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单击此处编辑标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/9/14,#,大肠杆菌的培养和分离,大肠杆菌的培养和分离,1,1,、微生物,病毒,细菌,放线菌,真菌,原生动物,一、微生物的基础知识,(1),定义,(2),种类,(3),用途,1、微生物病毒一、微生物的基础知识(1)定义(2)种类(3),2,2,、菌落,(,1,)概念,(,2,)菌落是鉴定菌种的重要依据。,2、菌落(1)概念,3,菌落,细菌的菌落特征因种而异,菌落细菌的菌落特征因种而异,4,3,、培养基,(,1,)成分,细菌培养:蛋白胨、酵母提取液、氯化钠,霉菌培养:无机物或添加蔗糖的豆芽汁,(,2,)种类,分离,(,纯化,),细菌、,保存菌种,固体培养基,液体培养基,凝固剂,琼脂,作用,扩大培养细菌,3、培养基(1)成分细菌培养:蛋白胨、酵母提取液、氯化钠(2,5,液体培养基:,表面生长,均匀混浊生长,沉淀生长,液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长,6,固体培养基:菌落,菌苔,固体培养基:菌落,菌苔,7,4,、生活环境,霉菌:中性偏酸,细菌:中性偏碱,4、生活环境霉菌:中性偏酸,8,二、无菌技术,1.,无菌操作的目的,防止培养基被其他微生物污染,(,及避免操作者被微生物感染,),二、无菌技术1.无菌操作的目的 防止培养基被其他微生物污染,9,2,、无菌技术包括,(1),将实验器具和培养基:,高压蒸汽,灭菌,(2),接种环,(,针,),、试管口,:,灼烧,灭菌,(3),实验操作空间:酒精,+,紫外线,消毒,(接种室,(,箱,),、超净工作台),(4),双手,:,酒精,消毒,(5),实验操作应在,酒精灯火焰,旁进行,(6),避免已灭菌处理的材料用具与,周围物品,相接触。,2、无菌技术包括(1)将实验器具和培养基:高压蒸汽灭菌 (2,10,(7),棉塞,(,封口膜,):,只让空气通过,而空气中的微生物不能通过。,灼烧灭菌,高压蒸汽灭菌锅,(7)棉塞(封口膜):只让空气通过,而空气中的微生物不能通过,11,(),消毒定义:,利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。,3.,消毒与灭菌,(,2,)灭菌的定义:,以化学剂或物理方法消灭,所有,微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到,完全无菌,之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。,()消毒定义:3.消毒与灭菌(2)灭菌的定义:以,12,三、分离细菌方法,2,、涂布分离法,1,、划线分离法 ,三、分离细菌方法2、涂布分离法1、划线分离法 ,13,1,、划线分离法,1、划线分离法,14,大肠杆菌的培养和分离课件,15,2,、涂布分离法,2、涂布分离法,16,2,、涂布分离法,2、涂布分离法,17,2,、培养:在,LB,液体培养基上扩大培养,四、大肠杆菌的培养和分离,1,、大肠杆菌,(1),特性:,革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,(2),用途:,基因工程技术中被广泛采用的工具,2、培养:在LB液体培养基上扩大培养四、大肠杆菌的培养和分离,18,3,、分离,灭菌,倒平板,培养,划线分离,LB,液体和固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌,将固体培养基倒入,4,个灭菌后的培养皿中,制备平面培养基,在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌,培养,12h,平板划线法,培养皿倒置,,37,恒温培养,1224,小时,3、分离 灭菌LB液体和固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌将固体,19,倒平板技术,倒平板操作,倒平板技术倒平板操作,20,接种到固体斜面培养基,菌落长成后,置于,4,冰箱保存。,4,、保存菌种,接种到固体斜面培养基,菌落长成后,置于4冰箱保存。4、保存,21,微生物的恒温培养,微生物的恒温培养,微生物的恒温培养微生物的恒温培养,22,结束语,当,你尽了自己的最大努力,时,,,失败,也是伟大,的,所以不要放弃,坚持就是正确的。,When You Do Your Best, Failure Is Great, So DonT Give Up, Stick To The,End,结束语,23,谢谢,大家,荣幸,这,一路,与你同行,ItS An Honor To Walk With You All The,Way,演讲人:,XXXXXX,时 间:,XX,年,XX,月,XX,日,谢谢大家演讲人:XXXXXX,24,
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