蝴蝶兰组培课件

蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰的组织培养主讲人：郑宇华主讲人：郑宇华兰科花卉组织培养兰科花卉组织培养兰科植物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖生产，只有用组织培养方法进行组织培养方法进行大量繁殖。蕙兰春兰西神梅 蝴蝶兰产业发展的基本概况 蝴蝶兰原产我国台湾,以及东南亚的菲律宾、泰国、马来西亚、印度等地的南亚热带雨林区,我国的台湾、云南和西藏的南部是其自然分布的北限。蝴蝶兰全部为附生植物,原生种约70多个,但经近百年来的杂交育种,品种已上万种,成为花卉世界的一个大家族。1、茎尖 兰花组织培养大多用茎尖和花序上的芽，因为叶片培养的植株变异较大，难以控制。以茎尖培养，要选择生长旺盛的植株，切下茎顶端23厘米长的一段，若茎长而巨大，亦可切下58厘米或更长。先用无菌水清洗干净，除去残留的鞘、叶基等，再在70%75%酒精中浸泡10 30秒，取出后在5%10%漂白粉溶液中浸10 15分钟，再用无菌水冲洗干净。然后在无菌解剖镜下剥掉幼叶，用小刀切取小芽块。蝴蝶兰蝴蝶兰.接种 茎尖接种以固体培养基为好，但因属而异，如蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则用固体培养基进行继代培养，而卡德兰属和石斛属这一类易变褐枯死的属，以在液体培养基为好。.继代培养接种后12个月培养的茎尖即可形成原球茎球状体，以后即发芽生根长叶。应在其发芽前把它切成小块进行转移，让它继续不断地形成原球茎球状体。这样连续的进行继代培养，短时间可以得到大量的原球茎球状体。兰花培养成功的关键，首先是形成无性繁殖系原球茎。国兰原球茎的增殖2、花梗侧芽的培养(1)采芽 将带腋芽的花梗进行冲洗，用10的漂白粉溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5的漂白粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净。(2)带腋芽花梗组织，接种到培养基上。当兰花开花约一个月后，大多选取已开有少数花的健壮花序，切取带有花梗和芽的节段(3)培养基和培养条件诱芽培养基：MS+BA3诱导原球茎：MS+BA5+NAA0、5增殖：MS+BA3+NAA0、2+活性炭1.5克/L生根：1/2MS+BA1+NAA0.5PH：5.4培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒温25。生根之前可以进行过渡培养，不加激素。试管苗的移栽用苔藓作基质 培养意义 兰花的种子极小，一个朔果中有1300400000粒种子。薄薄的种皮包着分化不完全的胚，没有胚乳，所以与其他植物种子不同，很不容易发芽。通过无菌播种，能在短期内获得大量无菌苗，并已成为工厂化育苗的重要途径，同时也是杂交育种培育新品种的重要途径。在实践上有很大的价值。因兰花有性杂交很容易，所以通过无菌发芽培养，简化了发芽育种技术，也就促进了兰花的杂交育种工作。原 生 种 蝴 蝶 兰杂种蝴蝶兰親本：P.Princcess Kaiulani親本：P.Ambotrana人工授粉时,首先要选好亲本,雌花最好的授粉时间是开花后 34d。授粉时先将母本的花粉块除去,再将父本的花粉块用小镊子镊起,轻轻地放在母本的柱头上,因柱头和花粉块上都有粘液,花粉在柱头上粘得牢,不必担心花粉块脱落。一般授粉后不需要套袋，用铅笔写好标牌,挂在授粉母株上。晴天气温较高时,授粉后结实率可达 95%以上。1 1）蝴蝶兰授粉 当蝴蝶兰果实呈黄绿色时,要及时采收,否则易裂果。蝴蝶兰果实为萌果,果实大小长约 6.512.5 cm,直径 0.71.6cm,每个果实中含种胚上万至几十万粒,兰花种子具有未分化的特点,只是一团未分化的胚细胞,胚小,种皮宽大,呈纺锤型，没有贮藏营养物质的组织,所以 在自然条件下很难萌发,需要在无菌条件下播种育苗。2）蝴蝶兰果实无菌处理蝴蝶兰无菌播种配方（简称A培养基PH:5.5）药品用量（g/L）花宝一号（Hyponex7-6-19)3.0蛋白胨2.0肌醇0.1磷酸三钙0.2香蕉100.0蔗糖20.0琼脂7.0 果实采收后灭菌。将果实取出放在无菌纸上,用手术刀剖开果实取出粉状种胚,将种胚均匀的接种到灭过菌的培养基上。（左图为及时采收果实，右图为采收不及时的裂果）萌芽培养基配方（g/L）药品用量药品用量花宝一号1.5香蕉100.0花宝二号1.5糖20.0蛋白胨2.0琼脂8.0肌醇0.1PH值5.2磷酸三钙0.2KC 培养基（mg/L）药品用量药品用量KH 2PO4250MnSO4.4H2O100.0Ca(NO3)2.4H2O1000蛋白胨2000(NH4)2SO4500糖20000FeSO4.7H2O25琼脂70008000MgSO4.7H2O250PH值5.23）蝴蝶兰种胚培养中间转接蝴蝶兰由播种到移栽过程蝴蝶兰由播种到移栽过程无菌播种 10d 变成黄绿色 20d 变为绿色 10d 米粒大小 50d 萌芽90d 长出2片叶30d 苗高2cm 50d 苗高37cm、35条根，可移栽。生根苗移栽前,连同培养瓶一起从培养室转移到炼苗棚,放置1周。）蝴蝶兰生根苗的移栽打开瓶口,炼苗23d 后移栽。移栽时小心取出生根苗,洗去根部培养基,移栽到基质是水苔的苗盘中。空气温度保持在80%90%，遮光率50%,光照强度 10000Lx左右,环境温度控制在22 26。经 12 个月的管理,待小苗长出12对新叶时移栽到营养钵中。随着苗子的成长,逐渐更换大的营养钵。在小苗管理期间要经常喷水,但水苔不能积水或过湿,防止烂根。每隔 23 周追1次稀薄液体肥料,定期喷洒杀菌剂,预防病害发生。当开花时根据育种目标选择优良植株，然后进行无性繁殖。蝴蝶兰生长情况