实训八固定化技术

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实训八 固定化技术,微生物与发酵工艺,1,1.,了解固定化细胞的原理。,2.,掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。,一、实验目的,2,二、实验原理,细胞固定化的方法有多种，如吸附法、载体偶联法和包埋法等。工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性，如在海藻酸钠呈溶液状时，将细胞加入混匀，然后在氯化钙中凝固形成海藻酸钙凝胶，凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用，细胞在空格中可以新陈代谢（固定活细胞,),，也可利用细胞中的酶进行酶促反应,(,固定死细胞,),。,3,海藻酸钠、,0.2 mol/L,氯化钙溶液（,4.44g,氯化钙，蒸馏水,200mL,）、市售活性干酵母粉、青霉素、天平、纱布、细绳、,20mL,注射器、,250mL,烧杯、,250mL,三角瓶、搅拌、电炉、培养箱,2.,沙保培养基 蛋白胨,10g,，葡萄糖,40g,，蒸馏水,1000mL,，,pH,自然，,115,灭菌,20 min,。,三、实验材料,4,1.,称取,1.5g,海藻酸钠于,250mL,烧杯中，加蒸馏水至,100mL,处，加热搅拌溶解。冷却后加入,1g,市售酵母粉，搅拌均匀。,2.,配制,0.2mol/L,氯化钙溶液,200mL,。将海藻酸钠酵母混合液装入,20mL,注射器中，逐滴加入到,0.2mol/L,氯化钙溶液中，搅拌成珠（固定酵母）。,四、实验步骤,5,3.,用蒸馏水洗涤固定酵母,2,次后，加入到灭过菌的,200mL,沙保培养基中（其中加入,1mg,青霉素）。,4.,将固定酵母于,28,静置培养,2,天后观察，可见沙保培养基中有大量的,CO2,气泡产生，嗅气味有酒香；用刀片切开固定酵母，镜检可见大量密集的酵母菌。,四、实验步骤,6,1.,海藻酸钠溶液滴进氯化钙溶液中为什么会凝固？,2.,固定化细胞与游离细胞比较，有什么优点？,五、结果与讨论,7,8,