腺苷脱氨酶活性测定对临床疾病的诊断意义课件

腺苷脱氨酶活性测定腺苷脱氨酶活性测定对临床疾病的诊断意义对临床疾病的诊断意义1 1腺苷脱氨酶活性测定 对临床疾病的诊断意义11.1概念腺苷脱氨酶（腺苷脱氨酶（adenosinedeaminase，ADA）是嘌呤核）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含基酶，每分子至少含2个活性巯个活性巯基。人基。人ADA基因位于基因位于20号染色号染色体上体上，并呈现出遗传多态性现，并呈现出遗传多态性现象。象。2 21.1概念 腺苷脱氨酶（adenosine de1.2分布情况分布情况ADA广泛分布于人体各组织广泛分布于人体各组织中，以小肠黏膜中，以小肠黏膜、胸腺、脾和其他胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。和骨胳肌等处含量较低。血液中血液中ADA主要存在于红细主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞，其活性约胞、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的为血清的4070倍，倍，T淋巴细胞比淋巴细胞比B淋巴细胞中淋巴细胞中ADA活性更高。活性更高。3 31.2分布情况 ADA广泛分布于人体各组织1.3同工酶同工酶 ADA同工酶有同工酶有3种，分别种，分别为：为：ADA1，ADA1+CP和和ADA2。4 41.3同工酶 ADA同工酶有3种，分别为：1.3.1同工酶同工酶ADA1ADA1分子量为分子量为35kD,为一种单链蛋为一种单链蛋白质白质,保证了酶作用底物腺苷及保证了酶作用底物腺苷及2-脱氧脱氧腺苷含量的下调腺苷含量的下调,一个较低水平的一个较低水平的2-脱氧脱氧腺苷对人体细胞发挥适当生理功能十分腺苷对人体细胞发挥适当生理功能十分有益有益.ADA1也存在于红细胞内也存在于红细胞内,红细胞可红细胞可通过某种有效的机制获取通过某种有效的机制获取2-脱氧腺苷并脱氧腺苷并使其内在化使其内在化.因此因此,红细胞对循环的红细胞对循环的2-脱氧腺苷形成了一个透析系统脱氧腺苷形成了一个透析系统,以保护以保护有核细胞不被过多的有核细胞不被过多的2-脱氧腺苷损伤脱氧腺苷损伤.5 51.3.1同工酶ADA1 ADA1分子量细胞内细胞内ADA1存在的重要性也存在的重要性也通过先天性通过先天性ADA1缺乏患者的免疫缺乏患者的免疫无反应性显露出来无反应性显露出来,这是由于这些这是由于这些患者免疫细胞内的患者免疫细胞内的2-脱氧腺苷内稳脱氧腺苷内稳定状态失衡造成的定状态失衡造成的.其最适其最适pH为为7.07.5,它对腺苷及它对腺苷及2-脱氧腺苷脱氧腺苷的亲和力相等的亲和力相等,使使ADA1在生物体内在生物体内具有很高的脱氨效应。具有很高的脱氨效应。6 6 细胞内ADA1存在的重要性也通过先天性A1.3.2同工酶同工酶ADA1+CP ADA1+CP分子量为分子量为280kD，实，实际上是由际上是由2条单键的条单键的ADA1分子和不分子和不具酶活力的具酶活力的200kD结合蛋白结合而结合蛋白结合而成。成。7 71.3.2同工酶ADA1+CP 1.3.3同工酶同工酶ADA2ADA2分子量为分子量为100kD，它，它仅存于单核仅存于单核-巨噬细胞内，最适巨噬细胞内，最适pH为为6.5，它对，它对2-脱氧腺苷的脱氧腺苷的亲和力较弱，使亲和力较弱，使ADA2在生物体在生物体内的脱氨作用极弱内的脱氨作用极弱。8 81.3.3同工酶ADA2 ADA2分子量为 3种同工酶具有不同的动力学性质种同工酶具有不同的动力学性质:ADA1和和ADA1+CP最适最适PH为为5.58.0，对腺，对腺苷的苷的Km值为值为50umol/L。