圆环-Pcv2的认识教材课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,圆环病毒病（,PCVAD,）与疫苗,圆环病毒对猪场的危害,控制圆环病毒危害的策略,当今疫苗的现状,圆健的优势,投入产出,病毒特性,圆环病毒科圆环病毒属，,环状、单股DNA病毒；,PCV分为两类(Segales, 2005)；,PCV-1组,1767bp (致病力弱,不出现症状)；,PCV-2组,1768bp；(欧洲株,致病力强,有症状),现美国己研究检测方法,能区分PCV-2强、弱毒株.,PCV2 是最小的自由复制的病毒 (Krakowka, 2006),对外界抵抗力强,在PH3的酸性环境中不易灭活,70可存活15分钟。,Electron micrograph of PCV2 virions,Courtesy of Dr. John Ellis, WCVM, S,askatoon, Canada,PCV,基因分型与致病关系,PCV,PCV1,PCV2,PCV2b-,强,PCV2a-,弱,PCV2b,致病性明显增强,Grau-Roma,2008,PCV2,感染发病原因,PCV2,感染,其他因素,猪舍温度不适,通风不良,不同日龄混群,免疫应激,其它主要病原体的混合感染,与,PCV-2,感染相关的疾病,断奶仔猪多系统消耗综合征（,PMWS,）,猪皮炎肾病综合征（,PDNS,）,猪呼吸道病综合征（,PRDC,）,繁殖障碍综合症,先天性震颤（,CT,）及中枢神经系统性疾病,PCV-2,相关性肠炎,PMWS,PMWS,最常见于,3,12,周龄，猪群患病率为,3,50%,，死亡率为,8,35%,。,临床症状：消瘦、呼吸困难、皮肤苍白、体表淋巴结肿大、黄疸和腹泻。,剖检病变：全身淋巴结尤其是腹股沟淋巴结肿大，肺肿胀，肾脏水肿、苍白，被膜下有白色坏死灶。,显微病变：淋巴细胞减少，大量组织细胞及多核句细胞浸润（,Clark,，,1997,；,Rosell,等，,1999,）。,ISU,圆环病毒,-2,型有关的,PMWS,发生前常常观察到圆环病病毒,-2,型有关的腹泻,褐色,-,红色,-,黑色的腹泻,ISU,在欧洲和加拿大，常常看见,PMWS,发生在,4-10,周大的猪（,2005,年之前）,在美国,PMWS,代表性的发生在,10-20,周龄,-,发病率,2-,？,25%,-,死亡率,1-?10%,单纯的不复杂圆环病毒,2,型导致支气管间质性肺炎（在一个蓝耳病、喘气病、猪流感阴性猪群）,体表淋巴结肿大,肠系膜淋巴结肿大,猪皮炎肾病综合征,Porcine Dermatitis Nephropathy Syndrome,(PDNS),PDNS,哺乳期至生长育肥期，散发。,皮肤出现不规则疹块。,跛行、发热、厌食、消瘦、呼吸急促以及苍白等。,剖检病变：肾脏肿大、苍白，出血点。,显微病变：纤维蛋白坏死性肾小球性肾炎（过敏反应）。,感染,PDNS,的生长猪，局部的皮肤损伤通常是非常严重的，并且这些猪往往会出现耳尖坏死,这些图片是来自,2006,年,5,月感染,PDNS,带有典型的皮肤病灶、耳尖坏死以及肾脏病变的田间病例,PCV-2,相关性繁殖障碍,1999年加拿大首次报道，现有多次报道。,主要发生在初产母猪或引入的新猪群。,感染猪场通常出现流产、死胎、木乃伊增多，断奶前死亡率上升。,后期的流产和死胎，有时可见到胎儿明显的心肌肥大,心肌损伤，表现为大面积纤维组织增生或坏死性心肌炎。