有机氯农药残留量的测定课件

广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验71 有机氯农药残留量有机氯农药残留量的测定的测定有机氯农药残留量的测定课件广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验71 有机氯农药残留量的测定有机氯农药残留量的测定71 有机氯农药残留量的测定有机氯农药残留量的测定711 定性检验定性检验1焰色法焰色法 1，原理，原理 此法是利用样品中的有机氯受热分解为氯化氢，此法是利用样品中的有机氯受热分解为氯化氢，它与铜勺表面的氧化铜作用，生成挥发性的氯化铜，它与铜勺表面的氧化铜作用，生成挥发性的氯化铜，在无色火焰中呈绿色。用以鉴别样品提取液中有机在无色火焰中呈绿色。用以鉴别样品提取液中有机氯农药的存在。氯农药的存在。71 有机氯农药残留量的测定71 有机氯广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验2)操作步骤操作步骤取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面覆盖一层黑色氧化铜为止。取少量怀疑污染有机覆盖一层黑色氧化铜为止。取少量怀疑污染有机氯农药的食品，用乙醚浸渍振摇并过滤。将滤液氯农药的食品，用乙醚浸渍振摇并过滤。将滤液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，呈绿色逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，呈绿色火焰者，说明食品被有机氯农药火焰者，说明食品被有机氯农药(包括包括DDT及六及六六六六六)污染。若样品中农药含量很低，可将乙醚污染。若样品中农药含量很低，可将乙醚提取液浓缩蒸干，用少量乙醇溶解残留物，然后提取液浓缩蒸干，用少量乙醇溶解残留物，然后按上法检验，本法最低检出范围为按上法检验，本法最低检出范围为1ug有机氯。有机氯。2)操作步骤广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验2亚铁氨化银试纸法亚铁氨化银试纸法 1)原理原理 此法是根据有机氯农药与碳酸钠灼烧生成氯化钠。与硫此法是根据有机氯农药与碳酸钠灼烧生成氯化钠。与硫酸作用生成氯化氢。酸作用生成氯化氢。氯化氢与亚铁氰化银试纸反应，在硫酸铁存在下产生蓝色，氯化氢与亚铁氰化银试纸反应，在硫酸铁存在下产生蓝色，可鉴别有机氯的可鉴别有机氯的存在。存在。2)操作步骤操作步骤 (1)亚铁氰化银试纸亚铁氰化银试纸 称取硝酸银称取硝酸银2.5g、亚铁氰化钾、亚铁氰化钾1.3g，分别溶于，分别溶于25mL水中。将硝酸银溶液缓慢加到亚铁氰水中。将硝酸银溶液缓慢加到亚铁氰化钾溶液中，离心分离，将沉淀物反复用水洗涤至不含化钾溶液中，离心分离，将沉淀物反复用水洗涤至不含银离子为止。在沉淀中加浓氨水银离子为止。在沉淀中加浓氨水25mL，摇匀后，将滤，摇匀后，将滤纸浸人悬浮氨溶液中纸浸人悬浮氨溶液中5min，取出试纸用热风吹干，备，取出试纸用热风吹干，备用。用。2亚铁氨化银试纸法 1)原理广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验(2)检测检测 取取1009左右待测磨碎样品，置于三角烧左右待测磨碎样品，置于三角烧瓶中，加入瓶中，加入20mL乙醚，振摇后，分出乙醚层。乙醚，振摇后，分出乙醚层。置水浴上挥发至置水浴上挥发至04mL，移人小试管中，加入一，移人小试管中，加入一勺碳酸钠，在水浴上蒸干、冷却。勺碳酸钠，在水浴上蒸干、冷却。取亚铁氰化银试纸条，在取亚铁氰化银试纸条，在Ig/L硫酸铁溶液中浸湿硫酸铁溶液中浸湿后，悬挂于橡皮塞下。向试管内残渣小心滴人浓后，悬挂于橡皮塞下。向试管内残渣小心滴人浓硫酸硫酸2一一3滴，迅速将挂有试纸的橡皮塞塞紧小试滴，迅速将挂有试纸的橡皮塞塞紧小试管，将试管移入水浴内加热管，将试管移入水浴内加热smin，如果试纸变，如果试纸变为蓝色，表示样品中有有机氯农药存在。试验中为蓝色，表示样品中有有机氯农药存在。试验中应防止无机氯的干扰。应防止无机氯的干扰。(2)检测 取1009左右待测磨碎样品，置于三角烧瓶中广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验712 定量检验定量检验、气相色谱法、气相色谱法(GB/T500919一一1996)1)原理原理 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。