细胞病理学检验第八章(13节)课件

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,第八章 细胞病理学检验,第八章 细胞病理学检验,第一节 细胞病理学基本检验技术,第二节 正常细胞形态学,第三节 细胞损伤形态学,第四节 肿瘤细胞形态学,第五节 女性生殖道细胞病理学检查,第六节 呼吸道细胞病理学检查,第七节 浆膜腔积液细胞病理学检查,第八节 淋巴结细胞病理学检查,第八章 细胞病理学检验,第一节 细胞病理学基本检验技术第八章 细胞病理学检验,2,细胞学:,研究细胞结构和功能的科学,细胞病理学:,检查细胞形态学变化,对疾病进行筛检,、,诊断,、,鉴别,细针吸取细胞学,脱落细胞学,第八章,细胞病理学检验,细胞学:细胞病理学:细针吸取细胞学脱落细胞学第八章 细,3,人体各部位，特别是管腔系统表面的脱落细胞或病变器官及肿物通过细针吸取的方法获得的细胞，经染色后，在显微镜下观察这些细胞的形态，从而作出诊断的一门临床检验学科，又称临床细胞学（clinical cytology) ，细胞病理学（cytopathology),细胞病理学:,人体各部位，特别是管腔系统表面的脱落细胞或病变器官及肿物通过,4,第一节 细胞病理学基本检验技术,采集人体病变部位细胞对其形态、结构、性质进行观察，根据细胞量、质的改变，协助临床诊断,一、标本采集,二、涂片制备,三、标本固定,四、标本浓缩技术,五、染色方法,六、细胞病理学诊断,七、细胞病理学诊断质量保证,第一节 细胞病理学基本检验技术 采集人体病变部位细,5,一、标本采集,标本来源,1.自然排出物,2.体腔抽出液,采集方法,3.细针穿刺吸取液,第一节 细胞病理学基本检验技术,脱落：痰,、,尿,、,乳头分泌物,刮擦：气管,、,子宫颈（刷取、刮取、灌洗）,穿刺：肿瘤、积液,原则:,尽量简单、手法轻柔、避免血液、黏液混入、尽快制片、固定。,一、标本采集标本来源1.自然排出物2.体腔抽出液采集方法3.,6,方法特点：,脱落细胞标本,1）标本易获,2）细胞类型复杂,3）保存效果差,4）宜多次采样,刮擦细胞标本,1）表面直接采样,2）亦可获得器官内部标本,3）细胞成分保存良好,4）可获上皮以下标本,穿刺细胞标本,1）可获最佳结果,2）任何实体器官均可采样,3）方法简单，创伤小,4）特殊情况，采样不足,方法特点：脱落细胞标本刮擦细胞标本穿刺细胞标本,7,二、涂片制备,1.要求,脱落细胞学检查的涂片要求,2.方 法,推片法,涂抹法,喷射法,印片法,压拉涂片法,吸管推片法,标本要新鲜,玻片要清洁,涂片要牢固,涂片均匀,涂片数量,直接涂片、间接涂片,二、涂片制备1.要求脱落细胞学检查的涂片要求2.方 法 推片,8,三、涂片的固定（fixation）,目的,1.固定液,2.固定方法,带湿固定,干燥固定,3.固定时间,15,30min,乙醚乙醇固定液,氯仿,95%乙醇固定液,保持细胞的自然形态,沉淀和凝固细胞内的蛋白质,固定方法比较,三、涂片的固定（fixation）目的1.固定液2.固定方法,9,四、标本浓缩技术,离心法和细胞离心法,滤膜过滤法,(membrane filtration),细胞块法,液基细胞学技术,(LBC),四、标本浓缩技术 离心法和细胞离心法 滤膜过滤法(membr,10,液基薄层细胞制片机，利用比重离心原理，将细胞从混悬液中分离出来，均匀地沉积到载玻片上，由于试剂特有的包裹技术，可确保在载玻片上形成一单层平铺的细胞，形成背景清晰，形态完整，分布均匀的超薄细胞涂片。,液基薄层细胞制片机，利用比重离心原理，将细胞从混悬液中分离出,11,五、染色方法,H-E染色,巴氏染色,romanowsky,湿固定涂片,色彩多样、透明性好、核结构清晰、浆颗粒分明，适合于上皮细胞染色，并观察女性激素水平。,空气干燥涂片,组织切片,胞质色彩不丰富，不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定。,五、染色方法 H-E染色 巴氏染色 romanowsky湿固,12,常用染色方法,巴氏染色法：巴氏创立，所染细胞具有多色性，色彩鲜艳多样。