对。对2-脱氧腺苷与腺脱氧腺苷与腺苷的活性之比为苷的活性之比为0.8，两者均对红，两者均对红-9-(2-羟基羟基-3-壬烷基壬烷基)腺嘌呤抑制作用敏感。腺嘌呤抑制作用敏感。ADA2相对相对于前两种同工酶具有较低的最适于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高、较高的催化腺苷的催化腺苷Km值值(2000umol/L)以及较低的以及较低的2-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值脱氧腺苷与腺苷的活性之比值(0.2)，对红，对红-9-(2-羟基羟基-3-壬烷基壬烷基)腺嘌呤抑制作用不敏感。腺嘌呤抑制作用不敏感。9 9 3种同工酶具有不同的动力学性质:ADA ADA同工酶在各类组织和细胞同工酶在各类组织和细胞中的分布不同，中的分布不同，ADA1在脾脏、红在脾脏、红细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞中占优势，粒细胞中占优势，ADA1+CP在肝在肝脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优势，势，ADA2只存在于单核细胞，目只存在于单核细胞，目前在其他组织细胞中尚未检出。前在其他组织细胞中尚未检出。1010 ADA同工酶在各类组织和细胞中的分布不同1.4代谢反应代谢反应ADA是一种与免是一种与免疫相关的酶，可特异疫相关的酶，可特异性催化腺嘌呤核苷产性催化腺嘌呤核苷产生不可逆脱氨反应，生不可逆脱氨反应，转变为次黄嘌呤核苷，转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为代谢缓和终产物为尿尿酸酸,经肾脏排出体外。经肾脏排出体外。11111.4代谢反应 ADA是一种与免疫相关的酶，可2临床意义临床意义腺苷脱氨酶是一种与机体细腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、体液中的代谢酶。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床免疫功能的研究日趋受到临床重视。重视。12122 临床意义 腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免2.1肝胆疾病的诊断肝胆疾病的诊断ADA在肝实质损害时明显升高，血清在肝实质损害时明显升高，血清中中ADA主要来源于肝脏，因为它是肝细胞主要来源于肝脏，因为它是肝细胞的胞浆酶，所以任何原因造成的肝细胞损的胞浆酶，所以任何原因造成的肝细胞损伤，其肝细胞膜的通透性就会增强，致使伤，其肝细胞膜的通透性就会增强，致使血清中的血清中的ADA酶的活性升高，故该酶可以酶的活性升高，故该酶可以作为反映肝实质损伤的指标作为反映肝实质损伤的指标,可作为肝功能可作为肝功能常规项目之一，与常规项目之一，与ALT或或-GT等组成肝酶等组成肝酶谱。谱。13132.1 肝胆疾病的诊断 ADA在肝实质损2.11肝损伤肝损伤 急性肝炎急性肝炎(AH)时时ALT几乎明显升高，几乎明显升高，ADA仅轻、中度升高，且阳性率明显低于仅轻、中度升高，且阳性率明显低于AST和和ALT。因此。因此ADA在诊断急性肝损伤在诊断急性肝损伤时有一定价值，但并不优于时有一定价值，但并不优于ALT。重症肝炎。重症肝炎发生酶胆分离时，尽管发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而不高，而ADA明显升高。