾滋（,AIDS,）病毒（,HIV, HTLV-,，,LAV,）的细胞受体。,CD4,抗原主要在胸腺细胞、也可在协助者诱导者,T,细胞亚群上表达。约,80%90%,的胸腺细胞以及,55%,65,的外周血,T,细胞呈,CD4,阳性。,CD4,抗原在正常人外周血细胞占,3753%,，包括辅助,/,诱导细胞。,CD8,：,CD8,抗原可在细胞毒性,/,抑制者,T,细胞亚群以及多数胸腺细胞上表达。约,80,90,胸腺细胞以及,35%,45%,外周血,T,细胞呈,CD8,阳性,CD8,抗原表细胞毒和抑制,T,亚群，正常人外周血阳性率,2138%,，在胸腺细胞中的阳性率,80%,。,18,CD4/CD8,比值：,23,：,1,流式：,CD4+CD8=CD3,；,T,细胞标记阳性率,CD2,CD3,CD4+CD8,CD3,阳性细胞包括部分,CD4+,和部分,CD8+,细胞，表现为,CD4-CD8+,或,CD4+CD8-,。如同时标记同一个细胞出现,CD4+CD8+,或,CD4-CD8-,均为异常克隆。 即,CD4/CD8,双标记发现,T,辅助,/,诱导细胞和抑制性,/,细胞毒性,T,细胞的同时表达及丢失，都是,T,细胞淋巴瘤和白血病的重要标志,19,CD5,：,属全,-T,细胞标记物，可在所有的幼稚和成熟,T,细胞上表达，正常异常,T,细胞均为阳性。,CD5,的价值：髓系细胞白血病可伴有,CD5+,， 恶组中,MAC387,、,CD34,、,CD5,、,CD68,阳性，,CD5,阳性支持恶性改变。活化,B,细胞克隆大量异常增高，,CD5,为阳性：,CLL,中的,B,细胞,CD5,为,100%,阳性,；,ML,细胞脾性淋巴瘤（斗篷细胞淋巴瘤）的,CD5+,；,ML,细胞在血中,CD5+,可能降低。,CD7,：,CD7,群体已认定为,T,细胞协同性抗原，其分子可能是,T,细胞受体，属,IgM,重链。已证明,CD7,是,T,细胞个体发育过程中最先出现的分子，是一种全,T,细胞标记物，可在前胸腺、胸腺内和后胸腺,T,细胞的细胞表面膜上表达。此外，,CD7,也可在多数,NK,细胞及少数,AML,、尤其,M4,和,M5,的细胞上表达。,CD5,、,CD7,是,T,细胞中较特异性的标志，也是,髓系白血病的最常见伴随标志。,20,CD43,：,CD43,（白细胞唾液素，,Leu22,）是在胸腺细胞、,T,细胞、粒细胞、单核细胞、,NK,细胞、浆细胞和活化,B,细胞上表达。目前，,Leu22,是免疫组化染色中较有价值的抗,-CD43,单抗，是,T,细胞的主要标记物。,CD45 RA,和,CD45 RO,：,两者均属,CD45,群体的成员。,CD45 RA,抗原主要在自然,T,淋巴细胞上表达；在体外活化后抗原密度即降低。约,50%CD4,+,和,75,CD8,+,的,T,细胞，以及,NK,细胞和,B,细胞上均表达,CD45 RA,。而,D45 RO,则属记忆,T,淋巴细胞上的一种原始群体。它与,CD4,+,细胞的反应较之与,CD8,+,细胞的反应相对更为明显。此外，在单核细胞、巨噬细胞和粒细胞上亦表达,CD45RO,。,T,细胞受体（,TCR,）：,TCR,分子是由,/,或,/,链组成的杂二聚体，可与,CD3,复合物同时表达。多数胸腺细胞和成熟,T,细胞表达,TCR,/,杂二聚体；不足,5,的胸腺细胞和成熟,T,细胞表达,TCR,/,。,21,2,、,B,细胞标记,22,3,、髓细胞组相关抗原,CD13,：,CD13,是一种与锌结合的金属蛋白酶，能催化,NH,2,-,末端氨基酸而使肽链清除。,CD13,属全,-,粒细胞分子，可自原粒细胞至成熟粒细胞各不同发育阶段的所有粒系细胞上表达，约,25,单核细胞亦表达此抗原。