涂片染色的透明性好，细胞核结构清晰，细胞质颗粒分明。,常用染色方法 巴氏染色法：巴氏创立，所染细胞具有多色性，色,13,苏木素伊红染色,苏木素伊红染色（HE）：H是阳离子染料，核染成蓝紫色，Eosin是阴离子染料，胞质和胶原纤维染成粉红色。,苏木素伊红染色 苏木素伊红染色（HE）：H是阳离子染,14,瑞氏吉姆萨染色,瑞氏吉姆萨染色（Wright-Giemsa stain）,细胞颜色较为鲜艳，细胞核染成紫红色，细胞质根据发育程度染成蓝色或红色。,瑞氏吉姆萨染色瑞氏吉姆萨染色（Wright-Giemsa,15,巴氏染色步骤,1染液配制,(1)Harris苏木精的配制：(同组织染色),(2)橙黄-G6：取橙黄-G6 O.5g，溶于95酒精100ml中，加磷钨酸15mg。,(3)EA36染液：,先配制原液(贮备液)：,亮绿液：亮绿0.5g，溶于5ml蒸馏水中，再加纯酒精至100ml。,俾士麦棕液：俾士麦棕0.5g，溶于5ml蒸馏水中，再加纯酒精至 100ml。,伊红Y液：伊红Y 0.5g，溶于5ml蒸馏水中，再加纯酒精至100ml。,临用前，将上述亮绿液45ml,伊红Y液45ml，俾士麦棕液10ml混合后，再加入磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。,也可配制EA50液：,3%亮绿水溶液10ml 纯甲醇250ml,20伊红Y水溶液20ml；冰醋酸20ml,磷钨酸2g(水溶后加入)95酒精700ml,巴氏染色步骤1染液配制,16,(1)将固定后的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精 分化、返蓝同HE染色。(2)70、80、95酒精逐级脱水各：1分钟。(3)橙黄-G6 3-5分钟。(4)95酒精I、缸洗各1分钟。(5)EA36或EA50 5分钟。(6)95酒精I、II缸洗各1分钟。(7)无水酒精I、缸洗各1分钟。(8)二甲苯I、缸透明各1分钟。(9)中性树胶封固。,染色步骤,(1)将固定后的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精,17,结 果,巴氏染色法将胞核染为深蓝色；,鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；,高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色；,中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色，粘液染成淡蓝色或粉红色。,结 果巴氏染色法将胞核染为深蓝色；,18,巴氏染色特点,细胞透明度好，结构清晰，涂片色彩丰富而鲜艳；,能显示鳞状上皮不同角化程度，常用于阴道涂片测定雌激素水平；,宫颈涂片和痰涂片中分化差的鳞癌小角化细胞显示桔黄色，在红色坏死背景中特别突出；,不易漏诊,巴氏染色特点细胞透明度好，结构清晰，涂片色彩丰富而鲜艳；,19,染色的注意事项,染料在配制时必须完全溶解，必要时可加温搅拌至完全溶解。,苏木素染液用前应过滤，以免沉渣沉积，气温低时，苏木素不易着色，可适当延长时间。,分色的目的在于使核着色具有特异性，与细胞浆对比鲜明，故分色时间不易过长，分色一旦完成，立即用水彻底冲洗，以免细胞核褪色。,涂片在橘黄G,6,染液中不易过长，染色后涂片上的残留的染液尽量滴净，然后置于95的乙醇中洗去多余染液，否则影响E,36,染色效果。