安捷伦液相色谱仪讲座--课件

安捷伦科技液相色谱基本维护故障诊断交安捷伦科技液相色谱基本维护故障诊断交流讲座流讲座 安捷伦科技液相色谱基本维护故障诊断交流讲座12Agilent 1100系列系列HPLC 工作原理工作原理 日常维护日常维护 故障诊断故障诊断 技术支持服务流程技术支持服务流程安捷伦科技有限公司安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部生命科学与化学分析仪器部1100 HPLC Maintenance&Troubleshooting2Agilent1100系列HPLC1100HPLC231100 HPLC Maintenance&Troubleshooting1.1.在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)2.2.四元二元四元二元/单元泵单元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)G1311A/G1312A/G1310A)3.3.自动进样器自动进样器(G1313A)G1313A)4.4.二极管阵列检测器二极管阵列检测器(G1315B)G1315B)5.5.可变波长紫外检测器可变波长紫外检测器（G1314A)G1314A)31100HPLCMaintenance&Troub34Agilent 1100系列系列HPLC4Agilent1100系列HPLC45Agilent 1100 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)5Agilent1100在线脱气机-在线脱气机(G1356工作原理工作原理Agilent 1100 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)6工作原理Agilent1100在线脱气机-在线脱气机67何时需要使用何时需要使用Agilent 1100在线脱气机在线脱气机Agilent 1100 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)7何时需要使用Agilent1100在线脱气机Agilen78Agilent 1100 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)脱气机的操作：操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30ml，对微脱气机10ml）冲洗 真空脱气机，特别是当 泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂 时。标准脱气机（标准脱气机（G1322A).标准脱气机每个通道体积为12ml 建议排液操作：5ml/min 排液6min以上。微脱气机（微脱气机（G1379A).微脱每个通道体积为1ml 建议排液操作：2ml/min 排液5min。切勿用5ml/min 流速去排液。8Agilent1100在线脱气机-在线脱气机(G1389使用使用Agilent 1100 在线脱气机须知在线脱气机须知溶剂溶剂用棕色玻璃瓶装水溶液，可以避免藻类的生长。用棕色玻璃瓶装水溶液，可以避免藻类的生长。过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。避免使用下述可腐蚀钢铁的避免使用下述可腐蚀钢铁的 溶剂：溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。高浓度无机酸，如硝酸、硫酸.可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。Agilent 1100 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)9使用Agilent1100在线脱气机须知溶剂910防止堵塞溶剂过滤器及真空腔防止堵塞溶剂过滤器及真空腔污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH4至7)中尤其如此。下列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液（建议不超过两天）。如果应用许可，在溶剂中加人0.00010.001M的叠氮化钠。避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。用氩气置换流动相上层的空气。长期不用时用水清洗水溶液通道并置换为甲醇Agilent 1100 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护,故障诊断故障诊断10防止堵塞溶剂过滤器及真空腔Agilent1100在线1011Agilent 1100 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护,故障诊断故障诊断检查溶剂过滤器检查溶剂过滤器拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。查看过滤器是否变色查看过滤器是否变色临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常清洁溶剂过滤器清洁溶剂过滤器将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂，然后将过滤器放在装有浓硝酸（35）的烧杯里浸一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。将过滤器重新装好。建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统11Agilent1100在线脱气机日常维护,故障诊断检1112Agilent 1100 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？如何简单判断脱气机脱气是否正常？2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？堵塞？3.