酵母细胞的固定化ppt ppt课件

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429572439gao,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/10/15,课题3,酵母细胞的固定化,2020/10/15,1,429572439gao,课题3 酵母细胞的固定化2020/10/1514295724,一、基础知识,1、酶制剂的概念和种类,(一)酶制剂,含有酶的制品,定义:,多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶,种类:,A、液体酶制剂,治疗某些胃病的胃蛋白酶液,B、固体酶制剂,2020/10/15,2,429572439gao,一、基础知识1、酶制剂的概念和种类(一)酶制剂含有酶的制品,精品资料,精品资料,2、酶的生产,提取法,定义:,采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来,优点:,简单易行,在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值,实例:在屠宰厂,可以从家畜胰脏中提取出胰酶;在水果加工厂,可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶,缺点:,要有充足的原材料,广泛应用受到限制,2020/10/15,4,429572439gao,2、酶的生产提取法定义:采用一定的技术直接从动植物或微生物,发酵法,定义:,通过微生物发酵获得所需要的酶,如果是胞外酶,可以从发酵液中直接提取;如果是细胞内酶,则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到,易培养、繁殖速度快、便于大规模生产,优点:,提取方式:,2020/10/15,5,429572439gao,发酵法定义:通过微生物发酵获得所需要的酶如果是胞外酶,可以,化学合成法,缺点:,成本高、已知分子结构的酶,提取出来的酶还要经过,分离、纯化,,再加入适量的,稳定剂和填充剂,,制成相应的,酶制剂,后才能用于催化化学反应,3、酶的提取和分离纯化,2020/10/15,6,429572439gao,化学合成法缺点:成本高、已知分子结构的酶提取出来的酶还要经,正品beely奇七效合一bb霜50g完美裸妆保湿遮瑕,购买地址, 过程,称取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml。用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化,注意事项,A、选用的干酵母要具有较强的活性,而且物种单一,B、在缺水状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于( )的微生物重新恢复正常的生活状态,休眠状态,2020/10/15,22,429572439gao,1、酵母细胞的活化 过程称取1g干酵母,放入50ml的小烧,2020/10/15,23,429572439gao,2020/10/1523429572439gao,2、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl,2,溶液, 过程,称取无水CaCl,2,0.83g,放入200ml的烧杯中,加入150ml的蒸馏水,使其充分溶解,待用,注意事项,溶解物质要彻底,勿用自来水溶解,以防自来水中各种离子影响实验结果,2020/10/15,24,429572439gao,2、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液,3、配制海藻酸钠溶液,称取0.7g海藻酸钠,放入50ml小烧杯中,加入10ml水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10ml, 过程,注意事项,加热时要用( ),或者( ),反复几次,直到海藻酸钠溶化为止,小火,间断加热,2020/10/15,25,429572439gao,3、配制海藻酸钠溶液称取0.7g海藻酸钠,放入50ml小烧杯,海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,2020/10/15,26,429572439gao,海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,,2020/10/15,27,429572439gao,2020/10/1527429572439gao,4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合,将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入以活化的酵母细胞,进行充分搅拌,再转移至注射器中, 过程,注意事项,A、溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温,否则会因温度过高杀死酵母菌,2020/10/15,28,429572439gao,4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室,2020/10/15,29,429572439gao,2020/10/1529429572439gao,B、搅拌要彻底充分,使两者混合均匀,以免影响实验结果的观察,(5)固定化酵母细胞,以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl,2,溶液中,将形成的凝胶珠在CaCl,2,溶液中浸泡30min左右, 过程,2020/10/15,30,429572439gao,B、搅拌要彻底充分,使两者混合均匀,以免影响实验结果的观察(,2020/10/15,31,429572439gao,2020/10/1531429572439gao,注意事项,A、可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠,用作对照,B、海藻酸钠胶体在CaCl,2,这种电解质的作用下,发生聚沉,形成凝胶珠,需稳定30min左右,(三)用固定化酵母细胞发酵,将固定化酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗23次,,洗去凝胶珠表面多余的电解质溶液,1、过程,2020/10/15,32,429572439gao,注意事项A、可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠,用作对照,刚形成的凝胶珠应在CaCl,2,溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是,用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。,二是,在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的,2020/10/15,33,429572439gao,刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定,将150ml质量分数为10的葡萄糖溶液转移至200ml的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25C下发酵24h,2、注意事项,控制好发酵温度,一般是室温25 C,发酵时间可视具体情况而定,一般时间稍长一些,效果明显,可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理,对照实验结果,2020/10/15,34,429572439gao,将150ml质量分数为10的葡萄糖溶液转移至200ml的,2020/10/15,35,429572439gao,2020/10/1535429572439gao,
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