实验血涂片制备WBC分类计数

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验血涂片制备WBC分类计数,要求,初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法，WBC染色后形态学特点及其分类计数方法,流程图：,血液标本的采集,制作,1-,2张血涂片,提取白细胞,充池,WBC计数,瑞氏染色,WBC分类计数,原理：,血标本 形态特点/颜色差异 分类计数,操作：, 涂片, 染色, 镜下观察（低倍镜、油镜）, 计算,涂片,瑞氏染色,血涂片制备,血 涂 片制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大,(,厚,),。慢、小（薄）,一张满意的血涂片应厚薄均匀,头 体 尾鲜明,涂片干燥后用铅笔在血涂片的头,部写上姓名和编号,李四,B,1 2 3,瑞氏染色机理,主要成分：碱性美兰与酸性伊红,物理吸附、化学亲和与电荷作用，复杂的机理使细胞不同部位着色不同,。,瑞氏染色的原理,组成：,酸性染料,伊红,和,碱性染料,美兰,溶于甲醇中,酸性染料与细胞中的碱性物质，如血红蛋白，嗜酸性颗粒结合，使其染成红色,碱性染料与细胞中的酸性物质，如核染色质，嗜碱性颗，血小板等结合，使其染成蓝色。,而中性颗粒可与两者都结合，染成紫红色,【操作】,1、血涂片制备,标记 推片,干燥,2、染色,染液(I液)数滴覆盖整个血膜,滴加等量或稍多的缓冲液(II液),流水,冲洗,干燥,5-10min,血 涂 片 染色,勿冲洗再加,瑞氏染色,液,5-8,滴后将,液和,液充分混匀静置,10,分钟,直接流水冲洗,3-5,分钟,（切勿先倒掉染液）,涂片经水洗干燥后用油镜,分类计数,100,个白细胞,李四,123,涂片干燥后加瑞氏染色,液,5-8,滴覆盖整个血膜,1,分钟,干燥,染色,冲洗,瑞氏染液,盖满血涂片,1min,缓冲液,1-2倍,5-10min,晾干,干燥,3、低倍镜观察,全片浏览WBC分布与染色,4、油镜观察,一定方向顺序分类100个WBC,5、计算,各类细胞百分率,血涂片的观察,低倍镜观察,1.染色情况(满意、偏酸、偏碱）,2. 细胞分布情况,油镜下分类计数：体尾交界处。,油镜分类时应按一定走向，不要重复计数,。,李四,123,外周血镜下WBC,外周血中常见细胞形态,中性粒细胞：,胞体呈圆形，胞质量丰富,胞质中含有大量细小均匀的紫红色中性颗粒,核分为2-5叶，叶间有核丝相连,嗜酸粒细胞,胞体,呈圆形,胞质,中充满粗大、均匀整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒,胞核,常分两叶，形似眼,镜,嗜碱粒细胞,胞体,呈圆形,胞质,中含少量粗大、大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒，常覆盖在核上，,核,分叶常不明显。,单核细胞,胞体呈不规则性或椭圆形,胞质量丰富，常呈毛玻璃样半透明,胞核大，形状不规则，呈椭圆形，肾形，马蹄形或不规则分叶，有时折叠卷曲，染色质细致疏松如网状,淋巴细胞,胞体,呈圆形,胞质,量较少，仅在和的一侧出现，染色呈天蓝色或深蓝色透明,胞浆,中偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒,胞核,圆形，染色质粗糙紧密，偶见凹陷,大淋巴细胞,胞体,圆形/椭圆形,胞质,透明、淡蓝色,胞质,内可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒,胞核,圆/椭圆/肾形,染色质,粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑,白细胞分类计数的临床意义,疾病的诊断与鉴别,白血病筛查,功能性/器质性疾病鉴别,病情观察及疗效判断,判断感染的性质及预后,谢谢,