专科-血液常用检查二-2课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,血液常用检查（二）,主要内容,白细胞计数,白细胞分类计数,白细胞形态学检查,血小板计数,血小板形态检查,白细胞计数,(white blood cell count,，,WBC),：,指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。,检测原理,（显微镜计数法）,用白细胞计数稀释液,(,稀乙酸,),，,将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞和固定白细胞,充入改良牛鲍,(Neubauer),计数板，,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算求得每升血液中各种白细胞的总数。,一、白细胞计数,【,质量保证,】,1,计数误差,(1),技术误差：规范、熟练的操作，仪器的校正、,试剂的标准化和操作人责任心。,1),器材：清洁、干燥，校准，合格试剂。,2),标本要求：血液分析仪检测的标本要求及质量保证见表,225,。,3),加盖玻片影响：,WHO,推荐采用“推式”法，此法较“盖式”法更能保证充液体积的高度为,0.10mm,。,4),充池影响：,充池前充分混匀白细胞悬液，避免气泡。,充池应避免充液过多、过少、断续，避免气泡及充液后移动盖玻片。,技术误差,5),计数原则：计数压线细胞时，,数上不数下,数左不数右。,6),计数室内细胞分布要均匀：白细胞总数在正常范围内时，,各大方格间的细胞数不得相差,8,个以上。,2,次重复计数误差不超过,l0,。,7),有核红细胞影响：外周血出现有核红细胞，可使白细胞计数结果偏高，须校正。,技术误差,(2),固有误差：主要是指计数域误差,(field error),。,是由于每次充池后血细胞在计数室内分布不同 计数域误差变异系数,(CV),可,随计数的细胞数量增多而减小。,白细胞数量太少时,(15X109,L),稀释,固有误差还应包括计数室和吸管的使用次数，即计数池误差,(chambererror),和吸管误差,计数误差,3),生理状态影响：,运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒等常出现一过性白细胞增高；一日之内白细胞数最高值与最低值可相差,1,倍。另外，吸烟者白细胞总数平均较非吸烟者高,30,。,最好在固定检查时间,。,计数误差,2,质量考核与评价,(1),经验控制,(1),与红细胞数相对比较：正常范围下，红细胞数白细胞数约为,500,：,1,。,(2),判断白细胞计数与显微镜白细胞分布密度一致性,(,表,2,4),：由于手工制备血涂片难以标准化，因此也只能粗略估计，有矛盾者再复查。,表,24,血涂片上,WBC,密度与,WBC,数量关系,血涂片上,WBC,数：,HP WBC(10,9,L),24 4 7,4 6 79,6 10 10 12,10 12 13 18,(2).,两差比值评价法,(3).,双份计数标准差评价法,2,质量考核与评价,成人：,(4,10) 10,9,L,新生儿：,(15,20) 10,9,L,6,月,2,岁：,( 11,12) 10,9,L,参考值,1010,9,L,称白细胞增多,(1eukocytosis),，,410,9,L,称白细胞减低,(1eukopenia),。,白细胞数在生理或病理情况下均可有变异。,由于中性粒细胞占白细胞总数的,50,70,，其增高和减低直接影响白细胞总数的变化，,中性粒细胞增减的意义与白细胞总数的增减的意义基本上是一致的。,有时两者的数量关系也有不一致的情况，要具体情况具体分析。,临床意义,白细胞分类计数,(differential count,，,DC),是将血液制成涂片，经染色后在油镜下观察白细胞的形态并进行分类，求得各种类型白细胞的比值,(,百分率,),。,分析白细胞分类变化意义时，必须计算各类型白细胞的绝对值,(,各类型白细胞绝对值白细胞计数值,白细胞分类计数百分率,),，才有诊断参考价值。,白细胞分类计数的方法有两种：,一种是传统显微镜分类法，,一种是血液分析仪分类计数法。,二、白细胞分类计数,检测原理, (,显微镜分类法,),将血液涂成薄膜，,经,Wright,染色后，,于显微镜下，按白细胞形态学特征逐个分别计数，得出各种白细胞百分率。,结合白细胞计数结果，可间接求出每升血液中各种白细胞的绝对值。