,染色的注意事项染料在配制时必须完全溶解，必要时可加温搅拌至完,20,六、细胞病理学诊断,1）细胞数量,2）细胞结构特征,3）细胞核特征,4）细胞质特征,5）背景和人为因素,6）镜检原则,六、细胞病理学诊断1）细胞数量2）细胞结构特征3）细胞核特征,21,误诊：,七、细胞病理学诊断质量保证,良性诊断为恶性,恶性诊断为良性,1）诊断的准确性和局限性,2）细胞病理学诊断质量保证,内部质量控制（IQC）,外部质量控制（EQA）,优点,缺点,误诊：七、细胞病理学诊断质量保证良性诊断为恶性恶性诊断为良性,22,第二节 正常细胞形态学,一、上皮细胞,（一）鳞状上皮,（二）分泌性腺上皮,（三）纤毛上皮,（四）间皮,位于皮肤或腔道表层的细胞,二、非上皮细胞,（一）内皮细胞和特殊组织细胞,（二）支持系统：LC、巨噬细胞或组织细胞,（三）血细胞,第二节 正常细胞形态学一、上皮细胞（一）鳞状上皮位于皮,23,（一）鳞状上皮细胞,一、上皮细胞,基底层细胞,中层细胞,表层细胞,分布:,体表及与外界直接相通的腔道，如皮肤、口腔、咽、食管、子宫颈外口等部位。,（一）鳞状上皮细胞一、上皮细胞基底层细胞中层细胞表层细胞分布,24,(一) 复层鳞状上皮细胞,(一) 复层鳞状上皮细胞,25,（1）,基底层细胞,特 点,呈圆形，直径1215,m,核圆形或椭圆形，直径810,m,N/C比为1：0.51,核染色质呈均匀颗粒状,胞质呈灰蓝色、深蓝、暗红色,。,内底层细胞,（一）,复层鳞状上皮细胞,外底层细胞,（1）基底层细胞特 点 呈圆形，直径1215m 核圆,26,（1）,基底层细胞,外底层细胞,特 点,直径1530,m,细胞核和内底层细胞相似,.,核染色质略疏松,N/C比为1：12,胞质呈灰色、淡绿色、暗红色,。,内层之上，2,3层,在粘膜萎缩、糜烂、溃疡等病变时常见,（一）,复层鳞状上皮细胞,（1）基底层细胞 外底层细胞特 点 直径1530m,27,（2）,中层细胞,特点,直径3040,m,圆形、菱形或多边性.,细胞核相对较小.,胞质呈灰蓝色或淡绿色、淡红色,。,N/C比为1：23,（一）,复层鳞状上皮细胞,（2）中层细胞特点 直径3040m,圆形、菱形或多边,28,（3）,表层细胞,直径4060,m,多角形或圆形,细胞核小而深染,.,N/C比为1：35,胞质透明，边缘卷褶.,胞质呈浅红色,.,特 点,分 型,（一）,复层鳞状上皮细胞,（3）表层细胞 直径4060m,多角形或圆形 细,29,细胞体积:由小到大.,胞核:由大到小,最后消失.,核染色质:由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩。,核胞质比:由大到小.,胞质量:由少到多,胞质染色由暗红到浅红色.,从底层到表层细胞形态的变化规律为,（一）,复层鳞状上皮细胞,细胞体积:由小到大.从底层到表层细胞形态的变化规律为（一）,30,细胞病理学检验第八章(13节)课件,31,细胞病理学检验第八章(13节)课件,32,(二)分泌性腺上皮,立方形,柱形,细胞:肥大,卵圆/圆柱/锥形,胞核:卵圆形、居底,胞质:丰富、大量黏液,分布:,胃、肠等相关腺体、子宫颈、子宫内膜及输卵管等部位。,(二)分泌性腺上皮立方形柱形细胞:肥大胞核:卵圆形、居底胞质,33,(三)纤毛上皮,细胞:圆锥形/似胡萝卜,胞核:椭圆形/中下部,染色质细而均匀/较淡,分布:,支气管、子宫颈内膜、子宫内膜及输卵管等部位。,(三)纤毛上皮细胞:圆锥形/似胡萝卜胞核:椭圆形/中下部染色,34,(四)间皮,体腔器官如：胸腔、心包腔和腹腔等部位，由单层扁平上皮覆盖，起源于中胚层的特殊上皮。,(四)间皮体腔器官如：胸腔、心包腔和腹腔等部位，由单层扁平上,35,细胞病理学检验第八章(13节)课件,36,细胞病理学检验第八章(13节)课件,37,（三）非,上皮细胞的成分,背景成分,脱落的,上皮细胞以外的,非,上皮细胞成分,红细胞,中性粒细胞,嗜酸粒细胞,淋巴细胞,浆细胞,吞噬细胞,组织细胞,多核巨细胞,坏死物,（三）非上皮细胞的成分背景成分脱落的上皮细胞以外的非上皮细胞,38,（一）内皮细胞,位于血管内膜表面，形似间皮细胞，表面表达凝血因子。除细针吸取和血液标本外，在其他标本中罕见。,支持系统具有支持、传递和防御等功能，如肌肉、神经和骨髓等。其中，防御系统（免疫）有很大意义。