如何防止及解决脱气机腔体或溶剂过滤头堵如何防止及解决脱气机腔体或溶剂过滤头堵塞？塞？12Agilent1100在线脱气机日常维护Questi1213Agilent 1100 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？如何简单判断脱气机脱气是否正常？打开打开Purge阀，设定泵的流速阀，设定泵的流速2ml/min，提起当提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？塞？关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。塞时，溶剂会流出不畅或不流出。13Agilent1100在线脱气机日常维护Questi1314Agilent 1100 四元泵四元泵(G1311A)14Agilent1100四元泵(G1311A)1415Agilent 1100 四元泵工作原理四元泵工作原理15Agilent1100四元泵工作原理1516Agilent 1100 泵头泵头(Pump Head)结构图结构图Agilent 1100 泵泵 16Agilent1100泵头(PumpHead)结构1617Agilent 1100 泵头泵头(Pump Head)结构图结构图Pumpheadscrews17Agilent1100泵头(PumpHead)结构1718Agilent 1100 泵头泵头(Pump Head)结构图结构图18Agilent1100泵头(PumpHead)结构1819Agilent 1100 泵头泵头(Pump Head)结构图结构图Outlet Ball ValvePurge Valve234567Active Inlet Valve(common to all except 1050)Cartridge8new style1old style19Agilent1100泵头(PumpHead)结构1920Agilent 1100系列密封垫冲洗系列密封垫冲洗Seal Wash (可选可选)l当流动相中盐浓度当流动相中盐浓度0.01M0.01M时，可以减时，可以减小密封垫的磨损。小密封垫的磨损。l对于对于Agilent 1100系列泵为可选件。系列泵为可选件。l用用10%10%异丙醇水溶液冲洗异丙醇水溶液冲洗WasherSupport seal assemblySealAgilent 1100 系列泵系列泵20Agilent1100系列密封垫冲洗SealWas2021带有带有Seal Wash的泵头结构图的泵头结构图21带有SealWash的泵头结构图2122如何更换溶剂出口过滤芯如何更换溶剂出口过滤芯Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护 22如何更换溶剂出口过滤芯Agilent四元二元/单元泵2223严重污染的溶剂出口过滤芯严重污染的溶剂出口过滤芯Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护23严重污染的溶剂出口过滤芯Agilent四元二元/单元2324如何更换活塞杆密封圈如何更换活塞杆密封圈Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护 24如何更换活塞杆密封圈Agilent四元二元/单元泵日2425Agilent 1100 系列泵使用须知系列泵使用须知Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护 25Agilent1100系列泵使用须知Agilent2526多通道梯度阀（多通道梯度阀（MCGV）操作要点操作要点当盐溶液和有机溶剂混合时，盐溶液可能与有机溶剂完全混溶，而不会出现沉淀。但是在梯度阀的混合点，重力作用有可能使盐颗粒沉淀下来。通常，阀的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用的是这样的配置，盐将落回到盐溶液中，并被溶解。当泵使用的不同配置（例如，D-盐溶液，A-有机溶剂）时，盐可能会落到有机溶剂中，从而出现问题。Agilent1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到下面的口上，有机溶剂接到上面的梯度阀口上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通道的上面。建议定期用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐沉淀。Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护 26多通道梯度阀（MCGV）操作要点Agilent四元二2627更好地使用四元泵更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接在底部得梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机通道最好在盐溶液通道得上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在阀口析出得盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30ml，对微脱气机10ml）冲洗真空脱气机，特别是当泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌。当虑器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护 27更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较2728Agilent 1100 系列泵的使用须知系列泵的使用须知更好地使用泵更好地使用泵当使用低流速时（不高于0.2ml/min）检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。每当更换泵密封圈时排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于正相密封垫。