,心肌损伤部位及其它死胎组织中可检测到大量的PCV-2。,接种10,2.3,TCID,50,剂量于怀孕中期的胎儿，引起产木乃伊，10,1.3,TCID,50,主要引起局部的病理损伤（Lefebvre，比利时，国际猪病大会报告，2008）。,PCV-2,相关的繁殖障碍通常发生在初产母猪，母猪通常不表现出临床症状，产出弱仔、新鲜死胎或在不同阶段自溶并木乃伊化的胎儿,PCV-2,相关的病变最为常见的是木乃伊胎增加，确诊依赖于在流产胎儿的心脏找到,PCV-2,相关的病变和抗原（布朗染色）,猪呼吸道病综合征（,PRDC,）,PRDC,是一种严重危害生长,-,育肥猪的疾病,通常发生在,16,22,周龄的猪,临床症状：生长缓慢、饲料利用率低、嗜睡、厌食、发热、咳嗽以及呼吸困难等,组织病变：亚急性到慢性肺炎病变，肺部出现广泛性的肉芽肿性炎症,Wellenberg,对荷兰猪群呼吸道疾病与,PCV2,感染状况之间的关系进行了分析，表明无论猪群,PMWS,发生率的高低，,PCV2,在,13,24,周龄的肺炎和肺部病变中可能起重要作用（,Wellenberg,，国际猪病大会报告，,2008,）,与间质性肺炎相关的布朗染色,PCV-2,抗原,美国,PCV2,相关肺炎的严重病例；,PCV2,引起肺部病变；溃疡性的支气管炎；肺泡隔出现肉芽肿性炎症,纤维素性支气管炎,严重的,PMWS,PCV2,疫苗的效果,温和型,PMWS,支原体肺炎,或,/,和,PRRS,或/和,副猪嗜血杆菌病,消耗性疫病,PCV2,肺炎,肠炎,消耗性疫病,PMWS,(PCVAD),PCV-2,与,PRDC,相关疫病互作的研究报告,MHP,和,PCV2,的互作,猪肺炎支原体感染可增加PCV2引起的肺部和淋巴部位的病变程度，并且提高了PMWS的发病机率,(Vet Pathol 41:624-640, 2004),因此，猪肺炎支原体是诱发PMWS临床表现是重要的协同因素,猪肺炎支原体疫苗,的免疫可以减轻PMWS的临床症状？,MHP,疫苗,和,PCV2,免疫猪肺炎支原体疫苗可以明显减少感染PMWS猪群的发病机率,(Pig J 48:34-41, 2001),放弃猪肺炎支原体疫苗的接种所带来的不利影响可能要大于PCV2和猪肺炎支原体合并感染模式下疫苗诱发的PMWS,(Vet Pathol 41:624, 2004),MHP,疫苗,和,PCV2,猪肺炎支原体在1周龄大小免疫,RespiSure-ONE,，实验条件下不会明显诱发PMWS的发生,(Can J Vet Res 70:269-279, 2006),不管佐剂怎样，把握时机对于避免PMWS增强非常重要,猪肺炎支原体疫苗应该在合适的时机使用(在PCV2感染前不少于2周),MHP,疫苗,和,PCV2,小结,如果在,1,周龄大小时免疫猪肺炎支原体疫苗，不会增强,PMWS,的暴发和临床症状,猪肺炎支原体免疫会减轻和,PCV2,相关的呼吸症状,单独使用,PCV2,疫苗不会减轻和,MHP,相关的呼吸症状,双重感染,双重感染,MHP,的表现,MHP + PCV2,加强,MHP + PRRSV,加强,MHP + SIV,无影响,PCV2,和,PRRSV,PRRSV可以促进PCV2复制和相关病变，但是，PCV2感染不会影响PRRS感染,(Arch Virol 145:2421-2429),PCV2协同增加PRRSV引发的肺炎感染程度，PRRSV可以加强PCV2诱发的疾病,(Vet Pathol 38:528-539, 