不同异构体和代谢物可同时分别测定。出峰顺序出峰顺序:-666、666、-666、-666、p.p-DDE、.p-DDT、.p-DDD、.-DDT。712 定量检验、气相色谱法(GB/T5009广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验 2)仪器和试剂仪器和试剂(1)仪器仪器 小型粉碎机，小型绞肉机，组织捣碎机，电动振荡器，旋小型粉碎机，小型绞肉机，组织捣碎机，电动振荡器，旋转浓缩蒸发器，吹氮浓缩器，气相色谱仪转浓缩蒸发器，吹氮浓缩器，气相色谱仪:具有电子捕获检测器具有电子捕获检测器(ECD)。(2)试剂试剂 丙酮。丙酮。正己烷正己烷;石油醚石油醚:沸程沸程30一一60 苯苯;硫酸硫酸;无水硫酸钠无水硫酸钠;硫酸钠溶液硫酸钠溶液(209/L);六六六、滴滴涕标准溶液六六六、滴滴涕标准溶液:准确称取甲、乙、丙、丁六六六四准确称取甲、乙、丙、丁六六六四种异构体和种异构体和p.p-滴滴涕、滴滴涕、p.p-滴滴滴、滴滴滴、p.p-滴滴伊、滴滴伊、-滴滴滴滴涕涕(-666、-666、-666、-666、p.p-DDT、p.p-DDD、p.p-DDE、-DDT)各各10.0ug，溶于苯，分别移人，溶于苯，分别移人100mL容容量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农药量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农药100.0ug，作为储备，作为储备液存于冰箱中。液存于冰箱中。六六六、滴滴涕标准使用液六六六、滴滴涕标准使用液:将上述标准储备液以己烷稀释至将上述标准储备液以己烷稀释至适宜浓度，一般为适宜浓度，一般为0.01ulg/mL。2)仪器和试剂(1)仪器 小型粉碎机，小型绞肉机，组织捣广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验 3)操作步骤操作步骤(1)提取提取 称取具有代表性的样品称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的蔬适用于生的及烹调加工过的蔬菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类)约约2009，加适量，加适量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀浆水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀浆2.005.00g，于，于50mL具塞三角瓶中，加具塞三角瓶中，加10I5mL丙酮，在振荡器上振丙酮，在振荡器上振荡荡30min，过滤于，过滤于100mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤4次，每次次，每次4mL，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并滤，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并滤液液3040mL，加石油醚，加石油醚20mL，摇动数次，放气。振摇，摇动数次，放气。振摇lmin，加，加20mL硫酸钠溶液硫酸钠溶液(20g/L)，振摇，振摇lmin，静置，静置分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦千分液漏斗颈内外的分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦千分液漏斗颈内外的水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10g无水硫酸无水硫酸钠的漏斗，滤入钠的漏斗，滤入50mL三角瓶中。再以少量石油醚分三角瓶中。再以少量石油醚分3次次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并人滤液中，将石洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并人滤液中，将石油醚浓缩，移人油醚浓缩，移人l0mL具塞试管中，定容至具塞试管中，定容至5.0mL或或l0.0mL。