28Agilent1100系列泵的使用须知更好地使用泵2829Agilent 1100 系列泵的使用须知系列泵的使用须知 更好地使用泵更好地使用泵 当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。10异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。最好不要用其它溶剂代替。当泵头安装有冲洗附件而不开启当泵头安装有冲洗附件而不开启10异丙醇，会使密封垫及活异丙醇，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。塞杆的寿命减短。29Agilent1100系列泵的使用须知更2930Agilent 1100 系列泵的使用须知系列泵的使用须知密封垫磨合操作：密封垫磨合操作：1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号01001847）。2.连接阻尼管（部件号50222159）于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。3.打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的流速冲洗系统10分钟。4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。注意，只有反相密封垫（注意，只有反相密封垫（50636589）才需此操作而正相密封垫）才需此操作而正相密封垫（09051420）因其最高只耐受）因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。所以此操作会损害它。30Agilent1100系列泵的使用须知密封垫磨合操作3031Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护1.更换排液阀虑芯更换排液阀虑芯2.清洗清洗,更换主动阀阀芯更换主动阀阀芯3.清洗球形单向阀清洗球形单向阀4.更换密封垫，活塞杆更换密封垫，活塞杆31Agilent四元二元/单元泵日常维护1.更换排液阀3132Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？如何简单判断比例阀是否内漏？2.何时应该更换何时应该更换Purge阀内的过滤白头？阀内的过滤白头？3.泵压力不正常可能由那些原因引起？泵压力不正常可能由那些原因引起？Agilent 1100 泵的日常维护泵的日常维护32Question?Agilent1100泵的日常维护3233Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？如何简单判断比例阀是否内漏？设定泵使用一个单独通路（设定泵使用一个单独通路（A），），打开打开Purge阀，流阀，流速速5ml/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。流动，正常时均不应流动。2.何时应该更换何时应该更换Purge阀内的过滤白头？阀内的过滤白头？使用纯水作流动相，打开使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速阀，流速5ml/min，观察系统压力，如果超过观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。应该更换。3.泵压力不正常可能由那些原因引起？泵压力不正常可能由那些原因引起？气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐浓度太高比例阀混合时盐浓度太高Agilent 1100 系列泵的日常维护系列泵的日常维护33Question?Agilent1100系列泵的日常3334Agilent 1100 自动进样器自动进样器(G1313A)34Agilent1100自动进样器(G1313A)3435Agilent 1100 自动进样器工作原理自动进样器工作原理35Agilent1100自动进样器工作原理3536Agilent 1100 自动进样器工作原理自动进样器工作原理36Agilent1100自动进样器工作原理3637Agilent 1100 自动进样器结构自动进样器结构37Agilent1100自动进样器结构3738Agilent 1100 自动进样器结构自动进样器结构38Agilent1100自动进样器结构3839Agilent 1100 自动进样器结构自动进样器结构39Agilent1100自动进样器结构3940Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知40Agilent1100自动进样器使用须知4041Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知使用自动洗针功能使用自动洗针功能自动洗针功能可以把程序设置为“带有洗针的进样”,或将自动洗针功能包含在进样器程序中。当使用自动洗针功能时，进样针在取样后会转移到洗针步骤。造成携留效应的主要原因是残留在进样针外的少量样品。通过进样后的洗针功能可以立即洗去针外表面上残留的样品。当进样阀转回到主流路时，定量管和针内所有的样品都被冲洗到色谱柱中。这种结合洗针和冲洗管路的设计可以把携留效应减低到最小的程度。去掉洗涤瓶盖去掉洗涤瓶盖为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶是不加盖的，而且洗涤瓶中的溶剂对样品组分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少量样品留在密封垫上，这样会把残留的样品带到下一个样品中。带有洗针的进样程序带有洗针的进样程序进样程序中包括了NEEDLEWASH（洗针）命令，当这一命令设置在进样程序中时，则在进样前会进入指定的洗涤瓶中洗针。例1DRAW5L（抽取5L样品）2NEEDLEWASHvial7（洗针到7号瓶）3INJECT（进样）41Agilent1100自动进样器使用须知使用自动洗针4142Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知42Agilent1100自动进样器使用须知4243Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知提高进样量的精度提高进样量的精度进样体积小于进样体积小于22L当进样阀切换到BYPASS（旁路）位置时，在定量管内的流动相压力降低。