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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,技术工程师 崔伟,1,一、戊型肝炎相关概念及特点,戊型肝炎由戊型肝炎病毒（,HEV,）引起，,HEV,是单股正链,RNA,病毒,属于嗜肝病毒科,.,约占临床散发型肝炎的,15,20%,，戊肝在病毒性肝炎中病死率最高，孕妇病死率可高达,20%,。,传播途径,:,主要经胃肠道传播，常通过水源和食源暴发或流行,丙球蛋白免疫无效,临床症状,:,厌食、乏力、恶心、巩膜黄染、右上腹部不适、呕吐、肝脏肿大等,.,其临床症状与甲肝类似。,2,戊肝不同临床阶段的,HEV,感染指标,临床阶段,ALT,RNA,IgM,IgG,戊肝急性期,+,+,+,+,近期隐性感染,-,+,+,+,戊肝恢复期,-,-,+,+,既往感染,-,-,-,+,3,HEV-,Ig,M,是良好的近期感染标志物,戊肝病程中各感染指标的变化过程清楚显示，,HEV-,IgM,抗体是一个良好的戊肝病毒近期感染指标,。,4,二,.,优良的诊断试剂是检测结果准确可靠的保证,优质的抗原是检测试剂的关键！,5,关键,:,构象抗原,现有试剂以线性表位为主的重组蛋白或合成肽作为抗原，未能模拟出,HEV,最主要的构象依赖性抗原表位。,优质的抗原是检测试剂的关键!,6,2.1 HEV,基因,ORF1,主要编码与病毒,RNA,复制有关的非结构蛋白，,ORF2,为,HEV,的主要结构基因编码区,编码病毒衣壳蛋白，,ORF3,基因编码产物,pORF3,为磷蛋白。,7,试剂的关键,E2,抗原的发现及其特征,1998,年，用大肠杆菌表达,HEV,结构蛋白,ORF2,的一个片段,(E2),时发现，该蛋白可以自发形成二聚体，并且二聚体蛋白对戊肝恢复期血清有极强的反应性，这一反应性随着二聚体的解聚而消失 。,Western Blot,(See: J Med Virol, 2001,64:125-132),单体,二聚体,SDS-PAGE,8,E2,抗原反应性：,对戊肝急性期血清和多年后的恢复期血清有明显的反应，恢复期血清的反应性集中在二聚体上。,急性期血清,(10,例,),恢复期血清,(8,例,),二聚体,E2,单 体,E2,9,2.2,具有动物模型的诊断试剂,(,恒河猴,HEV,感染模型,),感染时间（周）,F9,HEV,感染、发病与抗体发生过程,10,感染时间（周）,N2,HEV,感染、发病与抗体发生过程,11,感染时间（周）,F4,HEV,感染、发病与抗体发生过程,12,献血员中,HEV,检测：,E2-IgM(+),、,E2-IgG(-),、,GL-IgM,和,IgG,均,(-),的献血员,206,血清,HEV RNA,基因分型,I,型,IV,型,IV,型,II,型,III,型,13,206,血清可感染猴子,14,52,78,构象性表位,线性表位,猴,HEV,感染过程中各项指标消长分析,15,三,.HEV ELISA,试剂 与 临床急性肝炎诊断,16,3.1,人们对戊型肝炎的重视逐渐增强,新的,中华人民共和国食品安全法实施条例,实施条例对食品安全法中较为原则的制度作了具体规定 ：,食品从业者应按章检查戊型病毒型肝炎和甲型病毒性肝炎，同时取消乙肝的检测。,员工入职新生入校等健康体检也取消了乙肝的检测项目。,17,食品从业人员的健康体检,新试行条例规定食品从业人员的健康体检取消了HBV的检测项目，新增了HAV-M和HEV-M两种检测项目。IgM抗体的检测目的主要是避免近期感染对食品安全的威胁。（包括显性感染和隐性感染）,颁布了戊型病毒性肝炎诊疗规范，用以明确HEV的诊断及治疗。人们对戊型肝炎的重视逐渐增强。,18,3.2,万泰,HEV,试剂与其他国内外厂家的试剂比较,19,3.2.1,灵敏度和特异度综合评价,-,复旦大学公共卫生学院,指标,正常人群,急性戊肝,约登指数,(%),阴性数,/,检测数,特异度,（,%,）,阳性数,/,检测数,灵敏度,（,%,）,WT IgM,273/273,100.0,47/48,97.9,97.9,GL IgM,264/273,96.7,35/48,72.9,69.6,GL IgG,233/273,85.4,45/48,93.8,79.6,20,临床非甲非乙急性肝炎中,HEV IgM,检出,E2 IgM,检出率,=,100%,GL IgM,检出率,=,50.8%,(,香港卫生署公共卫生实验中心,),21,E2 IgM,与,GL IgM,在急性肝炎中检出符合情况,GL IgM,E2 IgM,合计,70,65,135,29,361,390,合计,99,426,525,其中,58,例,(89%),抗,HAV IgM,阳性,(,复旦大学公共卫生学院,),22,临床阴转血清的评价,新疆戊肝感染,10,年后血清抗,HEV,抗体检出,1992,年全国流调新疆和田,HE,暴发后,34,年,HEV IgG,感染率为,11.79%(Genelabs),地方病通报,2002,，,17,（,3,）：,14,23,两种试剂对,WHO,戊肝标准血清的检测比较,24,3.2.2,实验室数据,PCR+,标本总数,万泰检出,SKH,22,份,22,份,20,份（,1,份阴性灰区）,阳性,S/C.O,均,8.45,6.89,25,表,1,：两种试剂对,PCR,阳性的检验,26,3.2.3,实验室数据,PCR+,标本总数,万泰检出,BGD,检出,16,份,15,份,（,1,份阴性灰）,5,份,（,3,份阴性灰区）,检出百分率,93.8%,31.3%,27,标本编号,万泰,A,值（,C.O=0.266,）,BGD A,值（,C.O=0.150,）,PCR,背景,+ /,P3,1.042,0.021,+,WX1,1.095,0.131,+,WX11,1.962,0.441,+,WX12,1.503,0.387,+,WX13,1.642,0.108,+,WX14,1.939,0.523,+,WX15,0.127,0.011,+,WX17,0.891,0.026,+,WX18,0.409,0.489,+,WX19,0.748,0.126,+,WX22,1.093,0.020,+,WX24,0.991,0.076,+,WX30,1.189,0.016,+,WX32,2.987,0.045,+,WX62,0.804,0.027,+,WX64,0.457,0.192,+,M26,1.004,1.084,/,M28,0.152,0.009,/,M29,2.004,0.439,/,M30,2.045,0.897,/,M31,1.791,0.347,/,M41,0.015,0.012,/,P1,1.712,0.311,/,表,2,：两种试剂对,PCR,阳性的检验,28,HEV,的诊断指标,(,依据戊型病毒性肝炎诊疗规范）,HEV-M,抗体阳性,HEV-G,抗体,阳转,或者浓度四倍以上升高,HEV PCR,阳性,以上标准符合其一即可作为戊肝诊断的指标，同时满足两项即可确诊。通常,HEV-M,阳性且,HEV-G,阳性即可诊断,（个别情况需动态观察）,。,*中华临床感染病杂志年月第卷第期,29,科学为本，关注健康,Thank you！,30,
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