急性肝炎后期，明显升高。急性肝炎后期，ADA长高率高长高率高于于ALT，其恢复正常时间也较后者为迟，因，其恢复正常时间也较后者为迟，因此，此，ADA较较ALT、GGT更能反映急性肝损更能反映急性肝损伤，并有助于探测急性肝炎的残留病变和伤，并有助于探测急性肝炎的残留病变和肝脏病进展。肝脏病进展。ALT恢复正常而恢复正常而ADA持续升持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。14142.11肝损伤 急性肝炎(AH)时ALT几乎2.1.2慢性肝病慢性肝病 在反映慢性肝损伤时在反映慢性肝损伤时ADA较较ALT为优。慢为优。慢性肝炎性肝炎(CH)、肝硬化和肝细胞癌患者血清、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高活性显著升高.其阳性率达其阳性率达85%90%，而肝硬，而肝硬化时化时ALT多正常或轻度升高多正常或轻度升高,故故ADA活性测定可活性测定可作为慢性肝病的筛选指标作为慢性肝病的筛选指标.失代偿期肝硬化失代偿期肝硬化ADA活性明显高于代偿期肝硬化活性明显高于代偿期肝硬化,因而可判断慢性肝因而可判断慢性肝病的程度。另外，慢性活动性肝炎病的程度。另外，慢性活动性肝炎(CAH)ADA活性明显高于慢性迁延性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎(CPH)，故可用，故可用于二者的鉴别诊断。于二者的鉴别诊断。15152.1.2慢性肝病 在反映慢性肝损伤时A2.1.3肝纤维肝纤维 肝硬化患者血清肝硬化患者血清ADA活性明显高于急性黄疸活性明显高于急性黄疸型肝炎、慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝型肝炎、慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝内多发性占位、阻塞性黄疸及对照组，慢性活动内多发性占位、阻塞性黄疸及对照组，慢性活动性肝炎者也明显高于慢性迁延性肝炎者及对照组，性肝炎者也明显高于慢性迁延性肝炎者及对照组，表明表明ADA活性差异关键在于活性差异关键在于肝纤维化程度肝纤维化程度，而与，而与肝细胞损害关系不大。实验得出，用肝硬化的肝肝细胞损害关系不大。实验得出，用肝硬化的肝组织切片标本作肝纤维化程度的分级评分观察，组织切片标本作肝纤维化程度的分级评分观察，发现积分均值发现积分均值1.5者者ADA阳性率阳性率(38.46%)显著低显著低于于1.5者者(86.96%)，证实，证实ADA活性与肝纤维化程活性与肝纤维化程度有关。随肝纤维化程度增加，度有关。随肝纤维化程度增加，ADA活性逐渐增活性逐渐增加，即肝硬化加，即肝硬化慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎慢性迁延性肝炎。慢性迁延性肝炎。16162.1.3肝纤维 肝硬化患者血清ADA活2.1.4评价肝硬化预后评价肝硬化预后 肝硬化患者肝硬化患者ALT活性绝大多数正活性绝大多数正常或轻度上升，而近常或轻度上升，而近90%的病例的病例ADA明显上升，其间半数超过明显上升，其间半数超过40U/L。且。且若患者血清若患者血清ADA长期稳定或有较小波长期稳定或有较小波动，病情则稳定；若在短期内迅速降动，病情则稳定；若在短期内迅速降低，则病情随之恶化，进入失代偿期。低，则病情随之恶化，进入失代偿期。故故ADA是评价肝硬化预后的一个好指是评价肝硬化预后的一个好指标。标。