当进样针抽取样品时，流动相进一步降低压力。如果流动相没有充分脱气，在进样时定量管内就会产生小气泡。在进样体积小于2L时这些小气泡就会影响到进样体积的精密度。为了使进样体积小于2L时有最佳的进样精密度，建议使用Agilent1100系列真空脱气机，确保流动相充分脱气。也可以在进样间隙自动洗针，从而进一步提高进样体积的精密度。43Agilent1100自动进样器使用须知提高进样量的4344Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知提高进样量精度提高进样量精度抽样速度抽样速度对粘稠的样品，计量部件从样品瓶抽取样品的速度会影响取样体积的精密度。如取样速度太快，在样品塞中会带有气泡，从而影响进样体积。抽样速度的默认值是200L/min(范围：10-1000L/min)，这一速度适合于大多数样品的取样要求。但是对于粘稠的样品要得到最佳的结果，设定的抽样速度要低于200L/min。进样器程序中的“DRAW”命令行也用于抽样速度的设定，这是为自动进样器设置的。推样速度推样速度默认的推样速度为200L/min(范围：10-1000L/min)，当进行大体积进样时，就要设定为较大的推样速度，加快进样周期。这就是缩短计量器具从进样周期开始（当注射器活塞回到起始位置时）到推出溶剂所需的时间。进样器程序中的“EJECT”命令行也用于推样速度的设定，这是为自动进样器设置的。较快的推样速度可以加快进样器程序所需的时间。对于粘稠的样品要避免使用过快的推样速度。当使用多次抽样功能时，推样速度控制着样品进入针座毛细管扩大体积部分的速度，对粘稠的样品要避免使用过快的推样速度。44Agilent1100自动进样器使用须知提高进样量精4445Agilent 1100 自动进样器使用须知自动进样器使用须知转子密封垫的选择转子密封垫的选择VespelTM密封垫密封垫标准的密封垫是由Vespel密封材料制成的。Vespel适用于pH范围为2.39.5的流动相。Vespel适合于大多数的应用领域，但是当pH低于2.3或高于9.5时，Vespel密封垫会很快地损坏，缩短其使用寿命。TefzelTM密封垫密封垫在流动相的pH低于2.3或高于9.5时，或者在会很快降低Vespel密封垫的使用寿命的情况下，可以使用由Tefzel制成的密封垫。Tefzel是较Vespel更耐极端pH范围的材料，但是Tefzel较为柔软。通常Tefzel密封垫的理论使用寿命小于Vespel密封垫。但对于pH很低或很高的流动相，Tefzel密封垫的使用寿命会更长一些。45Agilent1100自动进样器使用须知转子密封垫的4546Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护1 定期检查各传动杆是否足够润滑，必要时先用酒精棉球擦拭干净后再给这些杆涂抹少量液体润滑油，脏的传动杆使阻力增大从而造成自动进样器在取样过程中由于马达过热导致出错。2检查取样爪子的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏。3用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座。4若场地确实灰尘较多，建议购买自动进样器门，棕色门还可以帮助防止见光敏感的样品。46Agilent1100自动进样器日常维护14647Agilent 1100 自动进样器常见故障自动进样器常见故障漏液漏液 针座磨损针座磨损 转子磨损转子磨损 进样量不准进样量不准 转子磨损转子磨损 计量泵故障计量泵故障 抽样速度太快抽样速度太快机械臂移动故障机械臂移动故障-抓不准样品瓶抓不准样品瓶 传感器故障传感器故障 周围环境差周围环境差 样品瓶不标准样品瓶不标准 47Agilent1100自动进样器常见故障漏液4748Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护48Question?Agilent1100自动进样器日4849Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位置。置。Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护49Question?Agilent1100自动进样器日4950Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护Question?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？50Agilent1100自动进样器日常维护Questi5051Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护Question?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？将第四号管（排液的细塑料管）提起，正常情况下应没将第四号管（排液的细塑料管）提起，正常情况下应没有液体滴出，如有则转子垫圈已磨损。有液体滴出，如有则转子垫圈已磨损。色谱现象：压力不稳，保留时间面积重复性差，残留色谱现象：压力不稳，保留时间面积重复性差，残留严重。严重。51Agilent1100自动进样器日常维护Questi5152Agilent 1100 自动进样器日常维护自动进样器日常维护1更换转子密封圈2更换针及针座52Agilent1100自动进样器日常维护更换转子密封5253Agilent 1100 手动进样器（手动进样器（G1328A,G1328B)53Agilent1100手动进样器（G1328A,G15354Agilent 1100 手动进样器操作原理手动进样器操作原理54Agilent1100手动进样器操作原理5455Agilent 1100 手动进样器操作原理手动进样器操作原理55Agilent1100手动进样器操作原理5556Agilent 1100 手动进样器使用须知手动进样器使用须知 为了防止虹吸应注意使第五第六号放空管的出口与进样口保持在同一平面56Agilent1100手动进样器使用须知5657Agilent 1100 手动进样器使用须知手动进样器使用须知1为了更好的重现性，应进行满阀进样，进样体积最好是样品环的56倍。