3)操作步骤(1)提取广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验 称取具有代表性的乳样品称取具有代表性的乳样品2.00g，于，于l0mL具塞试管中，具塞试管中，加加4mL丙酮，振摇丙酮，振摇lmin，加，加4mL石油醚石油醚,振摇振摇lmin。静。静置分层。将上层石油醚溶液移人另一置分层。将上层石油醚溶液移人另一25mL具塞试管中，具塞试管中，再加再加lmL石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合并于并于25mL试管中，重复试管中，重复2次。再加与石油醚等体积的硫次。再加与石油醚等体积的硫酸钠溶液酸钠溶液(20g/L)，摇混，分层。将上层石油醚溶液取，摇混，分层。将上层石油醚溶液取出经无水硫酸钠滤人出经无水硫酸钠滤人l0mL具塞试管中，再加具塞试管中，再加lmL石油醚石油醚于原于原25mL试管中，不摇。取出上层液合并于试管中，不摇。取出上层液合并于l0mL试管试管中，重复两次。提取液定容至中，重复两次。提取液定容至4.0mL。称取具有代表性的均匀食用油样品称取具有代表性的均匀食用油样品0.50g以石油醚溶以石油醚溶解于解于10mL试管中，定容至试管中，定容至10.0mL。(2)净化净化5.0mL提取液加提取液加0.50mL浓硫酸，盖上试管塞。浓硫酸，盖上试管塞。振摇数次后，打开塞子放气，然后振摇振摇数次后，打开塞子放气，然后振摇0.5min，于，于1600r/min，离心，离心l5min，上层清液，供气相色谱法分，上层清液，供气相色谱法分析用析用 称取具有代表性的乳样品2.00g，于l0mL具塞试管中，广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验(3)测定测定气相色谱参考条件气相色谱参考条件 色谱柱色谱柱:内径内径34mm，长，长1.22m的玻璃柱，内的玻璃柱，内装涂以装涂以OV-7(15g/L)和和QF-1(20g/L)的混合固定的混合固定液的液的80100目硅藻土。目硅藻土。Ni-电子捕获检测器电子捕获检测器:汽化室温度汽化室温度:215;色谱柱色谱柱温度温度;195;检测器温度检测器温度:225;载气载气(氮气氮气)流速流速:90mL/min;纸速纸速:0.5cm/min。电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定量，选择样品进样量使之适合各组分的线性范围。量，选择样品进样量使之适合各组分的线性范围。根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制备各组分的标准曲线，从而计算出样品中的含量。备各组分的标准曲线，从而计算出样品中的含量。(3)测定气相色谱参考条件广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验六六六、滴滴涕及其异构体含量按下式计算。六六六、滴滴涕及其异构体含量按下式计算。式中：式中：X1样品中六六六或滴滴涕及其异构物体的单样品中六六六或滴滴涕及其异构物体的单一含量，一含量，mg/kg;A1样品中六六六或滴滴涕及其异构物体的单一含样品中六六六或滴滴涕及其异构物体的单一含量，量，ng;V1样品净化液体积，样品净化液体积，mL;V2样液进样体积，样液进样体积，uL;m1样品质量，样品质量，g。4)色谱图色谱图六六六、滴滴涕及其异构体含量按下式计算。广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验六六六、滴滴涕色谱图六六六、滴滴涕色谱图1、-666、2、-666、3、-666、4、-666、5、p.p-DDE、6、o.p-DDT、7p.p-DDD、8、p.p-DDT有机氯农药残留量的测定课件广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验2、薄层色谱法、薄层色谱法（1）原理）原理 样品中六六六、滴滴涕经有机溶剂提取，并经样品中六六六、滴滴涕经有机溶剂提取，并经硫酸处理，除去干扰物质，浓缩，点样展开后，硫酸处理，除去干扰物质，浓缩，点样展开后，用硝酸银显色，经紫外线照射生成棕黑色斑点，用硝酸银显色，经紫外线照射生成棕黑色斑点，与标准比较，可概略定量。与标准比较，可概略定量。