17172.1.4评价肝硬化预后 肝硬化患者AL2.1.5黄疸黄疸有人对有人对28例肝细胞性黄疸和例肝细胞性黄疸和19例阻塞性黄疸患例阻塞性黄疸患者者ADA和其他酶活性进行比较，发现和其他酶活性进行比较，发现ADA鉴别意鉴别意义最大，而其他酶在两种黄疸之间无明显差异。另义最大，而其他酶在两种黄疸之间无明显差异。另有文献报道，阻塞性黄疸血清有文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性及阳性率活性及阳性率（16.7%），均明显低于肝细胞性黄疸（），均明显低于肝细胞性黄疸（57.3%）及肝硬化伴黄疸者（及肝硬化伴黄疸者（80.9%），且重叠较小，尤其），且重叠较小，尤其与与-GT、ALP和和5-核苷酸酶（核苷酸酶（5-NT）同时测定，）同时测定，如三项指标均增高，而如三项指标均增高，而ADA正常则更支持阻塞性黄正常则更支持阻塞性黄疸的诊断。疸的诊断。18182.1.5黄疸 有人对28例肝细胞性黄疸和 ADA 也可作为肝细胞性黄疸与阻塞性黄疸的鉴别诊断。对于急性黄疸患者，检查ADA、AL T、-GT，若均增高,则为肝细胞性黄疸,诊断灵敏度为90.0%,特异性为86.4%;若AL T 正常或增高，-GT 增高,ADA 正常,则为阻塞性黄疸,诊断灵敏度为86.4%,特异性为90.0%;若AL T、-GT 均增高，ADA 35 U/L，则可排除阻塞性黄疸的诊断。1919 ADA 也可作为肝细胞性黄疸与阻塞性黄疸2.1.6其他 阿米巴肝脓肿阿米巴肝脓肿(ALA)ADA活性明显减少。活性明显减少。20202.1.6其他 阿米巴肝脓肿(ALA)ADA活性明显减212121 总之，总之，ADA是肝损害的一个良好是肝损害的一个良好指标，其特点是：反映肝脏残存病变指标，其特点是：反映肝脏残存病变较较ALT优，优，ALT恢复正常而恢复正常而ADA持持续升高的急性肝炎易复发或转为慢性。续升高的急性肝炎易复发或转为慢性。慢性肝病尤其是肝硬化时，慢性肝病尤其是肝硬化时，ADA的阳的阳性率显著高于性率显著高于ALT。同时测定。同时测定ADA与与ALT能更全面地反映慢性活动性肝炎能更全面地反映慢性活动性肝炎时酶学异常，有助于慢性活动性肝炎时酶学异常，有助于慢性活动性肝炎与慢性迁延性肝炎的鉴别诊断。与慢性迁延性肝炎的鉴别诊断。2222 总之，ADA 是肝损害的一个良2.2结核性疾病的诊断结核性疾病的诊断 ADA活性测定是结核病诊断的一个重要辅助手活性测定是结核病诊断的一个重要辅助手段。血清、胸腹水、脑脊液、支气管肺泡灌洗液的段。血清、胸腹水、脑脊液、支气管肺泡灌洗液的ADA活性在结核患者中都可升高。科学家检测了结活性在结核患者中都可升高。科学家检测了结核性脑膜炎患者脑脊液中核性脑膜炎患者脑脊液中ADA，并作了大量对照后，并作了大量对照后得出结论，其得出结论，其ADA活性显著高于正常人。同时也发活性显著高于正常人。同时也发现，脑脊液现，脑脊液ADA升高还见于多种中枢神经系统疾病，升高还见于多种中枢神经系统疾病，如化脓性脑膜炎、脑出血、脑梗塞、格林如化脓性脑膜炎、脑出血、脑梗塞、格林-巴利综合巴利综合征等。另有研究表明，脑脊液中征等。另有研究表明，脑脊液中ADA活性测定在鉴活性测定在鉴别病毒性和结核性脑膜炎的敏感性达到了别病毒性和结核性脑膜炎的敏感性达到了95.5%，对核性脑膜炎的早期诊断有较好的参考价值对核性脑膜炎的早期诊断有较好的参考价值。23232.2结核性疾病的诊断 ADA在淋巴细胞中活性最高，其活性在淋巴细胞中活性最高，其活性与淋巴细胞数量无关，而与与淋巴细胞数量无关，而与T淋巴细胞的分淋巴细胞的分化与增殖密切相关，尤其与化与增殖密切相关，尤其与T淋巴细胞的激淋巴细胞的激活有关。