天然药物化学-第二章-糖及苷类

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,第二章 糖和苷,卫生部规划教材天然药物化学（第五版）,第一节 单糖的立体化学,一、概 述,单糖是多羟基醛或多羟基酮类化合物，也是组成糖类及其衍生物的基本结构单元。表示单糖结构式的方法有三种，即,Fischer,投影式、,Haworth,投影式和优势构象式。,基本概念,：,绝对构型（D/L型）,：习惯上将单糖Fischer 投影式中距羰基最远的那个不对称碳原子的构型定为整个糖分子的绝对构型。其羟基向右的为D型，向左的为L型；而Haworth式中则看那个不对称碳原子上的取代基，向上的为D型，向下的为L型。,相对构型(,/):,单糖成环后新形成的一个不对称碳原子称为端基碳 (anomeric carbon) ，生成一对差向异构体有,/两种构型。从Fischer式看，C1-OH与原C5(六碳糖)或C4(五碳糖)-OH,顺式的为，反式的为。因此， /是C1与C5的相对构型。而在Haworth式中，C6或C5在同侧的为型，异侧的为型。,自然界中的单糖，从三碳糖到八碳糖都存在，但以五碳（戊）糖和六碳（己）糖最为常见和重要，而单糖的衍生物以糖醇和糖醛酸较为常见。,第二节 糖和苷的分类,一、 单糖,二、低聚糖类,二糖：蔗糖,三糖：棉子糖,根据单糖的个数 四糖：水苏糖,五糖：毛蕊糖,还原糖,：槐糖、樱草糖等,根据有无游离的醛或酮基,非还原糖,：蔗糖，大多,数的三、四、五糖等,三、 多聚糖类,多聚糖,，又称多糖，是由10个以上单糖基通过苷键连接而成。,（1）,均多糖,（homosaccharide）:由一种单糖组成的多糖称为均多糖。如葡聚糖。,（2）,杂多糖,(heterosaccharide): 由二种以上单糖组成的多糖称为杂多糖。如葡萄甘露聚糖(glucomannan)。,四、 苷类,苷,，又称配糖体，是糖或糖的衍生物（如氨基糖、糖醛酸等）与另一非糖物质（称为苷元或配基，aglycone or genin）通过糖的,端基碳原子,连接而成的化合物。,第三节 糖的化学性质,一、 氧化反应：,单糖分子中有醛（酮）基、伯醇基、仲醇基和邻二醇基结构单元。一般来说，醛（酮）基最易被氧化，伯醇次之。在控制反应条件的情况下，不同的氧化剂可选择性的氧化某些特定基团。如Ag,、Cu,和溴水可将醛基氧化成羧基，硝酸可使醛糖氧化成糖二酸，,过碘酸,和四醋酸铅可氧化邻二羟基,。,过碘酸氧化反应,特 点,作用缓和、选择性高,：作用于邻二醇、,-氨基醇、-羟基醛(酮)、邻二酮和某些活性次甲基等结构上。,反应可以定量进行,：氧化产物,HIO,3,可以滴定，而且可以得到稳定的最终降解产物，如甲醛、甲酸等。,二、 糠醛形成反应,单糖在浓酸,（4-10N）,加热作用下，失去三分子水，生成具有呋喃环结构的化合物。多糖在矿酸存在下先水解成单糖，再行脱水生成相同的产物。五碳糖生成糠醛，甲基五碳糖生成5-甲基糠醛，六碳糖生成的是5-羟甲糠醛。糠醛及其衍生物可与许多芳胺、酚类缩合成有色物质。,三、 羟基反应,糖的羟基反应包括醚化、酯化和缩醛（酮）化。活性最高的是半缩醛羟基，其次是伯醇基，再次之是,C,2,-OH,。这是因为半缩醛羟基和伯醇羟基处于末端，在空间上较为有利；,C,2,-OH则受羰基诱导效应的,影响，酸性有所增强。,主要有：酸水解、酶解、碱水解、乙酰解、 氧化开裂法等。