医学微生物学实验三

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医学微生物学实验三,1,、细菌的人工培养（讲授）,2,、细菌的培养方法：,固体培养基接种法（自做）；,半固体、液体培养基接种法（示教）,3,、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）,4,、细菌的形态观察,自阅片：,甲型链球菌、结核杆菌,示教片：,淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、,炭疽杆菌,实验内容,第四节 细菌的人工培养,p31,一、,培养基,（culture medium）：,是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖,使用的,混合营养物,制品,。,常用培养基的种类,按营养组成和用途分,厌氧培养基,基础培养基,增菌培养基,选择培养基,鉴别培养基,二、细菌在培养基中的生长情况,据物理状态分,1,、液体培养基：,均匀混浊,、,沉淀生长,、,表面生长,（菌膜）；,多用于增菌,均匀混浊,对照,沉淀生长,2,、固体培养基：,含,1.5%,琼脂,用于分离培养,菌落,：单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见,的细菌集团。,纯培养,：,挑取一个菌落，移种到另一培养,基中，生长出来的细菌均为纯,种，称为纯培养。,菌落特征,大小、形状、颜色、气味、透明度、光滑或粗糙、湿润或干燥、隆起或扁平、边缘整齐与否、是否溶血等,有助于细菌鉴定,菌落（,S,型）,菌苔,菌落（,R,型）,光滑型,(S,型,),粗造型,(R,型,),粘液型,(M,型,),3,、半固体培养基：,含,0.3%0.5%,琼脂,鞭毛菌,混浊生长,（沿穿刺线呈云雾状,/,羽毛状）,无鞭毛菌,沿穿刺线呈线状生长,用于,检测细菌的动力,和,保存菌种,斜面划线示意图,4,、斜面培养基接种法,应用：短期保存菌种,三、,人工培养细菌的用途,在医学中的应用,1.,感染性疾病的病原学诊断,：,明确病因，指导用,药,2.,细菌学的研究,：,细菌遗传、变异、耐药性,3.,生物制品的制备,：,疫苗、类毒素、抗毒素,在工农业生产中的应用,（抗生素、维生素、酶制剂等）,在基因工程中的应用,（,基因工程菌乙肝疫苗）,进入实验内容讲授,1,、固体培养基,(,平板,),接种法,分区划线法,连续划线法,第一区划线,灭菌接种环,第二区划线,灭菌接种环,第三区划线,灭菌接种环,灭菌接种环，取菌准备,分区划线法,原划线,标本：混合菌液,分组：,1,人一个固体平板,连续划线法,菌落示意图,细菌在固体培养基中的生长现象,细菌在固体培养基中的生长现象,菌 落,菌落特征,：大小、形状、颜色、气味、透明度、表面光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否、溶血性等。, 菌落类型：,S,型、,R,型、,M,型菌落。,菌 苔,：,指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。,菌落（,S,型）,菌苔,菌落（,R,型）,光滑型,(S,型,),粗造型,(R,型,),粘液型,(M,型,),注意事项,1,、无菌操作,2,、密而不重叠,3,、勿划破琼脂,4,、做好标记，,第二天观察结果,2,、葡萄球菌培养（示教）,营养要求不高，普通培养基生长良好,菌 落,：,S,型菌落，金黄色、表皮、腐生葡萄球菌各自形成,金黄色、白色、柠檬色,-,脂溶性色素,血平板：,金黄色葡萄球菌形成的,-,溶血环,金黄色色素,白色色素,3,、链球菌培养（示教）,血平板上的菌落：,甲型溶血性链球菌形成草绿色溶血现象，乙型溶血性链球菌形成透明的完全溶血现象，丙型链球菌无溶血现象。,甲链,溶血,草绿色溶血,乙链,溶血,丙链,不溶血,4,、常见致病菌的形态与染色性,甲型溶血性链球菌,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,自阅片之一,结核分枝杆菌,取材：痰涂片,染色法：抗酸染色,放大倍数：,10X100,自阅片之二,菌体染成,红色,，细长略微弯曲杆菌，单个或分枝状排列；,（非抗酸菌及细胞染成蓝色）,淋病奈瑟菌,示教片之一,取材：泌尿道脓性分泌物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,淋病奈瑟菌,中性粒细胞分叶核,淋球菌染成,红色,/G,-,，肾形或豆形，成双排列,肉毒梭菌,示教片之二,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,G+,粗短杆菌，芽胞呈椭圆形，比菌体粗，次极端，细菌呈,汤匙状或网球拍状,产气荚膜梭菌,示教片之三,取材：小鼠腹腔渗出液,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,G+,粗大杆菌，两端几乎平切，在被感染得人或动物体内形成,明显的荚膜,炭疽杆菌,示教片之四,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,G+,粗大杆菌，有氧条件下形成,椭圆形芽胞,，位于菌体中央,白喉棒状杆菌,取材：纯培养物,染色法：美蓝染色,放大倍数：,10X100,取材：纯培养物,染色法：,Neisser,染色,放大倍数：,10X100,示教片之五,菌体细长弯曲的杆菌，粗细不一，常一端或两端膨大呈棒状；排列不规则，呈栅栏状、,V,字形或,L,字形。,异染颗粒,1,、细菌的人工培养（讲授）,2,、细菌的培养方法：,固体培养基接种法（自做）；,半固体、液体培养基接种法（示教）,3,、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）,4,、细菌的形态观察,自阅片：甲型链球菌、结核杆菌,示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、,炭疽杆菌,第,2,页：,实验名称：细菌平板划线分离法,（记录实验结果绘一简图并描述平板上的,菌落特征,）,第,3,页 ：,实验名称：,细菌的形态观察（绘图）,甲型链球菌、结核杆菌、淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、,炭疽杆菌,实验内容,第,1,页：,实验名称：细菌培养及形态观察,甲型溶血性链球菌,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,结核分枝杆菌,取材：痰涂片,染色法：抗酸染色,放大倍数：,10X100,淋病奈瑟菌,取材：泌尿道脓性分泌物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,肉毒梭菌,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,产气荚膜梭菌,取材：小鼠腹腔渗出液,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,炭疽杆菌,取材：纯培养物,染色法：革兰染色,放大倍数：,10X100,白喉棒状杆菌,取材：纯培养物,染色法：,Neisser,染色,放大倍数：,10X100,