22手动进样器预装Vespel转子垫圈，请参考自动进样章节选择转子垫圈。3一定要使用合规格的进样器，规格为外径0.028英寸，长2英寸的平头针。一定不能使用尖针！它会严重刮坏转子垫圈。一定不能使用尖针！它会严重刮坏转子垫圈。57Agilent1100手动进样器使用须知为了更好的5758Agilent 1100 手动进样器日常维护手动进样器日常维护1进完样后一定要及时冲洗进样器，特别是用盐或缓冲液作流动相。由于这些溶液会形成结晶从而磨损垫圈。2冲洗方法：A.将进样器转至Inject位置，利用液相泵输送高纯水冲洗(这时是冲洗样品环及沟槽）.B.用阀清洗接头和注射器冲洗。58Agilent1100手动进样器日常维护进完样后一定5859Agilent 1100 手动进样器日常维护手动进样器日常维护 当用注射器及接头清洗时，应注意不要太靠近进样器并戴防护眼当用注射器及接头清洗时，应注意不要太靠近进样器并戴防护眼镜，防止溶剂溅入眼睛。镜，防止溶剂溅入眼睛。3经常用湿润的软布清洁进样器，特别是进样口周围。4请仔细阅读进样器说明书，上面有详细使用及其它信息。59Agilent1100手动进样器日常维护当用5960Agilent 1100 手动进样器日常维护手动进样器日常维护Question如何判断手动进样器的密封圈漏？60Agilent1100手动进样器日常维护Questi6061Agilent 1100 手动进样器日常维护手动进样器日常维护Question.如何判断手动进样器的密封圈漏？通常结合两方面：1从进样器观察，进样后将针拔出，若从进样口或排空管有液体冒出，显示密封圈磨损。2从结果看：通常有压力不稳定，峰面积或保留时间不稳定和残留严重。61Agilent1100手动进样器日常维护Questi6162Agilent 1100 手动进样器日常维护手动进样器日常维护更换转子密封圈。62Agilent1100手动进样器日常维护更换转子密封6263Agilent 1100 柱温箱器使用注意事项及日常维护柱温箱器使用注意事项及日常维护63Agilent1100柱温箱器使用注意事项及日常维护6364Agilent 1100 柱温箱器使用注意事项及日常维护柱温箱器使用注意事项及日常维护1连接的管路尽量短，防止热扩散及峰增宽。2如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2ml/min时建议使用左边的柱温箱(左边体积较少,3ul).3除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。并确保关好前盖。64Agilent1100柱温箱器使用注意事项及日常维护6465Agilent 1100 柱温箱器使用注意事项及日常维护柱温箱器使用注意事项及日常维护Question如果加热块堵塞怎么办？如果加热块堵塞怎么办？65Agilent1100柱温箱器使用注意事项及日常维护6566Agilent 1100 柱温箱器使用注意事项及日常维护柱温箱器使用注意事项及日常维护Question.如果加热块堵塞怎么办？如果加热块堵塞怎么办？用一管连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。用一管连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。66Agilent1100柱温箱器使用注意事项及日常维护6667Agilent 1100 二极管阵列检测器二极管阵列检测器(G1315B)67Agilent1100二极管阵列检测器(G1315B6768Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器工作原理检测器工作原理68Agilent1100二极管阵列检测器工作原理6869Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器工作原理检测器工作原理可变的光进口狭缝系统可变的光进口狭缝系统这一微型狭缝系统是利用硅的机械性能和总体布局微型加工技术以及精确的制作功能加工而成，它把所需的光学性能狭缝和光栅集中组合到一起，成为一个简单、紧凑的元件。狭缝宽度直接由仪器上的微处理器来控制，并可用为设定分析方法的一个实验参数。光栅光栅用一个凹面全息光栅来实现分光和光谱成像，光栅把入射光束全部分散成组成它的波长，然后把它反射到二极管阵列上。二极管阵列二极管阵列二极管阵列由1024个光电二极管和一个位于陶瓷基座上的电路组成，在190-950nm范围内取样间隔1nm。69Agilent1100二极管阵列检测器工作原理可变的光6970Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器工作原理检测器工作原理灯灯紫外区域采用有通光狭缝的氘灯作光源，低压氘气体的等离子体能发出190nm到大约800nm的光。可见光（VIS）和近红外光采用低噪音钨灯得到，其发射出的光谱范围为470-950nm。消色差透镜（光源透镜）消色差透镜（光源透镜）消色差透镜接受氘灯及钨灯发出的光，将其聚焦后通过流通池。氧化钬滤光片氧化钬滤光片当进行波长校准时，氧化钬滤光片用电力驱动进入光路。流通池底座窗口流通池底座窗口流通池底座窗口部件把氧化钬滤光片和流通池分开。流通池室流通池室光学单元有一个流通池室，使流通池易于放入光学单元，采用相同的快捷安装系统可以把各种流通池装入光学单元，在检查检测器的光电性能时，拿走流通池能消除流通池带来的影响。