正常淋巴细胞、红系细胞和血小板则呈,CD13,阴性。目前，抗,-CD13,单抗已广泛用于,AML MI,M5,亚型的诊断。然而，约,5%,15,ALL,亦可表达,C13,。,CD14,：,CD14,抗原在单核细胞巨噬细胞上呈高密度表达，但粒细胞一巨噬细胞集落形成细胞则,CD14,阴性。幼单核细胞,CD14,阳性或弱阳性；目前，抗,-CD14,抗体常用于诊断,AML,中的,M4,和,M5,亚型；某些,B,淋巴细胞，如斗篷细胞以及外周血,B,细胞也可低密度表达,CD14,，但,T,细胞则呈,CD14,阴性反应。,CD15,：,除原粒细胞以外的所有粒系细胞中均表达,CD15,。多数单核细胞，以及少数巨噬细胞和组织细胞也呈,CD15,+,。红系细胞、巨核细胞和血小板、树突状细胞、,B,细胞、,T,细胞和,N K,细胞均呈,CD15,阴性。然而，活化,T,细胞和,Reed,Sternberg,细胞也可表达,CD15,。,23,CD33,：,在,CFU,GM,、,BFU,E,和,CFU,GEMM,等造血祖细胞上均可表达,CD33,。原粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞以及肥大细胞上也显示,CD33,阳性。处于分化不同阶段的单核细胞亦表达,CD33,。目前，抗,-CD33,单抗已广泛用于各,AML,亚型的诊断中。已证明，约,10 %,20,的前,-B,细胞性,ALL,也可显示,CD33,阳性反应。正常淋巴细胞、红系细胞、巨核细胞和血小板则不表达,CD33,。,CD68,：,处于不同分化阶段的单核系细胞均可表达,CD68,。通常巨噬细胞较之单核细胞,CD68,的表达就更为强烈。粒系前体细胞和肥大细胞亦显示,CD68,阳性反应。现已证明，,CD68,是一种胞浆抗原，明显表现出与溶酶体紧密结合。朗格汉斯细胞和其他树突状细胞一般呈,CD68,阴性。,24,4,、,NK,细胞组相关抗原,CD56,：,90%,以上的,NK,LGL,细胞以及,10%,20%,的外周血淋巴细胞均表达,CD56,。约,5% CD56,+,淋巴细胞复合表达,CD3,、,CD5,和,CD8,。某些,ALL,、,AML,和,MM,亚群亦可呈,CD56,阳性。,CD57,：,在,10,25,的外周血单个核细胞，包括,CD16,阳性,NK,细胞亚群表达,CD57,抗原。约,40%CD16,+,细胞可同时表达,CD57,。,CD94,：,NK,细胞、,/,和,/,T,细胞亚群均表达,CD94,25,5,、血小板相关抗原,在血小板相关,CD,抗原群体中最重要的组分是巨核细胞血小板糖蛋白（,GP,）；其中,CD41,是,GP,b,亚单位，而,CD42,a,，,CD42b,，,CD42c,和,CD42d,，则分别代表,GP,、,GPIba,、,GPIb,和,GPV,。此外，某些,CD,分子代表血小板颗粒膜蛋白，例如,CD63,（属致密颗粒）和,CDl07,（溶酶体相关颗粒），,CD62P,（,P,选择素是巨核细胞血小板以及内皮细胞上表达的黏附分子）。,26,(,四,),白血细胞免疫分型的常用抗体,一线抗体：,CD3,，,10,，,13,，,19,，,68,，,MPO,，,HLA-DR,二线抗体：,CD5,，,7,，,14,，,20,，,34,全套抗体：,CD3,，,5,，,7,，,10,，,13,，,14,，,19,，,20,，,33,，,41,，,68,，,MPO,，,HLA-DR,非淋巴细胞系：,CD13,，,14,，,33,，,34,，,41,，,68,，,MPO,，,HLA-DR,阳性表达,B,细胞系：,CD10,，,19,，,20,，,HLA-DR,阳性表达,T,细胞系：,CD2,，,3,，,4,，,5,，,7,，,8,阳性表达,巨核细胞系：,CD41,，,42,，,HLA-DR,阳性表达,27,五、关于血细胞遗传学检测（,C,）,检测内容,染色体的增减、缺失（,del,）、相互易位（,t,）、重复（,dup,）倒位（,inv,）。