2、薄层色谱法（1）原理广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验（2）仪器和试剂）仪器和试剂(I)仪器仪器 薄层板涂布器。玻璃板薄层板涂布器。玻璃板:5cm20cm。展开槽。展开槽:内长内长25cm，宽，宽6cm，高，高4cm。玻璃喷雾器。紫外线杀。玻璃喷雾器。紫外线杀菌灯菌灯:l5W。微量注射器或血色素吸管。微量注射器或血色素吸管。(2)试剂试剂 氧化铝氧化铝G:薄层色谱用。薄层色谱用。硝酸银溶液硝酸银溶液(10g/L)硝酸银显色液硝酸银显色液:称取硝酸银称取硝酸银0.050g溶于数滴水中，加溶于数滴水中，加苯氧乙醇苯氧乙醇10mL，加，加30%(体积分数体积分数)过氧化氢溶液过氧化氢溶液10mL，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱内保存。，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱内保存。六六六、滴滴涕标准使用液六六六、滴滴涕标准使用液:各吸取六六六、滴滴涕各吸取六六六、滴滴涕标准溶液标准溶液(100ug/mL)2.0mL，分别移人，分别移人l0mL容量瓶中，容量瓶中，各加苯至刻度，混匀。每毫升含农药各加苯至刻度，混匀。每毫升含农药20ug。（2）仪器和试剂(I)仪器 薄层板涂布器。玻璃板:5c广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验（3）操作步骤）操作步骤 (1)提取提取 同上述气相色谱法。同上述气相色谱法。(2)净化净化l0mL提取液浓缩至提取液浓缩至1mL，加，加0.lmL浓硫酸，盖上试管塞振摇数下，打浓硫酸，盖上试管塞振摇数下，打开塞子放气，再振摇开塞子放气，再振摇0.5min，于，于1600r/min，离心，离心l5min。上层清液供薄层色。上层清液供薄层色谱分析。谱分析。(3)测定测定 薄层板的制备薄层板的制备 称取氧化铝称取氧化铝G4.5g，加，加1mL硝酸银溶液硝酸银溶液(l0g/L)及及6mL水，研水，研磨至糊状，立即涂在三块磨至糊状，立即涂在三块5cm20cm的薄层板上，涂层厚度的薄层板上，涂层厚度0.25mm，于，于1000烘烘0.5h，置于干燥器中，避光保存。，置于干燥器中，避光保存。点样点样 离薄层板底端离薄层板底端2cm处，用针划一标记。在薄层板上点处，用针划一标记。在薄层板上点110uL样液和样液和六六六、滴滴涕标准溶液，一块板可点六六六、滴滴涕标准溶液，一块板可点34个。中间点标准溶液，两边点样品个。中间点标准溶液，两边点样品溶液。也可用滤纸移样法点样。溶液。也可用滤纸移样法点样。展开展开 在展开槽中预先倒人在展开槽中预先倒人l0mL丙酮丙酮-己烷己烷(1十十99)或丙酮或丙酮-石油醚石油醚(1十十99)。将经过点样的薄层板放大槽内。当溶剂前沿距离原点将经过点样的薄层板放大槽内。当溶剂前沿距离原点1012cm时取出，自然时取出，自然挥干。挥干。显色显色 将展开后的薄层板喷以将展开后的薄层板喷以10mL硝酸银显色液，干燥后距紫外灯硝酸银显色液，干燥后距紫外灯8cm处照处照1020min，六六六、滴滴涕等全部显现棕黑色斑点。，六六六、滴滴涕等全部显现棕黑色斑点。（3）操作步骤 (1)提取广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验4)结果计算结果计算 式中式中:X2一一样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代射物一一样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代射物的单一含量，的单一含量，mg/kg;A2一一被测定用样液申六六六或滴滴涕及其异构体或代一一被测定用样液申六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量谢物的单一含量ngV3一一样品浓缩液总体积，一一样品浓缩液总体积，mLV4一一点板样液体积，一一点板样液体积，uLm2一一样品质量，一一样品质量，g结果：以平行测定的算术平均值的二位有效数来表达。允结果：以平行测定的算术平均值的二位有效数来表达。允许相对误差许相对误差15%。4)结果计算 广西工商职业技术学院精品课程广西工商职业技术学院精品课程 食品分析与检验食品分析与检验有机氯农药残留量的测定课件