70Agilent1100二极管阵列检测器工作原理灯7071Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化71Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7172Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化72Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7273Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化73Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7374Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化74Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7475Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化流通池光路长度对信号值的影响流通池光路长度对信号值的影响流通池加长得到的信号值就高，尽管在流通池加长时噪音略有增加，而信噪比有较大的增加。例如，见图8，把流通池长度由6mm增加到10mm，噪音增加10%，而信号增加70%。流通池加长会使池体积也有所增加在我们的例子中为5L13L，这时峰宽也会增加，如图8所示，在此例的梯度洗脱中对分离度没有影响。经验表明，池体积应为半峰高处峰体积的1/3。要测定峰体积，把积分后的峰宽乘以流速再除以3。图图8 875Agilent1100二极管阵列检测器性能优化流通池光7576Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化使用较宽的带宽有降低噪声的优点，能在整个波长范围内降低噪声和使用4nm带宽相比采用30nm带宽，基线噪声降低约2.5倍。而信号值是4-nm带宽的75%，在此例中信噪比增大2倍。76Agilent1100二极管阵列检测器性能优化使用较宽7677Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化77Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7778Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化78Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7879Agilent 1100二极管阵列二极管阵列检测器性能优化检测器性能优化79Agilent1100二极管阵列检测器性能优化7980Agilent 1100二极管阵列检测器性能优化二极管阵列检测器性能优化峰宽（响应时间）峰宽（响应时间）响应时间是说明在流通池中光吸收产生突变后出现检测器信号的快慢，检测器采用数值滤波器使响应时间与色谱图中峰宽相适应，这一滤波器不影响峰面积和峰的对称性，正确设定此滤波器会大大减小基线噪声（见图9），但会使峰高略有下降。另外这一滤波器能降低数据的速度，优化色谱的积分和显示，能最大限度地减少存储色谱和光谱的磁盘空间。80Agilent1100二极管阵列检测器性能优化峰宽（响8081Agilent 1100二极管阵列检测器性能优化二极管阵列检测器性能优化表6列出检测器对滤波器的选择。为获得最佳效果，把峰宽设定为接近于色谱图中窄峰的宽度，此时响应时间约为峰宽的1/3，这样会使峰高降低5%，峰的加宽不到5%。在检测器中峰宽设定减小会引起峰高增加9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞VWD40barDAD120barMWD120barFLD20barRID5barRID、FLD永远是最后一个检测器10.注注意不同厂家接头问题，防止渗漏或毁坏色谱柱和接头Agilent 1100 HPLC日常维护日常维护106安如装有sealwash组件的，无论是否使用缓冲盐，106107HPLC常用的色谱柱接头常用的色谱柱接头0.090 in.0.130 in.0.090 in.0.170 in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090 in.0.080 in.Troubleshooting LC Fittings,Part II.J.W.Dolan and P.Upchurch.LC/GC Magazine 6:788(1988)Agilent 1100 HPLC日常维护日常维护总结总结107HPLC常用的色谱柱接头0.090in.0.130107108Agilent 1100 HPLC日常维护日常维护总结总结毛细管的区分Blue0.25mmColor i.d.Red0.12mmGreen0.17mm108Agilent1100HPLC日常维护总结毛细管108109Agilent 1100 HPLC日常维护日常维护总结总结109Agilent1100HPLC日常维护总结109110EMF早期维护预警早期维护预警维护信息预报维护信息预报(EMF)在维修时要更换磨损和受力的元件。在理想的情况下，零部件更换频率由仪器的使用强度和分析条件所决定，而不决定于预先设定的时间间隔。维护信息预报（EMF）的特点是可以监控仪器中特殊元件的使用，并且在超过预先设定的时间后立即把信息反馈给用户，在用户界面上可以看到提示的信息，提醒用户按计划进行维修。Agilent 1100 HPLC日常维护日常维护总结总结110EMF早期维护预警维护信息预报(EMF)Agilen110111Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断1100 指示灯的意义指示灯的意义.电源指示灯电源指示灯：位于每个模块的左下方。把电源打开后，该灯会亮绿 色。如果把电源打开后，此灯不亮，请检查是否有电源输入。在确认有电源的情况下，请与安捷伦联系。111Agilent1100HPLC 故障诊断1100指111112Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断状态指示灯状态指示灯：位于各自模块的右上方。状态指示灯的颜色：呈黄色：该仪器在未准备好状态(Not-ready)或正在自检。呈绿色：该仪器正在运行，采集数据(Run)。无颜色：该仪器已准备好等待运行(Pre-run)。呈红色：该仪器检测到有故障发生，仪器在错误状态(Error).112Agilent1100HPLC故障诊断状态指示灯：112113Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断通常仪器在开机后状态显示：脱气机：无颜色。