,质量控制,分析前质量控制,分析中质量控制,血涂片制备,染色,镜检部位,镜检白细胞数量,分析后质量控制,成人白细胞分类参考值,百分率,(,),绝对值,(10,9,L),中性杆状核粒细胞,1 5 0.04 0.5,中性分叶核粒细胞,50 70 2 7,嗜酸性粒细胞,0.5 5 0.05 0.5,嗜碱性粒细胞,0 1 0 1,淋巴细胞,20 40 0.8 4,单核细胞,3 8 0.12 0.8,参考值,正常情况下，,中性杆状核粒细胞占,1,一,5,，,中性分叶核粒细胞占,50,一,70,，,2,叶核细胞为,10,30,，,3,叶核为,40,50,，,4,叶核为,10,一,20,，,5,叶核小于,3,。,正常时，外周血中性粒细胞核以,3,叶的居多，杆状核与分叶核之间的正常比值为,l,：,13,。,参考值,1.,中性粒细胞增多,白细胞总数与中性粒细胞,(neutrophil,，,N),白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的定义见表,.,在外周血中，由于中性粒细胞占白细胞总数的,50,一,70,，临床意义基本一致。,淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。因此，还应具体分析。,临床意义,1),中性粒细胞,生理性增多：,常不伴有白细胞质量的改变。,年龄：,临床意义,1),生理性增多：,日间变化：一日之间最高值与最低值之间可相差,1,倍。,运动、疼痛和情绪的影响：如剧烈运动可使短时间内白细胞高达,35X10,9,L,，以中性粒细胞为主。,当,运动结束后迅即恢复原有水平。,妊娠与分娩：分娩后,2,5d,内恢复正常。,其他：吸烟者,白细胞的生理波动很大，,30%,以内波动多无意义，,只有通过定时和反复观察才有意义。,2),病理性增多：,外周血白细胞,1,0X10,9,L,反应性增多,，可见于：,A,、 急性感染或炎症,：为引起白细胞总数和中性粒细胞增多最常见的原因。,球菌、杆菌、真菌、放线菌、病毒、,立克次体、螺旋体、寄生虫等。,增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及,机体的反应性等有关,B,、类白血病反应,：指机体在有明确病因的刺激下，出现白细胞数中度增高,(50Xl0,9,L),，多以成熟中性粒细胞增多为主，原始、早幼粒细胞增多少见,(10,),，常伴较明显的中性粒细胞中毒性改变，其他细胞均无明显变化。,C.,广泛组织损伤或坏死,：,严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤以及血管栓塞,(,如心肌梗死、肺梗死,),所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者，在,12,36h,内常见白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。,有无术后感染，,与心绞痛鉴别。,D,、 急性溶血,：缺氧及分解产物刺激,E,、 急性失血,：,消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等，白细胞总数常在,1,2h,内迅速增高，可达,(10,20)X10,9,L,，,但此时的红细胞数和血红蛋白量仍可暂时保持正常范围，待组织间液吸收回血液或补充循环血容量后，才出现红细胞和血红蛋白减低。,早期诊断内出血的参考指标。,F,、急性中毒：,a,、外源性中毒,：化学物质或药物如汞、铅、安眠药急性中毒，生物毒素如昆虫毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。,b,、内源性中毒,：如尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象等。,G,、恶性肿瘤：,非造血系统恶性肿瘤可出现持续性白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。,其机制可能为：,肿瘤坏死分解产物刺激,肿瘤细胞,(,如肝癌、胃癌等,),促粒细胞生成因子。,恶性肿瘤骨髓转移，破坏骨髓调控作用等,H,、其他原因,：,见于类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、痛风及严重缺氧,应用皮质激,素、肾上腺素、氯化锂等。,异常增生性增多,A,、 白血病,：,B,、骨髓增殖性疾病,：,包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化症,(,也可包括慢性粒细胞白血病,),等。