在结核性胸腹水中，活有关。在结核性胸腹水中，T淋巴细胞淋巴细胞和单核和单核-巨噬细胞系可能被分枝杆菌激活，巨噬细胞系可能被分枝杆菌激活，而引起而引起ADA活性升高；活性升高；另外间皮细胞可主另外间皮细胞可主动吞噬分枝杆菌，动吞噬分枝杆菌，产生多种特异性细胞因产生多种特异性细胞因子。子。结核性胸腹水中的结核性胸腹水中的ADA主要为主要为ADA2。2424 ADA 在淋巴细胞中活性最高，其活性与淋 外国科学家检测出结核性胸水外国科学家检测出结核性胸水中中ADA活性对诊断结核的敏感性活性对诊断结核的敏感性为为91%99%，特异性为特异性为91%96%，说明，说明ADA活性检测，活性检测，对结对结核性胸腹水是一种较为理想的诊断核性胸腹水是一种较为理想的诊断指标。指标。2525 外国科学家检测出结核性胸水中ADA 活性2626262.3良恶性胸腹水的鉴别诊断良恶性胸腹水的鉴别诊断ADA活性结核组活性结核组癌性组癌性组漏出液，癌性胸漏出液，癌性胸腹水时腹水时T细胞增殖受抑制，细胞增殖受抑制，ADA活性明显降低。活性明显降低。ADA检测对结核性、癌性和漏出液胸腹水的诊断检测对结核性、癌性和漏出液胸腹水的诊断和鉴别诊断，尤其对结核性的诊断具有较高的敏和鉴别诊断，尤其对结核性的诊断具有较高的敏感性、特异性和准确性，感性、特异性和准确性，而且费用低廉、快速，而且费用低廉、快速，具有较高的临床应用价值。针对肿瘤、结核产生具有较高的临床应用价值。针对肿瘤、结核产生的胸腹水，联合检测癌胚抗原（的胸腹水，联合检测癌胚抗原（CEA）及）及ADA可可提高良恶性胸腔积液的鉴别诊断水平提高良恶性胸腔积液的鉴别诊断水平。肿瘤患者血清及组织中肿瘤患者血清及组织中ADA活性均升高，但活性均升高，但前者阳性率仅为前者阳性率仅为15%40%。肺癌和结肠癌组织中。肺癌和结肠癌组织中ADA活性均明显高于正常肺和结肠组织。活性均明显高于正常肺和结肠组织。27272.3良恶性胸腹水的鉴别诊断 ADA 活性2828282.4血液病的诊断血液病的诊断慢性溶血患者红细胞慢性溶血患者红细胞ADA活性显著升活性显著升高，为正常人的高，为正常人的4570倍。由于腺苷的过度倍。由于腺苷的过度消耗，使消耗，使ATP生成减少，导致红细胞提前破生成减少，导致红细胞提前破坏，而出现贫血症状。先天性再生障碍性坏，而出现贫血症状。先天性再生障碍性贫血患者红细胞贫血患者红细胞ADA明显高于正常对照，明显高于正常对照，其酶活性高于溶贫及获得性再障。因此，其酶活性高于溶贫及获得性再障。因此，红细胞内红细胞内ADA活性可能成为诊断先天性再活性可能成为诊断先天性再障的唯一指标。障的唯一指标。29292.4血液病的诊断 慢性溶血患者红细胞A 在在20世纪世纪60年代，人们已注意到年代，人们已注意到ADA在白血病患者血液中活性的异常。测定患在白血病患者血液中活性的异常。测定患者血清者血清ADA活性，有助于临床分期和分型活性，有助于临床分期和分型的判断，有助于白血病的鉴别诊断和慢粒的判断，有助于白血病的鉴别诊断和慢粒或慢淋急变的早期诊断，并可作为判断患或慢淋急变的早期诊断，并可作为判断患者体内白血病细胞负荷情况的一项生化指者体内白血病细胞负荷情况的一项生化指标标。急性白血病血清。急性白血病血清ADA显著增高，且与显著增高，且与病情呈正相关病情呈正相关。除此之外，。除此之外，ADA活性与白活性与白血病病程变化有关，动态观察有助于急性血病病程变化有关，动态观察有助于急性白血病疗效观察和慢性白血病急变的早期白血病疗效观察和慢性白血病急变的早期诊断诊断。