菊花组织培养课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,菊花的组织培养,菊花的组织培养,植物的组织培养,植物的组织培养,是指在人工培养基上，,离体培养,植物的器官、组织、细胞，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术,。,组织培养,：,思考,(,一,).,植物组织培养的基本过程,一、基础知识,1.,植物体在个体发育过程中将形成不同的细胞和组织原因是？,细胞分化,2.,植物组织培养的原理是什么？,植物细胞具有全能性,是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞，,1.,细胞的分化,概念：,在,个体发育,中，,相同细胞,的后代在形态、结构、生理功能上发生,稳定性差异,的过程,.,特点：,原因,：,持久性、稳定性、全能性,基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果,.,1.细胞的分化概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结,2.,细胞的全能性,定义：,生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性,.,原理：,生物体的,每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,（全套基因）,2.细胞的全能性定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整,10,个,14,200,多种,生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质（全套基因）,基因的选择性表达,10 个14200多种生物体的每一个体细胞都含有该物种所,植物组织培养的基本过程是怎样的？,离体的植物组织或细胞,(,外植体,),脱分化,愈伤组织,再分化,胚状体,(,根、芽,),植物体,外植体：,从,活植物体,上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官,.,脱分化：,由,高度分化,的植物器官、组织或细胞产生,愈伤组织,的过程，又称去分化,。,植物组织培养的基本过程是怎样的？离体的植物组织或细胞,9,、,我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。,8月-24,8月-24,Wednesday, August 14, 2024,10,、市场销售中最重要的字就是“问”。,10:24:07,10:24:07,10:24,8/14/2024 10:24:07 AM,11,、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。,8月-24,10:24:07,10:24,Aug-24,14-Aug-24,12,、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。,10:24:07,10:24:07,10:24,Wednesday, August 14, 2024,13,、,He who seize the right moment, is the right man.,谁把握机遇，谁就心想事成。,8月-24,8月-24,10:24:08,10:24:08,August 14, 2024,14,、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。,14 八月 2024,10:24:08 上午,10:24:08,8月-24,15,、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。,八月 24,10:24 上午,8月-24,10:24,August 14, 2024,16,、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。,2024/8/14 10:24:08,10:24:08,14 August 2024,17,、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。,10:24:08 上午,10:24 上午,10:24:08,8月-24,9、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第,愈伤组织：,离体的植物器官、组织或细胞通过,脱分化形成,的,疏松而无规则,的，,高度液泡化,的呈,无定形状态,的,未分化的薄壁细胞,2-3,周，愈伤组织开始形成。,愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的,再分化：,愈伤组织,继续培养，,重新分化成根和芽,等器官的过程。,3-5,周之后，诱导出的新叶片和芽。,再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根和芽等器官的过程。,(,二,),影响植物组织培养的因素,1,、外植体的选取,不同植物的组织培养难度,_,同一种植物的不同组织培养难度,_,差别很大,不同,如菊花的组织培养，一般选择,_,植株茎,_,。,未开花,上部新萌生的侧枝,对于同一种植物材料，材料的,_,、,_,等也会影响实验结果。,年龄,保存时间的长短,阅读教材，思考影响植物组织培养的因素有哪些？,(二)影响植物组织培养的因素1、外植体的选取不同植物的组织,2,、培养基的配制,常用的一种培养基为,_,其,主要成分包括：,：,C,、,H,、,O,、,N,、,P,、,K,、,Ca,、,Mg,、,S,：,B,、,Mn,、,Cu,、,Zn,、,Fe,、,Mo,、,I,、,Co,_,：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,_,：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,MS,培养基,大量元素,微量元素,有机物,植物激素,2、培养基的配制常用的一种培养基为_其主,使用顺序,实验结果,先使用生长素，后使用细胞分裂素,有利于,_,，但,_,先使用细胞分裂素，后使用生长素,细胞既分裂又分化,同时使用,_,提高,3,、不同植物激素使用顺序和使用量,不同植物激素使用顺序,细胞分裂,细胞不分化,分化频率,不同植物激素使用量,生长素用量比细胞分裂素用量,植物细胞的发育方向,比值高,时,有利于根,的分化、抑制芽的形成,比值低,时,有利于芽,的分化、抑制根的形成,比值适中,时,促进,愈伤组织,的生长,使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于_,4,、环境因素：,不同的植物对各种条件的要求往往,不同,。