,一、酸催化水解：反应机理（以葡萄糖为例）,第四节 苷键的裂解,苷键原子质子化 苷键断裂 阳碳离子溶剂化 脱去氢离子,酸水解难易的关键,影响苷键原子质子化的因素,苷键原子周围的电子云密度,（ 电子云密度大，易于接受,质子，水解容易）,空间环境,（有利于接受质子，,水解就容易）,酸水解的规律,1与苷键原子有关 : N苷 O苷 S苷 C苷,(易于接受质子) （无孤对电子）,2 呋喃糖苷（酮糖） 吡喃糖苷（醛糖）,（分子平面性，张力大）,3 五碳糖苷 甲基五碳糖苷 六碳糖苷 七碳糖苷 糖醛酸苷,（空间位阻小） （大）,4 2氨基糖苷 2羟基糖苷 2去氧糖苷 脂肪族苷,（苷元供电性）,难水解的碳苷,苷元结构不太稳定的氧苷（皂苷）,氧化开裂法 Smith降解法;两相酸水解法（样品+酸水+苯/氯仿）,获得真正苷元,-D-葡萄糖苷 过碘酸 二元醛 四氢硼钠 二元醇 稀酸室温 苷元,（O-苷） （氧化邻二醇） （还原） （稳定性差） （温和）,-D-葡萄糖苷（C-苷） 带醛基的苷元,二、乙酰解反应,多糖苷,醋酐+酸（浓硫酸、,高氯酸、氯化锌）,乙酰化单糖、,乙酰化低聚糖,选择性水解,1,6-苷键 1,4-苷键和1,3-苷键 1,2-苷键,依鉴定结果 + 裂解规律,推断多糖苷中糖与糖之间的连接位置,鉴定,薄层色谱,气相色谱,三、碱催化水解：,苷键的缩醛结构（苷键原子的负电性）对稀碱（OH-）稳定, 故苷很少用碱水解，而酯苷、酚苷、烯醇苷、吸电子基团的苷类（苷键原子的正电性）易为碱水解。,四、酶催化水解：,条件温和 高度专属性：,（水、3040） 苷酶 苷 （麦芽糖酶,水解,-葡萄糖苷键）,苷酶 苷 （苦杏仁酶,水解,-葡萄糖苷键 和其他六碳糖的苷键）,获得真正苷元 苷键构型（、）的判断,酶水解的特点及意义,一、 糖的,1,H-NMR性质,一般在氢谱中，糖端基质子信号在4.3-5.5，其余部位的质子信号均在3.2-4.2左右。糖的端基质子信号与其它信号相隔较远，易于辨认。根据糖上端基质子信号的个数和化学位移值可推测糖的个数、糖的种类及糖与糖、糖与苷元的连接位置。,第五节 糖的核磁共振,特别提示,：,（,1,）甘露糖（,C,2,羟基在环的面上,）和鼠李糖,（,优势构象为1C式,）难以用,J,区分端基碳的构型。,（2）呋喃型糖：无论其端基质子和C,2,位质子是,处于反式地位还是顺式地位，其偶合常数变化均,不大（05Hz），无法用端基质子的偶合常数,来判断它们的苷键构型。,（一）,化学位移及偶合常数,二、糖的,13,C-NMR性质,（二） 苷化位移,苷化位移,：糖与苷元成苷后，苷元的,-C、-C和糖的端基碳的化学位移值均发生了改变， 这种改变称为苷化位移,(glycosidation shift，GS)，,苷化位移值与苷元的结构有关，与糖的种类关系不大。,用途,：苷化位移在推测糖与苷元、糖与糖的连接位置、某些苷元被苷化碳的绝对构型和碳氢信号归属上具有重要的作用。,此外，糖与糖通过苷键相连虽然并不称为苷，但苷化位移规律对其同样适用。,苷化位移规律：,（,表 23）,第六节 糖链的结构测定,多糖是生物大分子化合物，像蛋白质一样也具有一、二、三、四级结构。糖和苷的共性是糖链，在含有低聚糖的苷中，糖链的测定占主要地位，苷元的组成种类繁多，本节将重点介绍糖链的测定方法。主要涉及三个问题：,单糖组成；,糖的连接顺序和位置；,苷键构型。,（一）、 纯度测定,多糖属于高分子化合物，其纯度不能用小分子化合物的标准判断，即使是一种多糖纯品，其微观也并不均一。