2001),PCV2,和,PRRSV,PCV2疫苗免疫可以明显降低由PCV2和PRRSV协同感染引起的PCV2相关病变和病毒血症,(Vet Microbiol 131:103-114, 2008),单独使用PCV2疫苗可以显著改善PRDC猪群的生长性能,(Vaccine 26:1488-1499, 2008),PCV2,感染与猪瘟、猪伪狂犬病免疫,PCV2,感染猪后接种猪瘟疫苗可促进,PCVAD,发生，导致猪瘟免疫失败（,Y,Ha,2009;,PCV2,感染一定程度上抑制猪瘟疫苗的特异性抗体反应（司兴奎等，,2009,）,PCV2,感染在一定程度上抑制猪伪狂犬病的体液免疫保护,PCVAD,诊断,临床症状和病理变化,组织病理学,淋巴结中淋巴细胞缺损,免疫组化,血清学,ELISA, IFA,PCR: Quantitative, nested, multiplex,病毒分离,序列鉴定,抗原捕获,ELISA,Regular PCR,Quantitative real-time PCR,PCVAD,的控制策略,管理,控制混合感染,疫苗,血清疗法,管理,在严重感染的农场，,Madec,等人（,1999,，,2000,）提出了,20,点建议来减少,PCVAD,的影响,产房,严格执行全进全出，批次间彻底清洗消毒。,母猪分娩前需进行驱虫和冲洗。,避免交叉寄养 。,断奶舍,采用小栏饲养，栏位间采用实墙隔开。,严格实施全进全出的生产流程，不同批次间需清空、清洗和消毒。,降低饲养密度（,0.33m,2,/,头）。,增加料位（,7cm/,头）。,改善舍内空气质量，氨气浓度,10ppm,，,CO20.1%,，相对湿度, 0.75 m,2,/,头。,改善舍内空气质量和温度 。,其它事项,制定合理的免疫程序。,确保猪舍内的空气流通。,确保严格的卫生（断尾、剪牙、注射）。,及时处理病猪（移到护理栏或实施安乐死）。,控制混合感染,猪支原体肺炎,猪细小病毒病,蓝耳病,猪,副,嗜血,杆菌,病,传染,性,胸膜,肺炎,疫苗是预防,PCV-2,相关疫病的关键,灭活疫苗,母猪灭活疫苗和生长猪灭活疫苗,弱毒疫苗,基因工程疫苗,核酸疫苗,重组疫苗,活载体疫苗,免疫接种的作用,降低发病率和（尤其是）死亡率；,提高猪群整齐度；,提高日增重；,改善饲料报酬；,减少继发感染和混合感染；,减少血液中,PCV-2,的含量；,投资回报显著；,当今疫苗的现状,全病毒灭活疫苗,基因工程苗,弱毒疫苗（无）,PCV-2,商品化疫苗及特性,公司,辉瑞,/,富道,柏林格,英特威,/,先灵葆雅,梅利亚,普莱柯,商品名,Suvaxyn,PCV2 One Dose,Ingelvac CircoFlex ,Circumvent,Circovac ,pulike,抗原,和,CAP,（）,毒株亚单位,毒株亚单位,毒株,SH,毒株,类型,PCV1-PCV2,嵌合灭活疫苗,基因工程,基因工程,全病毒灭活疫苗,全病毒灭活疫苗,佐剂,SLCD,水质佐剂,水质佐剂,水质佐剂,矿物油佐剂,双向佐剂,母猪,/,仔猪,4,周龄以上,3,周龄以上,3,周龄以上,母猪,1,胎,2,次,2-3,周龄以上,2,次或者,1,次,剂量,1,1,2,2,1,成本,.,头份,(10,元）,.,头份,(10,元）,.,头份（,8,元,/,猪）,头份,全病毒灭活疫苗,中国首创,圆健,-弥补了国内疫苗在圆环病毒上的空白，技术上突破了传统疫苗的瓶颈达到了一个新的高度。