,检测方法,G,带、,Q,带、,R,带、,C,带,荧光原位杂交（,FISH,）,比较基因组杂交（,CGH,）,多重,FISH,光谱核型分析,Rx-FISH-,筛选技术,28,G,带（,46,，,XY,，,7q),玻片上 拍照后重排,29,彩色染色体,Rx-FISH,（,inv1,）,30,白血病发病机制研究发现,ALL,、,AML,中,55%,无特异性的染色体改变,45%,有特异性的染色体改变,目前在白血病中较有意义的染色体改变,1.t(9;22),见于大多数,CML,，部分,ALL,2.t(15;17),见于,90%,以上的,APL,3.t(8;21),主要见于,AML-M2b,少见于,M4,、,M5,4.inv(16),见于,AML-M4EO,5.11q23,多见于婴幼儿或药物治疗后的,AML(M5a),、,ALL,及急性混合性白血病,31,六、关于白血病分子生物学检测,方法,三大技术,PCR,技术,克隆技术,DNA,测序技术,32,各血液肿瘤之,MICM,分型特征,33,AML,M0,：,临床以贫血为主要表现，大多白细胞和血小板减少。,形态学：,80%,以上的骨髓增生明显活跃，原始细胞,60%,。胞体大，胞浆无颗粒，可见空泡。形态大多似,L2,，少数似,L1,。,组化：,POX,轻度阳性（,20%,但,90%,，单核细胞,20%,。,组化,同,FAB,。,免疫标记：,同,M1,，但,CD34,，,TdT,阳性极少见。增加,CD15,阳性。,染色体,尚未见特异性改变。,t(6;9)(q23;q34),可见于,M1,、,M2,、,M4,及,MDS-RAEB,中，且是唯一染色体改变，提示预后差。,36,M2b,形态学：,强调出现大量的,异常中性中幼粒细胞为,本病特征。其胞体大，,核质发育明显失衡，核形,可见不规则，染色质细,致、疏松，核仁大而清晰；胞浆量多，呈弥漫橘黄色或嗜硷性，含细小中性颗粒，,Auer,小体可见。原始细胞可,20%,。,组化,可采用,NSE+NaF,抑制试验，做酯酶双染色最有价值，,POX,颗粒分布有一定帮助。,免疫标记,：,CD11b,、,13,、,33,及,MPO,、,HLA-DR,阳性表达，,CD4,、,14,、,36,、,64,及,CD68,也有表达，未见,CD34,和其他髓系阳性表达。,染色体,未发现特异性改变。易见三体,8,（,+8,）。,42,M4EO,形态学：,原粒、早幼粒细胞及原幼单核细胞均,20%,嗜酸性粒细胞比例在,5-30%,。嗜酸性粒细胞的嗜酸性颗粒圆而粗大，浆内混合有大而不规则的嗜硷颗粒。,组化,可采用,NSE+NaF,抑制试验，,嗜酸性粒细胞,NSE,呈阳性反应。,免疫标记：,CD11b,、,13,、,33,及,MPO,、,HLA-DR,阳性表达，,CD4,、,14,、,36,、,64,及,CD68,也有表达，未见,CD34,和其他髓系阳性表达。,染色体,可见,inv(16)(q13;q22) ,预后好,或,t(16;16)(p13;q13),。,43,分子遗传学发现：,16,号染色体倒位,inv(16)(q13;q22),是,M4EO,最常见的 染色体重组形式，变异型有,del(16)(q22),t(16;16)(p13;q22),16q22,同其他非,16,号染色体之间的互换。,倒位的结果造成长臂的,MYH11,基因与短臂的,CBF,基因发生融合，形成,CBF,/,MYH11,融合基因。