脱气机在开机后应很快就能达到准备好的状态，且在正常情况下，该灯常灭。显示内部真空足够且密封性好。泵：显黄色，等待开泵。自动进样器：自检正常后应无颜色，等待进样命令。柱温箱：显黄色，等待开启控温命令。113Agilent1100HPLC故障诊断通常仪器在开113114Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断通常仪器在开机后状态显示：检测器.VWD:显黄色，等待开灯命令。DAD 与之相同。FLD:无颜色，因为荧光检测器在不亮灯的情况下可做化学发光检测，记住要做荧光检测一定要开灯。RID:显黄色，等待purge 参比池命令，RID一定要冲洗样品池和参比池直至两者光强度一致后才能准备好。114Agilent1100HPLC故障诊断通常仪器在开114115Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断当仪器出现错误并亮红灯时怎样检查提示信息。当仪器出现错误并亮红灯时怎样检查提示信息。一一 首先检查脱气机是否也亮红灯。首先检查脱气机是否也亮红灯。若是，请按正常程序关机然后检查脱气机后面是否有一遥控线(与标有remote的接口连接)。若有，关机后将之卸下然后单独再开脱气机，观察约8分钟后是否再现红色，如果是则脱气机有问题。否则脱气机应无问题。二二 若脱气机不亮红灯只有其它模块显红灯。若脱气机不亮红灯只有其它模块显红灯。1在工作站中分别左键单击各个红色的图标然后选择Not ready information(如果图标上无此选项，请单击菜单View然后再单击其下的Full menu)。2根据第1点做法直至找出错误信息不是不是提示shutdown的模块及其信息，根据此信息就可以查看可能导致此错误原因。若不明白此提示信息，请将其记录下来并与安捷伦联系。115Agilent1100HPLC故障诊断当仪器出现错115116Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断常见的错误信息及其解决方法：常见的错误信息及其解决方法：Shutdown:表示该模块并无问题，是由于其它模块出现错误而导致它 也亮红色。比如其它模块漏液或脱气机出错等。Leak:表示该模块发生漏液，此时无需关机，请检查该模块的漏液传感器周围是否有液体。如果是，先用纸将之吸干后点击system on再检查液体从何而来。如果不是，请与安捷伦联系，这种情况很可能是仪器内部元件有问题。造成漏液的主要原因：1 色谱柱未拧紧，多数发生再更换柱后。这时柱温箱会显示Leak。注意，柱温箱的漏液传感器在两加热块之间的中间位置。请用吸水纸确认，因为有时单用眼观察不易察觉。2 连接管路两端未拧紧，或连接管路断裂。116Agilent1100HPLC故障诊断常见的错误信116117Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断3 进样阀漏液，如自动进样器转子垫圈磨损造成漏液。4 泵漏液，开泵后将手伸入泵底部，可感到漏液。5 冷凝水的形成，如果使用柱温箱的降温功能，可能会有冷凝水生成从而使柱温箱显示漏液。这种情况下可取消柱温箱的检漏功能(在工作站中的instrument菜单下选择more column thermostat然后选择取消柱温箱的检漏功能).6 流动池漏液。117Agilent1100HPLC故障诊断3进样阀漏117118Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断Lamp current 和UV lamp ignited failed.可能原因：1 灯已严重老化。请在工作站中的diagnosis界面中查看灯的使用累积时间(viewdiagnosisEMF选择检测器).通常普通氘灯能用1000小时或以上，而长寿命氘灯能用2000小时或以上.2 灯连线未接好。3 检测器的主板和或电源损坏。注意，更换灯后建议将灯的使用时间回零：注意，更换灯后建议将灯的使用时间回零：在diagnosis中单击检测器图标，然后选择show module details 再单击右边的带有扳手的图标选择maintenance logbook entry，在项目中选择lamp replace,点ok然后在随后的提示中回答yes即可。118Agilent1100HPLC故障诊断Lampc118119Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断系统压力过高。系统压力过高。1 首先拧开排液阀，以纯水作流动相并设流速为5ml/min若压力超过10bar，应先更换排液阀的虑芯。2 若排液阀的虑芯没有堵塞，卸下色谱柱，然后用一两通代替色谱柱，以水作流动相设流速为1ml/min。通常压力不会超过20bar,否则系统可能有堵塞。3 若上述的压力超过20bar,我们可按照从后到前的原则，也就是说先卸下进流动池的连接管接头，开泵后，若压力正常则流动池堵塞若仍不正常可将这段管另一端也卸下，开泵后再观察压力情况。同样道理，我们就可以找到堵塞的地方。容易堵塞的地方：流动池入口管；自动进样器的针及针座；柱温箱容易堵塞的地方：流动池入口管；自动进样器的针及针座；柱温箱119Agilent1100HPLC故障诊断系统压力过高119120Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断系统压力过低，不稳定或没液流。系统压力过低，不稳定或没液流。1首先拧开排液阀，设流速12ml/min后开泵，观察有无液流，若有再仔细观察液流是否有倒吸现象如不能确定可用量筒测量流速的准确性。2如上述无液流，或流速不准多数为主动阀阀芯或主动阀故障，或泵有严重漏液。3怎样大致判断主动阀抑或其阀芯故障？可用以下方法：当泵运转时用手指轻捏主动阀主体，正常的主动阀能感到有节奏的脉动，如果没有，主动阀有问题。如果有则可以将主动阀阀芯取出进行超声波清洗，如仍有问题，可更换阀芯。注意，千万不注意，千万不要把整个主动阀放入超声波清洗这样会损坏主动阀。要把整个主动阀放入超声波清洗这样会损坏主动阀。4若上述流速准确但拧紧排液阀后压力不稳定，请仔细检查有无漏液。