打造了中国最好的圆环病毒疫苗,普莱柯圆环病毒疫苗的创新,中国首创,PK-15,克隆优势细胞系,PKK,细胞,细胞悬浮培养技术,Bello cell,进口双向佐剂,w/o/w,超高效价，流行毒株，国际品质,典型流行毒株，免疫原性优良,由上海某猪场临床表现典型,PCV2,特点的断奶仔猪肺脏中分离得到，命名为,PCV2-SH,株，,GenBank,登录号为：,AY686763,。,该毒株为流行毒株、免疫原性优良，预防,PCV2,感染的同时还可有效减少断奶后仔猪由于感染,PCV2,后继发其他病毒和细菌的感染。,P0,P2,P4,P7,P6,P5,PK-15,克隆优势细胞系,PKK,细胞,各代次带毒细胞,PCV2,阳性细胞,细胞形态单一，均为多边形，细胞小，对,PCV2,病毒,70%-80%,感染,PKK,细胞各代次病毒滴度,病毒代次,P0,P1,P2,P3,P4,P5,病毒滴度（,10,n,TCID50/ml,）,2.0,2.5,3.0,3.5,5.33,5.7,病毒代次,P5,P6,P7,P11,P15,P20,病毒滴度（,10,n,TCID50/ml,）,5.7,6.0,6.5,6.57,6.8,6.67,国内首家克隆细胞技术,PKKTM,（专利）,国内首家采用,Bello Cell,悬浮培养技术,采用目前国际先进的,Bella cell,固定细胞床潮汐式、微载体高密度细胞悬浮培养技术，生产的疫苗效价高、异源蛋白含量少，微电脑自动控制密闭运行，抗原纯净、无污染，产品效价稳定。,普莱柯圆环病毒疫苗简介,乳白色或淡粉红色均匀乳状液。,用于预防由猪圆环病毒,2,型感染引起的疾病。免疫期为,3,个月。,颈部皮下或肌肉注射。仔猪,14,21,日龄首免，,1ml/,头，间隔两周后以同样剂量加强免疫,1,次；或者仔猪,14,21,日龄注射,2ml,。,普莱柯猪圆环病毒疫苗的研究,普莱柯圆环病毒疫苗的免疫效果研究,新大牧业,一场圆环实验第一批实验结果（深圳绿诗源试剂盒）,阳性率,/,平均,OD,值,一免后,14,天,二免后,21,天,间隔,1,月血清,再间隔,1,月血清,A,组（进口疫苗）,95%/1.31,70%/0.98,22%/0.48,61%/0.7,B,组（普莱柯疫苗）,100%/1.23,100%/1.17,80%/0.67,93%/0.99,新大牧业,一场圆环实验第二批实验结果（深圳绿诗源试剂盒）,阳性率,/,平均,OD,值,一免后,14,天,二免后,21,天,间隔,1,月血清,再间隔,1,月血清,A,组（进口疫苗）,95%/1.33,89%/1.02,42%/0.80,37%/0.59,B,组（普莱柯疫苗）,95%/1.33,100%/1.13,88%/0.96,94%/1.00,结果：,1,、绿诗源试剂盒检测此次实验,Pulike,疫苗阳性率要高于勃林格疫苗。,2,、,OD,值来讲，,Pulike,疫苗产生的抗体水平不低于勃林格疫苗,普莱柯圆环病毒疫苗的免疫效果研究,普莱柯圆环病毒疫苗的免疫效果研究,普莱柯圆环病毒疫苗的免疫效果研究,普莱柯圆环病毒疫苗的免疫效果研究,PCV2,灭活疫苗临床试验效果,390头猪，20日龄仔猪,免疫分组：,4组，每组98，112，98，82头,第1-3组，PCV2疫苗3批；第4组，安慰剂,3-10周龄，观察临床呼吸道症状,49日龄采血，15-20份/组，分离血清测定病毒血症和抗体,实验观察,免疫猪,ELISA,抗体产生动态曲线,疫苗免疫可以有效降低发病率和死亡率,表,1,、疫苗安全性与临床免疫保护效果观察结果,免疫组,试验猪数,副作用,发病数,(,率,),死亡数,