,44,M5,形态学：,原幼单核细胞均,20%,原粒早幼粒细胞,20%,。,M5a,：,原始单核细胞均,80%,（,NEC,）,M5b,：,原幼单核细胞均,80%,组化染色：,可采用,NSE+NaF,抑制试验,POX,颗粒分布有一定帮助。,免疫标记：,原幼单核细胞均表达,CD33,、,117,，原单不表达,MPO,，幼单可表达,CD11a,11b,、,14,。,50%,以上的单核细胞可表达,CD14,、,36,、,64,、,163,及,CD11c,，未见,CD34,阳性表达。,染色体检查,可见很多,M5a,与,11,号染色体的长臂重组有关，可出现,11q-,t(2;11),t(9;11),t(11;17),t(11,19),等改变。,45,M6,形态学：,骨髓增生活跃，,G/E,倒置；幼红细胞占,50%,以上，且伴明显的畸形变和病态发育， 可见巨幼变，核碎裂，双核、多核、巨型核、母子核等。伴白细胞系统异常时，粒单前体细（原早粒或原幼单细胞）,20%,。,组化,同,FAB,。红系,PAS,呈大颗粒或块状强阳性。粒系或单核细胞系同,M2,或,M5,。,免疫标记：,骨髓中可见,50%,以上,的血型糖蛋白,A,标记阳性的原红细胞。,非红系中可见原始及早幼粒细胞,CD13,和,CD33,阳性,30%,。,染色体,多为正常核型。,46,关于,M6,分型的一种看法,M6a,：红系,50%,，原始细胞（,NEC,）,30%,M6b,：红系,50%,，原始细胞（,NEC,）,30%,，,CD13,、,CD33,阳性表达,47,M7,（,AMKL,）,形态学：,原始巨核细胞,20%,。其胞体大，约,1218,m,，核圆形，染色质疏密不一，核仁,13,个，隐显不一；浆少，嗜硷性，边缘不规，呈毛刺状或管泡状突起。小巨核细胞易见，大血小板可见。,组化,同,FAB,。,PAS,呈大颗粒或块状强阳性。,免疫标记：,CD41,、,CD42,、,CD61,、,VWF,呈阳性表达。,染色体,多为正常核型。,电镜,可见血小板过氧化物酶（,PPO,）位于内质网和核膜。,48,M7a,（不规则幼稚巨核细胞增多型）：,原始巨核细胞,20%,，伴大量,小巨核细胞。,M7b,（小型原巨核细胞增多型）：,原始巨核细胞,20%,，以单个核,巨核细胞,为主,，小巨核细胞不多,见，无法分类。,49,a,MAL,（急性混合细胞白血病）,形态学：,（,1,）白血病细胞来自两个异常克隆（,M+L,）混合表达：,MAL,细胞形态为原始细胞,1,型,+ALL-L1,型细胞。,（,2,）白血病细胞为两个异常克隆协同表达（,M+L,）：,MAL,细胞形态介于原始细胞,2,型和,L2,细胞形态之间。,（,3,）白血病细胞为两个异常克隆混合或协同表达（,T+B,）：,MAL,细胞形态类似,L2,细胞形态之间。,50,免疫标记：,髓细胞特征的泛髓标记阳性，,CD15,、,13,、,33,及,MPO,、,HLA-DR,阳性表达，,CD14,、,CD117,少有表达。,并,B,细胞,CD19,、,20,及,CD10,阳性表达。,并,T,细胞,CD3,、,2,、,5,、,7,阳性表达，,CD7,阳性预后差。,注：未达到积分者诊断为带有淋巴系标记的急性髓系细胞白血病（,Ly,+,AML,）和带有髓系标记的淋巴细胞白血病,(My,+,ALL),。,染色体,无特异性改变。涉及,11,号染色体改变的较多见,。,51,ALL,FAB,：,L1,；,L2,；,L3,；,急性前体淋巴母细胞白血病,52,急性前体淋巴母细胞白血病,1.,免疫分型：,T-ALL,，,B-ALL,B-ALL,CD19,、,20,、,21,、,22,、,24,是,B,细胞白血病和淋巴瘤常用的标记抗体。