,（二）支持系统,（supporting systems）,1淋巴细胞,2巨噬细胞或组织细胞,（三）血细胞,RBCWBC,（一）内皮细胞位于血管内膜表面，形似间皮细胞，表面表达凝血因,39,细胞病理学检验第八章(13节)课件,40,多核巨细胞,多核巨细胞,41,第三节 细胞损伤形态学,一、细胞死亡,二、细胞损伤其他反应,三、修复和再生,四、良性上皮异常,五、非肿瘤性疾病细胞学变化,原因：理化、感染、内部因子、细胞生长异常,病理变化：死亡、形态学变化、有丝分裂异常,第三节 细胞损伤形态学一、细胞死亡原因：理化、感染、内部因,42,第三节 细胞损伤形态学,凋亡与坏死,一、细胞死亡,第三节 细胞损伤形态学凋亡与坏死一、细胞死亡,43,二、细胞损伤其他反应,（二）核异质（dyskaryosis）,（一）退化变性,（三）异常角化(dyskeratosis),二、细胞损伤其他反应（二）核异质（dyskaryosis）,44,（一）退化变性,固缩性退变,肿胀性退变,1.,间皮细胞、鳞状上皮的基底细胞和柱状上皮细胞,急性炎症,2.,复层鳞状上皮的表层细胞,慢性炎症,（一）退化变性固缩性退变肿胀性退变1.间皮细胞、鳞状上皮的基,45,（二）,核异质（dyskaryosis）,细胞核的异常。为胞核大小、形态异常、染色质分布、核边界异常，介于良和恶性之间。,增生不良细胞/不典型细胞,（二）核异质（dyskaryosis） 细胞核的异常。为胞,46,Low-grade dyskaryosis,Severe dyskaryosis,-inflammatory/mature dyskaryosis,-precancerous/ immature dyskaryosis,轻度核异质 重度核异质,核大小,正常0.5倍,正常1,2倍,染色质,粗、深 粗网/颗粒、不均,核形,轻/中度畸形 中度以上畸形,核边,不增厚 轻度增厚,核质比,正常 增大,核仁,无增大、增多 偶见增大、增多,Low-grade dyskaryosisSevere d,47,细胞异型超过一般炎症变性程度，但尚不足以诊断为癌的细胞，均诊断为核异质细胞,真正“癌前期”细胞-真正核异质细胞,形态异形较明显的炎症变性细胞,数量少，形态又不够典型的癌细胞,临床核异质细胞:,细胞异型超过一般炎症变性程度，但尚不足以诊断为癌的细胞，,48,（三）异常角化(dyskeratosis),鳞状上皮非角化层(表层角化前/中/底层)细胞出现一些个别散在的胞质内角化,即胞质成熟程度超过胞核成熟程度,又称不成熟角化或角化不良。,（三）异常角化(dyskeratosis) 鳞状,49,三、修复与再生,由损伤邻近部周围的同种细胞增殖补充修复，称为再生,形态与增生细胞相似,由纤维结缔组织修复，称为纤维性修复,形成瘢痕故也称瘢痕修复，曾称不完全再生,三、修复与再生由损伤邻近部周围的同种细胞增殖补充修复，称为,50,四、良性上皮异常,形态特点,胞核增大，可见核仁,细胞质相对减少，嗜碱性，N/C略大,少数染色质形成小结，为细颗粒状,核分裂活跃,（一）增生,四、良性上皮异常形态特点胞核增大，可见核仁细胞质相对减少,51,（1）鳞状上皮细胞增生：,底层细胞成团脱落,核增大(0.5-2倍),表层细胞成熟正常,（2）纤毛柱状上皮细胞的增生：,（1）鳞状上皮细胞增生：底层细胞成团脱落（2）纤毛柱状上皮细,52,（二）化生,（1）鳞状上皮化生,圆/卵圆/多边形，体积似外底层细胞,成排/团脱落,紧密边界清楚，偶有空隙/桥样突起,浆量中等，深染,核位中央，圆/卵圆形，染色质结块，核仁,核浆比例,偶有少量柱状上皮,炎症细胞,形态,特点,（2）肠上皮化生,（二）化生（1）鳞状上皮化生 圆/卵圆/多边形，体积似外,53,五、非肿瘤性疾病细胞学变化,急性炎症,肿胀性退变、坏死，大量中性粒细胞,亚急性炎症,慢性炎症,成堆/团上皮、成纤维细胞,淋巴、浆、巨噬,肉芽肿性炎症,类上皮细胞、Langhan giant cells、干酪样坏死,（一）炎症性疾病,五、非肿瘤性疾病细胞学变化急性炎症肿胀性退变、坏死，大量中性,54,（二）特殊感染物质识别,2）单纯疱疹病毒感染,1）巨细胞病毒感染(CMV),3）clue cell,（二）特殊感染物质识别2）单纯疱疹病毒感染1）巨细胞病毒感染,55,