,本组疾病均系多能干细胞的病变引起，具有潜在演变为急性白血病,的趋势。,其特点为除了一种血细胞成分的主要增多外，常伴有其他一种或两种血细胞的增生，故常有中性粒细胞增多，白细胞数常在,(10,30)X10,9,L,。,(2),中性粒细胞减低,(neutropenia),：,白细胞减低主要是中性粒细胞减低。,粒细胞减低症,(granulocytopenia),：,中性粒细胞绝对值成人,2.0X10,9,L,儿童,1.5X10,9,L,粒细胞缺乏症,(agranulocytosis),：,外周血白细胞,2.0X10,9,L,中性粒细胞绝对值,0.0510,9,L),的一种征象,(2),嗜碱性粒细胞减少,(basopenia),：,多无临床意义。,减少可见于过敏性休克、促肾上腺皮质激素或糖皮质激素应用过量以及应激反应等。,3淋巴细胞(lymphocyte，L),(1)淋巴细胞增多(lymphocytosis)：,指外周血淋巴细胞绝对值增高,成人,4.010,9,L；,儿童：4岁以上,7.210,9,L、,4岁以下,9.010,9,L。,(1),淋巴细胞增多：,(2),淋巴细胞减少,(1ymphopenia),：,指外周血淋巴细胞绝对值减低,(,成人,5%),表示感染程度较轻,机体抵抗力较强。,中度左移,：白细胞总数及中性粒细胞百分数均增高，杆状核粒细胞,10%,并伴有少数晚幼粒细胞及中毒性改变,表示有严重感染。,重度左移,：白细胞总数及中性粒细胞百分数明显增高，杆状核粒细胞,25%,并出现更幼稚的粒细胞，常见于粒细胞白血病或中性粒细胞型类白血病。,3,中性粒细胞的核象变化,(nuclear shift),(2),核右移,(shifttotheright),：,外周血中性分叶核粒细胞增多，并且,5,叶核以上的中性粒细胞,3,时称为核右移。核右移严重者常伴白细胞总数减少，反映造血功能衰退，与缺乏造血 物质、,DNA,合成障碍和骨髓造血功能减退有关。,异型淋巴细胞：在病毒或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。,周围血中的异型淋巴细胞主要是,T,淋巴,异型淋巴细胞,I,型,(,空泡型，浆细胞型,),：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状，常偏位。染色质粗糙，呈粗网状或小块状，排列不规则。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状。,型,(,不规则型，单核细胞型,),：胞体较大，外形常不规则，可有多数伪足。核形状及结构与,I,型相同或更不规则，染色质较粗糙致密。胞质丰富，染淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深，一般无空泡，可有少数嗜天青颗粒。,型,(,幼稚型,),：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见,1,2,个核仁。胞质深蓝色，可有少数空泡。,卫星核淋巴细胞,理化因素对细胞的损伤，致畸、致突变的客观指标之一,巨多分叶核中性粒细胞,：细胞直径达,16,25m,，核分叶常在,5,叶以上，甚至在,10,叶以上，核染色质疏松。常见于巨幼细胞贫血、抗代谢药物治疗后。,中性粒细胞的核形态异常,异常粒细胞形态,棒状小体,：在血涂片中，白细胞胞质中出现呈紫红色细杆状物质，长约,1,6m,，,1,条或数条不定，称为棒状小体。,早幼粒细胞白血病,(M,3,型,) ,急性单核细胞白血病均可出现。而在急性淋巴细胞白血病中则不出现。,2,、棒状小体,(Auer body),：,在,Wright,或,Giemsa,染色的血涂片中，白细胞胞质中出现呈紫红色细杆状物质，长约,1,6m,，,1,条或数条不定，称为棒状小体。,这种棒状小体只出现在白血病细胞中，故见到棒状小体就可确诊为急性白血病,。,急性粒细胞白血病呈,粗短,棒状，,急性单核细胞白血病呈,细而长,的棒状小体。,急性淋巴细胞白血病中,不出现,棒状小体。,异常粒细胞形态,血小板假性减低：如血小板冷凝集、异常蛋白血症、巨血小板、血小板卫星现象、高脂血症、乙二胺四乙酸诱导的血小板聚集。,假性血小板增高：可来自白细胞和红细胞的碎片、小红细胞，冷球蛋白血症、疟疾等。,正常血小板具有异质性 ：正常血小板大小、形态之间变异较大。,一、血小板计数,血小板计数,(plateletcount,，,PLT),是测定全血中血小板的浓度，是止血凝血检查最常用的试验之一。,血小板功能：维持血管内皮完整性和黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩。,检测原理,PLT,的测定原理与血液红,(,白,),细胞计数相似,(,见表,2-54),。,第三节 血小板检查,检测原理,普通光学显微镜直接计数法的方法学评价,计数方法,优点,缺点,备注,草酸铵溶血法,对红细胞破坏力强，血小板形态清楚,为常规计数方法，草酸铵为首选稀释液,复方尿素溶血法,稀释后血小板胀大易辨认,尿素易分解，不能完全破坏红细胞,高铁氰化钾溶血法,试剂稳定易于长期保存,不能完全破坏红细胞,复方碘稀释法,红细胞未破坏及试剂易细菌生长，干扰计数,已被淘汰,血小板体积小，其形态的识别，特别容易受其他杂物的干扰。,血小板在体外易于粘附、聚集和变性破坏。,血小板计数的质量控制原则是：避免血小板的激活和破坏，避免杂物污染。,质量控制,1.,必须注意整个实验前、中、后各个环节,2.,由经验丰富的检验人员复查核对血小板 计数结果,3.,排除非技术因素的干扰,方法学评价,3,相差显微镜直接计数法,易于识别，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。,4,普通光学显微镜直接计数法,草酸铵稀释液：破坏红细胞能力强，血小板形态清晰易辨，为首选稀释液法；,复方尿素稀释液：使血小板胀大后易辨认，但尿素易分解，不能完全破坏红细胞；,高铁氰化钾稀释液：不能完全破坏红细胞 。,参考值,(100,300)X10,9,L,。,临床意义,生理性变化,午后略高于早晨；春季较冬季低；,平原居民较高原居民低；,月经前减低，月经后增高；,妊娠中晚期增高，分娩后减低；,运动、饱餐后增高，休息后恢复；,静脉血血小板计数比毛细血管高,10,病理性变化,：,血小板减低是引起出血常见原因。,血小板在,(20,50)X,10,9,L,时可，可有轻度出血或手术后出血；,低于,20X10,9,L,，可有较严重的出血；,低于,5X10,9,L,时，可导致严重出血。,血小板计数超过,400X10,9,L,为血小板增多。,病理性血小板减少和增多的原因及意义见表,2,55,。,二、血小板形态检查,(,一,),正常血小板形态,正常血小板,(normalplatelet),呈两面微凸的圆盘状，直径约,1,5,3pm,，新生血小板体积大，成熟者体积小。在血涂片上往往散在或成簇分布，其形态多数为圆形、椭圆形或略欠规则；胞质呈淡蓝或淡红色，中心部位有细小、分布均匀而相聚或分散于胞质中的的紫红色颗粒。,正常血小板形态,(,二,),异常血小板形态,1,、大小异常,大血小板：常为,7-20m,胞浆中嗜天青颗粒细小或融合为大颗粒,主要见于特发性血小板减少性紫癜,粒细胞白血病、血小板无力症。,小血小板：直径小于,1.5m,主要见于缺铁性贫血、再生障碍性贫血等。,2,形态异常,血小板可以出现杆状、逗点状、蝌蚪状、蛇形和丝状突起等不规则和畸形血小板，正常人偶见。影响血小板形状改变因素很多，各种形态异常又无特异性，因此不规则和畸形的血小板比值超过,10,时才有临床意义。,(1),血小板颗粒减少：,血小板胞质内嗜天青颗粒减少或无颗粒，胞质灰蓝或淡蓝色。见于骨髓增生或骨髓增生异常综合征。血小板颗粒减少也可偶见于,EDTA,抗凝血血涂片中。,(2),血小板卫星现象：,血小板黏附、围绕于中性粒细胞,(,或偶尔黏附于单核细胞,),的现象,(,见下图,),有时可见血小板吞噬现象。血小板卫星现象是血液分析仪血小板计数假性减少的原因之一,(,血小板被误计为白细胞数,),。,血小板卫星现象,(3),血小板,“,黏附,”,红细胞,：,在镜下血涂片上，可见血小板,“,黏附,”,于红细胞表面，形成血小板位于红细胞之内的假形态，可被错认为是红细胞内的,“,包涵体,”,或,“,寄生虫,”,。,区别：血小板周缘多带清晰的光晕，而红细胞包涵体在多数情况下无此种特征。,3,聚集性和分布异常,血小板聚集、分布状态间接反映其功能。,血小板增多，血小板可呈大片聚集,(,见下图,),。,血小板减少，血小板聚集成团情况明显减少。,血小板功能异常，血小板无力症时血小板无聚集功能，且散在分布，不出现聚集成团的现象。,血小板聚集,1,白细胞计数的临床意义及方法学评价,?,2,白细胞计数时标本采集的质量保证,?,3,如何减少白细胞计数的固有误差,?,4,如何校正有核红细胞对白细胞计数的影响,?,5,白细胞计数的质量考核与评价的方法有哪,些,?,6.,白细胞分类计数的临床意义？,思考题,参考书籍,检验结果临床解读,（胡成进主编，人民军医出版社，,2006,年）,实用检验医学实验技巧,（王金良主编，天津科学出版社，,2006,年）,临床实验诊断学,（,孙荣武、王鸿利主编，上海科技出版社，,2001,年）,Thank you,！,