通常所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围的均一组分。其纯度只代表相似链长的平均分布。,一、糖链的结构测定,目前多糖纯度常用的测定方法,超离心法,高压电泳法,凝胶柱色谱法,旋光测定法,其它方法：如HPLC、示差折射法等。,通常要确定一种多糖的均一性，至少要有两种以上的方法才能确定。,（二）、 分子量的测定,单糖、低聚糖及其苷,的分子量测定目前大多用质谱法。如电喷雾质谱（electrospray ionization, ESIMS）及近年来发展起来的基质辅助激光电离质谱或基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDIMS或MALDI-TOF-MS）可测定多糖、蛋白质等高分子化合物的分子量。,（三）、 单糖的鉴定,纸色谱（PC）：分配原理，BAW系统，与对照品共色谱鉴定,薄层色谱（TLC）：硅胶（硼酸溶液或无机盐溶液制 - 增加上样量）,气相色谱（GLC）：水解、制备TMS衍生物（具挥发性），用对照品tR鉴定,超导FT-NMR光谱: 苷中各糖的不同质子的、J 与标准糖数据进行比较鉴定,苷中各糖的不同碳原子的 与标准糖数据进行比较鉴定,（四）、 糖连接位置的测定,将糖链全甲基化，然后水解苷键，用GC鉴定所获得的甲基化单糖，其中游离-OH的部位就是连结位置,全甲基化的单糖即为末端糖。,目前常使用,13,C-NMR 方法，主要是通过归属各碳信号，以确定产生苷化位移的碳。,（五）、 糖链连接顺序的确定,通过,1,H-NMR,谱，观察两糖之间质子的远程偶合而确定其连接顺序,。,（六）、苷键构型的确定,13,C-NMR谱,(1)利用端基碳原子的化学位移判断苷键构型：除D-甘露糖、L-鼠李糖外，绝大多数单糖甲苷，其-型与-型的化学位移相差4ppm.,(2)利用端基碳原子与端基质子的偶合 常数判断苷键构型：,-甲苷 JC1-H1170Hz,-甲苷JC1-H1160Hz 10ppm,1,H-NMR谱：,利用端基质子偶合常数的大小判断苷键构型,依据,相邻碳原子上质子偶合常数的大小与二者之间的立体夹角有关,H-2为键的糖,（葡萄糖、木糖、半乳糖）,H-2为e键的糖,（鼠李糖、甘露糖）,-苷键 -苷键 -苷键 -苷键,J12 = 23.5Hz J12= 69Hz J12= 2 Hz J122 Hz,(Jae、60,O,) （Jaa、180） （Jee、60） （Jae、60,O,）,J12不相等 J12相等,意义,可以用于构型的判断 不能用于构型的判断,-D-葡萄糖苷 -L-鼠李糖苷,J12 = Jae = 23 Hz J12 = Jae = 2 Hz,-D-葡萄糖苷 -L-鼠李糖苷,J12 = Jaa = 69 Hz J12 = Jae = 2 Hz,第七节 糖及苷的提取分离,一、提取,（一）糖类的提取,（二）苷类的提取,苷的存在状态 ：原生苷、次生苷、苷元。,苷与酶共存 提取目的：原生苷,提取原生苷 提取次生苷、苷元,设法抑制酶的活性,（加热、拌碳酸钙、醇）,避免与酸、碱接触,极性溶剂（甲醇、乙醇、,沸水）提取,利用酶的活性,（加水、3040、2448）,加酸水解或碱水解、预发酵等,有机溶剂（醇、苯、氯仿、,石油醚）提取,提取液,浓缩,浓缩液（含大量极性杂质）,二、分离： 色谱方法（为主）,反相硅胶色谱：Rp-18、Rp-8（极性成分适用）,水-甲醇或水-乙腈为流动相,葡聚糖凝胶色谱：SephedexLH-20(有机相适用),不同浓度的乙醇为洗脱剂,