,CD19,对中国人来说，特异性和敏感性最高。所有,B-ALL,患者均表达,HLA-DR,。,80%,成人和,95%,儿童,B-ALL,表达,CD10,。约,1/4,的患者表达,CD20,、,22,、,24,、,TdT,。,53,T-ALL,CD2,、,CD3,敏感性高；,CD5,、,CD7,是较特异的标记，也是髓系白血病最常见的伴随标记。,54,各型,ALL,（,FAB,分型）免疫标志的特点：,1. ALL-L1,B-ALL/T-ALL=3,：,1,B-ALL,：,CD19,、,CD24,占,98%,，,CD22,占,85%,，,CD20,占,30%,，,CD21,占,1%,。伴髓系表达阳性的占,5%,，以,CD68,最多，,CD33,、,CD13,、,MPO,次之；伴,T,细胞标志的只有,CD7,，占,1%,。,T-ALL,：,CD7,、膜,CD3,占,90%,以上，,CD2,、,CD5,占,7%,。大部分,CD4,、,CD8,为阴性；,CD4+CD8+,占,4%,。伴髓系表达阳性的占,1-2%,，只有,CD68,。,2. ALL-L2,与,ALL-L1,相似。,3. ALL-L3,通常认为是,Burkitt,淋巴瘤。,55,56,近,2/3,患者可见染色体畸变。,t(1;9)(q23;p13),存在于前,B,淋巴细胞白血病，多见于,ALL-L1,型。,t(4;11)(q21;q23),存在于早期,B,前身淋巴细胞白血病，多见于,ALL-L1,或,L2,型。预后很差。,del(6q),普遍存在于,ALL,中。,t(9;22)(q34;q11),与,CML,的,ph,染色体在形态学无法区别，但在分子病理上是有差别的。都累及,BCR/ABL,基因，但在,22q11,的断裂点不同。且,ph,染色体在,CML,的每一个细胞中都存在，而,ALL,中只部分细胞存在（嵌合体）。,ALL,的遗传学改变,57,ALL,的遗传学改变,t(8;14)(q24;q32),、,t(8;22)(q24;q11),、,t(2;8)(p12;q24),这三种易位与,B,细胞肿瘤有关，主要见于,L3,，偶见于,L2,或,L1,型。,t(8;14)(q24;q11),、,t(10,；,14)(q24;q11),、,t(11,；,14)(p13;q11),这三种易位与,T,细胞肿瘤有关。,数量改变,超过,50,条染色体的多倍体占,ALL,的,15%,，具有早期,B,前身 细胞,ALL,免疫学特点和,L1,或,L2,的形态学特点，预后相对 较好。,如近单倍体染色体在,2628,条出现较多的,ALL,患者，具有 普通型,ALL,免疫学特点和,L1,或,L2,的形态学特点，预后相对较差。,58,分子生物学特点,ALL,中最常见的染色体易位引起的融合基因有,BCR/ABL,，,TEL/AML1,、,HRX,相关,。,59,MDS,(,形态学改变同,FAB),60,MDS,61,MDS,62,MDS ALIP,63,遗传学改变,与,MDS,密切相关的染色体改变有,5q-,-5,-7,+8,11q-,11p-,del(11p),del(20q),等,64,MPD,Ph,染色体,t(9;22)(q34;q11), BCR/ABL,阳性的慢性髓细胞白血病,慢性中性粒细胞白血病（,CNL,）,慢性嗜酸性粒细胞白血病,/,高嗜酸性粒细胞综合征（,CEL/HES,）,真性红细胞增多症（,PV,）,慢性原发性骨髓钎维化（伴髓外造血）（,CIMF,）,原发性血小板增多症（,ET,）,不能分类的,MPD,略,65,MPD,1.Ph,染色体,t(9;22)(q34;q11), BCR/ABL,阳性的慢性髓细胞白血病,形态学及组化与,FAB,无特殊变化。