(通常漏液地方：各接口包括色谱柱，泵，进样阀等)120Agilent1100HPLC故障诊断系统压力过低120121Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断保留时间不稳定。保留时间不稳定。首先观察保留时间是否有规律的变化，并同时观察压力是否稳定 若压力稳定而保留时间呈有规律变化，多数是色谱柱未平衡好，特别是含有盐的流动相，需较长的时间去平衡。若压力稳定而保留时间无规律变化，请检查溶剂过滤头及真空腔是否有堵塞。再平衡色谱柱足够时间，如仍然不佳，可更换一色谱柱。若压力不稳定，请检查造成压力不稳定的因素，如：漏液，排液时间不足够，盐浓度过高导致盐析，主动阀比例阀内漏，等。121Agilent1100HPLC故障诊断保留时间不稳121122Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断峰面积重现性不好。峰面积重现性不好。首先观察压力是否稳定，以及观察峰面积变化是否有规律。若压力不稳定，请检查造成压力不稳定的因素，如：漏液，排液时间不足够，盐浓度过高导致盐析，主动阀比例阀内漏，等。若压力稳定但峰面积呈无规律变化，请检查样品是否足够，确认样品的稳定性，必要时用流动相作溶剂重新配制。检查进样阀是否漏液。等。若压力稳定且峰面积呈规律变化，多数为色谱柱未平衡好。122Agilent1100HPLC故障诊断峰面积重现性122123Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断基线不稳定。基线不稳定。基线漂移：色谱柱未平衡好，柱温未稳定，流动相变化，等。基线噪音：可能原因是：流动池有气泡，流动 池被污染，对紫外检 测器可将流动池移走即可确认。色谱柱和或系统受污染。灯能量不足，光路脏。外界因素影响，如电源，温度和湿度（G1315A），震动，等。123Agilent1100HPLC故障诊断基线不稳定。123124Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断工作站无法与仪器通讯。工作站无法与仪器通讯。安捷伦液相色谱与计算机有两种通讯方式：1.LAN 连接方式：液相与计算机用网线连接，两者直接连接时用交 叉网线。若通过集线器或交换机的话则使用平行网线。2.GPIB由于不同的连接方式处理方法有较大区别，所以先检查您的仪器用何种方式连接。首先检查线缆是否连接好，必要时可重新连接一遍。124Agilent1100HPLC故障诊断工作站无法与124125Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断GPIB125Agilent1100HPLC故障诊断GPIB125126Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断网线：126Agilent1100HPLC故障诊断网线：126127Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断1对于用网线对于用网线(LAN)方式连接：方式连接：在仪器与计算机都打开的情况下，先分别查看仪器和计算机的IP地址：计算机IP地址查看方法：右键点击桌面上的网络邻居图标然后选最后一项，即属性(properties)。在继而出现的画面中右键点击本地连接(local area connection),选择属性(properties),然后在弹出的窗口中双击Internet Protocal(TCP/IP),这样就能够知道计算机的IP地址。例如：10.10.10.1 请注意在这过程中若本地连接(local area connection)图标显灰色你应先右键点击该图标然后选enable 才能继续后面的步骤。另外在双击Internet Protocal(TCP/IP)后，请检查是否使用了DHCP，如果是，请禁用之，工作站只支持固定IP地址。127Agilent1100HPLC故障诊断对于用网线(127128Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断仪器的IP地址查看方法：在工作站关闭的情况下按如下方法可得知其IP地址：点击startprogramschemstationsconfiguration editor.在弹出的窗口可看到该地址。在得到仪器和计算机的IP地址且它们电源打开的情况下，点击桌面中的startrun在空白处键入“command”即可进入DOS画面。在提示符后输入ping 10.10.10.1(如10.10.10.1为计算机的地址，且ping 与之需有一空格),当输入后，会得到响应信息，如能相通则会显示：reply from.;如不能相通则会显示其它的信息。同样操作检查仪器的IP是否正常。128Agilent1100HPLC故障诊断仪器的IP地128129Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断2 对于使用对于使用GPIB的连接方式的连接方式 首先检查仪器的地址设定：在工作站关闭的情况下按如下方法可得知其地址：点击startprogramschemstationsconfiguration editor.在弹出的窗口可看到该地址。然后检查GPIB电缆与何模块相连。液相各模块的缺省GPIB地址为1050 Variable Wavelength Detector101050 Isocratic&Quaternary Pumps161050 Multiple Wavelength Detector171050 Diode Array Detector 171050 Autosampler 181040 Diode Array Detector 151046 Fluorescence Detector 121049 Electrochemical Detector 11129Agilent1100HPLC故障诊断2对于使用129130Agilent 1100 HPLC故障诊断故障诊断G1310 Isocratic Pump22G1311 Quaternary Pump 22G1312 Binary Pump22G1313 Autosampler28G1314 Variable Wavelength Detector 24G1315 Diode Array Det