,如进行菊花的组织培养，一般将,pH,控制在,_,左右；,温度控制在,_,；,并且每天用日光灯照射,_,。,5.8,18,22 ,12h,5,、消毒,在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境。,4、环境因素：不同的植物对各种条件的要求往往 不同 。 如进,1,、实验操作流程,制备,MS,固体培养基,外植体消毒,接 种,培 养,栽 培,移 栽,二、实验操作,1、实验操作流程制备MS固体培养基外植体消毒接 种培,2,、实验具体操作,（,1,）,.,制备,MS,固体培养基,实验室一般使用,_,保存的配制好的培养基母液来制备,配制各种母液,配制母液时，大量元素浓缩,_,，微量元素浓缩,_,。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照,_,的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。,1mg/ml,4,10,倍,100,倍,2、实验具体操作（1）.制备MS固体培养基实验室一般使用_,配制培养基。,按配方称取琼脂、,蔗糖,以及各种母液，配制,MS,培养基。,植物激素,在菊花组织培养中，可以不添加,_,，原因是菊花茎段组织培养,_,。,比较容易,灭菌,将分装好的培养基连同其他器械一起进行,_,。,高压蒸汽灭菌,配制培养基。按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液，配制MS培养,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。,高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,思 考,？,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境,（,2,）,.,外植体消毒,选取菊花茎段时，要取,_,。,流水冲洗,酒精,无菌水,氯化汞,无菌水,消毒流程：,浓度,_,摇动,_,次,时间,_s,浓度,_,时间,_min,至少清洗,_,次,漂净,_,生长旺盛的嫩枝,70%,2,3,6,7,0.1%,1,2,3,消毒水,（2）.外植体消毒 选取菊花茎段时，要取 _,外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,思 考,？,在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？,外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要,不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。,在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？,思 考,？,不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果,（,3,）,.,接种,前期准备：用,_,消毒工作台，点燃酒精灯。所有工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用,_,灭菌。,接种操作：插入外植体时,_,端朝上，每个锥形瓶接种,_,个外植体。,70,的酒精,火焰灼烧,形态学上,6,8,（3）.接种 前期准备：用_,（,4,）,.,培养,接种后的锥形瓶最好放在,_,中培养。培养期间定期进行,_,，温度控制在,_,，并且每天用日光灯光照,_,h,。,无菌箱,18,22,12,消毒,（4）.培养 接种后的锥形瓶最好放在_,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程,培养过程中为什么需要进行光照？,思 考,？,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具,（,5,）,.,移栽,移栽生根的试管苗之前，应先打开封口膜，在培养间生长几日；然后用流水清洗,_,，将幼苗移植到,_,等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。,根部培养基,消过毒的蛭石或珍珠岩,（,6,）栽培,幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花,.,（5）.移栽 移栽生根的试管苗之前，应先打开封口膜，在培养间,植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。,思 考,？,在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？,植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗,1,、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）,2,、外植体的消毒（酒精、氯化汞）,3,、接种的无菌操作（酒精、酒精灯,灼烧）,4,、无菌箱中的培养；,5,、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,思 考,？,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）在整个操作过程中，是如何来实,2.,是否完成了对植物组织的脱分化和再分化,3.,是否进行了统计、对照与记录,4.,生根苗的移栽是否合格,1.,外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？,培养基灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。,三、结果分析与评价,2. 是否完成了对植物组织的脱分化和再分化1. 外植体在培养,一般说来，容易进行,_,繁殖的植物，也容易进行组织培养。,如芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季等。,无性,四、课题延伸,一般说来，容易进行_繁殖的植物，也容易进行组,例,1,、 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：,正确答案：,C,A,、脱分化,B,、去分化,C,、再分化,D,、脱分化或去分化,例1、 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成,例,2,、下列不能作为植物组织培养的材料是：,正确答案：,D,A,、秋海棠的叶,B,、马铃薯的块茎,C,、成熟的花粉,D,、木质部中的导管细胞,例2、下列不能作为植物组织培养的材料是：正确答案：DA、秋海,谢 谢,!,谢 谢 !,