,免疫标记：无特殊意义。,CD11b,、,13,、,33,、,117,，,MPO,、,HLA-DR,均,可阳性，,染色体可见特异性改变。,Ph,染色体,t(9;22)(q34;q11), 9,号染色体上的原癌,基因,C-ABL,与,22,号染色体上的,BCR,基,因发生融合，形成,BCR/ABL,融合基因。,疾病进展过程中，,7080%,的患者出现,其他染色体畸变：三体,8,（,+8,），,17,号,长臂等臂染色体,i(17 q),和双,Ph,染色体。,66,CML,染色体,G,带,67,不典型慢性髓细胞白血病,形态学 血象：中性粒细胞增生异,常，可见派胡氏畸形，核染色质,浓集异常或奇特的核分叶。可有,中度贫血，血小板减少者易见。,BM,：粒系造血异常。可见红系,和巨核细胞病态改变。,组化：,NAP,可减低、正常或增高。,免疫标记：无特殊意义。,染色体无特异性,Ph,染色体。,80%,的患者可见三体,8,（,+8,），,+13,，,del(20q),，,del(12p),17,号长臂等臂,染色体,i(17 q).),68,形态学,血象：嗜酸性粒细胞持续增高，绝对值,1.510,9,，分类以成熟嗜酸性粒细胞为主（,60%,），颗粒稀少，含空泡，核分叶过多或过少。,HES,原始细胞少见，原始细胞,2%,时，考虑,CEL,。,BM,：嗜酸性粒细胞异常增多，可见嗜硷、嗜酸双颗粒，含空泡，核分叶过多。,CEL,时原粒比例占,5%19%,。,组化：,PAS,、,NSE,阳性,免疫标记：无特殊意义。,染色体无特异性,Ph,染色体。可见三体,8,（,+8,）。,慢性嗜酸性粒细胞白血病,/,高嗜酸性粒细胞综合征（,CEL/HES,）,69,MDS/MPD,慢性粒,-,单核细胞白血病（,CMML,）,不典型慢性髓细胞白血病,(aCML),幼年型粒,-,单核细胞白血病（,JMML,）,不能分类的,MDS/MPD,70,CMML JMML,71,72,外周,B,淋巴细胞肿瘤,慢性淋巴细胞白血病,/,小淋巴细胞淋巴瘤（,CLL/SLL,）,B,淋巴细胞幼淋巴细胞白血病,(B-PLL),淋巴浆细胞淋巴瘤,脾边缘区,B,细胞淋巴瘤,多毛细胞白血病,(HCL),浆细胞肿瘤,多发性骨髓瘤（,MM,），浆细胞白血病,(PCL),Burkitt,白血病,/,淋巴瘤,73,74,多毛细胞白血病,(HCL),HCL,是一种小,B,淋巴细胞肿瘤。,形态学：典型多毛细胞边缘有大量的伪足和许多细长的毛发样突起；不典型的毛细胞浆多， 无颗粒，呈云雾状灰兰色，边缘不清晰，呈撕扯状。,组化染色：,PAS,阳性，酸性磷酸酶染色阳性，酒石酸试验不抑制。,免疫标志：,B,细胞系列,CD19,、,20,、,22,、,24,阳性，,CD5-,；,CD103,强阳性,电镜：细胞表面可见大量的细而细长的微绒毛，相邻细胞的绒毛可相互连接成网状。,骨髓的阳性率,外周血,20%,，适用于从,MM,巨球蛋白血症或淋巴样浆细胞淋巴瘤转化而来。 外周血浆细胞绝对值,210,9,/L,，适用于原发,PCL,。,2.,PCL,的浆细胞表达,CD38,、,CD138,、,CD20,阳性，,CD56,阴性。,76,多发性骨髓瘤（,M M,）,免疫标志：泛,B,细胞系列,CD19,、,20,、,22,、,24,阳性；,CD10,阳性提示预后差。也可出现,T,细胞系列表达，免,疫标志紊乱是其特征之一。,77,11,例,ALL-L2,患者,6,例,B-ALL,（,5,例,CD10+,）,1,例,T-ALL,1,例,MAL,2,例,ANLL-M5a,1,例,ANLL-M0/M1,关于形态学上类似,ALL-L2,（,POX3%,）的免疫分型,78,谢谢,79,