(,率,),疫苗,0701,98,无,15(15.3),6(6.1),疫苗,0702,112,无,16(14.3),5(4.5),疫苗,0703,98,无,10(10.2),3(3.1),对照组,82,无,32(39.0),9(11.0),疫苗免疫可以有效降低血清中病毒含量,免疫组,首次免疫不同时间病毒含量,7,14,21,35,49,60,75,90,天,平均,疫苗,0701,1.4,1.3,1.3,1.1,1.4,0,0,0,0.90,疫苗,0702,1.6,1.5,1.3,2.0,1.2,0,0,0,0.95,疫苗,0703,1.6,1.7,1.2,1.4,1.0,0.2,0,0,0.94,对照组,1.5,2.0,3.5,4.0,3.5,2.8,1.8,0.5,2.45,表,3,、免疫猪群,PCV2,病毒血症检测结果,疫苗免疫可以明显提高猪的日增重,免疫组,试验猪头数,平均体重,kg,日增重,g,21-28,日龄,175,日龄,疫苗,0701,98,6.5 0.85,107.5 6.14,656,疫苗,0702,112,6.7 0.6,106.5 5.64,648,疫苗,0703,98,6.8 0.51,107.05.87,651,对照组,82,6.5 0.58,104.5 7.25,636,免疫母猪所产仔猪健康状况统计结果,免疫组,母猪数,数量,21-70,日龄健康状况,1,日龄,21,日龄,发病数（率）,死亡数（率）,疫苗,0701,6,65,65,13(20.0),5(7.7),疫苗,0702,8,87,86,8(9.3),5(5.8),疫苗,0703,8,89,89,13(14.6),6(6.7),对照组,10,102,101,24(23.8),11(10.9),免疫母猪可以提高仔猪成活率,表,3,免疫过圆环苗的母猪所产仔猪免疫圆环苗后,70,天（,86,日龄）时的,免疫增重效果比较表,项,目,国产疫苗组,进口苗组,对照组,起始头数,40,40,40,结束头数,39,38,40,平均起始重量,6.17,a0.26,6.16,a0.28,6.17,a0.24,平均结束重量,31.81a,2.24,31.42a,2.51,29.96b,2.63,平均结束和起始期间平均增重,25.64a,2.11,25.26a,2.39,23.79b,3.02,各样增重的标准差,4.45,5.72,9.10,变异系数（,C.V,）,17.36Aa,22.64Ab,38.25B,注：同行肩标小写字母不同，表示差异显著（,P,0.05,），肩标大写字母不同表示差异极显著（,P,0.01,）。,普莱柯与进口疫苗的差异,普莱柯,进口,是否本地毒株,是,非,全病毒抗原,是,非,日增重,(,对照组,),23g,22.7g,死亡率,7.6%,7.8%,投入产出比,1,：,4.5,1,：,1.5,关于性价比的计算,价格,日增重,料肉比,10元/头,25,克,0.08,10元/头,+52.5,元,/,头,+19.2,元,/10,公斤料,加权为：,55,元,降低死亡率,%,整齐度提高,%,性价比,10:,60,8,15,+10,元,/,头,+10,元,/,头,加权为：,15,元,圆健卖点,结 论,PCVAD,是影响猪群的最重要的疫病之一；,主要危害肉猪群：,发病率和死亡率升高；,生产性能下降；,预防控制的关键是免疫接种疫苗,免疫会明显降低死亡率；,免疫会显著提高日增重；,预防其它相关疫病有利于,PCVAD,控制,谢谢讨论！,