3030 在20 世纪60 年代，人们已注意到AD2.5伤寒的诊断伤寒的诊断在诊断伤寒的实验室检查方法中，血、粪培养虽可起在诊断伤寒的实验室检查方法中，血、粪培养虽可起确诊作用，但影响培养因素较多，阳性率也不高；骨髓培确诊作用，但影响培养因素较多，阳性率也不高；骨髓培养阳性率高，但难普遍开展；而肥达氏反应近年来受抗生养阳性率高，但难普遍开展；而肥达氏反应近年来受抗生素影响，常出现假阳性或假阴性等异常结果。有研究表明，素影响，常出现假阳性或假阴性等异常结果。有研究表明，血清血清ADA测定可用于伤寒的辅助诊断，其变化早于肥达测定可用于伤寒的辅助诊断，其变化早于肥达氏反应。在伤寒患者发病初期的第氏反应。在伤寒患者发病初期的第14天，天，ADA就可明就可明显增高。增高的机理可能是由于伤寒患者回肠末端淋巴结显增高。增高的机理可能是由于伤寒患者回肠末端淋巴结增大，大量淋巴细胞和巨噬细胞增生、坏死及肠黏膜破坏，增大，大量淋巴细胞和巨噬细胞增生、坏死及肠黏膜破坏，受累淋巴结及肠黏膜释放大量受累淋巴结及肠黏膜释放大量ADA所致所致。因此，因此，ADA检测对伤寒的早期诊断有较大的参考价检测对伤寒的早期诊断有较大的参考价值，特别是对细菌培养阴性的患者，结合肥达氏反应结果，值，特别是对细菌培养阴性的患者，结合肥达氏反应结果，可起到较好的辅助诊断作用。可起到较好的辅助诊断作用。31312.5伤寒的诊断 在诊断伤寒的实验室检2.6系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮(SLE)的病情评价的病情评价SLE是一种常见的自身免疫疾病，其免疫异常的特是一种常见的自身免疫疾病，其免疫异常的特征是征是T细胞活性增加，细胞活性增加，B细胞多克隆活化并产生多种狼疮细胞多克隆活化并产生多种狼疮性自身抗体。而性自身抗体。而ADA是一种与机体细胞免疫系统有重要是一种与机体细胞免疫系统有重要关联的核酸代谢酶，它可用来评价淋巴细胞的成熟程度和关联的核酸代谢酶，它可用来评价淋巴细胞的成熟程度和功能以及血单核细胞向巨噬细胞转化程度功能以及血单核细胞向巨噬细胞转化程度。有文章报道。有文章报道，SLE患者血清患者血清ADA活性明显高于正常对照组。在轻、活性明显高于正常对照组。在轻、中、重度活动组的比较中发现，中、重度活动组的比较中发现，ADA活性由高到低依次活性由高到低依次为重度组为重度组中度组中度组轻度组，且血清轻度组，且血清ADA活性高低与活性高低与SLEDAI积分存在高度相关性。表明血清积分存在高度相关性。表明血清ADA的变化与病情的变化与病情的严重程度有密切联系，对了解病情的严重程度有一定的的严重程度有密切联系，对了解病情的严重程度有一定的临床价值。至于临床价值。至于SLE患者血清患者血清ADA活性增高的机理，有活性增高的机理，有学者认为是由于学者认为是由于T淋巴细胞活化导致淋巴细胞活化导致，此外单核巨噬细胞，此外单核巨噬细胞系统活化导致产生的系统活化导致产生的ADA2同工酶增加同工酶增加。32322.6系统性红斑狼疮(SL E)的病情评价 2.7缺铁性贫血（缺铁性贫血（IDA）的辅助诊断）的辅助诊断研究结果显示，研究结果显示，IDA患儿淋巴细胞患儿淋巴细胞ADA活性明显降低，补充铁剂后又明显升活性明显降低，补充铁剂后又明显升高，而血浆高，而血浆ADA活性改变不明显。由于淋活性改变不明显。由于淋巴细胞巴细胞ADA活性降低活性降低,造成细胞内源苷聚积，造成细胞内源苷聚积，干扰了内源性嘧啶合成而影响淋巴细胞增干扰了内源性嘧啶合成而影响淋巴细胞增殖、分化，使殖、分化，使T、B淋巴细胞功能受损，导淋巴细胞功能受损，导致免疫功能低下，提示致免疫功能低下，提示IDA患者存在免疫患者存在免疫功能障碍和免疫调节紊乱。因此认为，测功能障碍和免疫调节紊乱。因此认为，测定淋巴细胞定淋巴细胞ADA活性有助于活性有助于IDA的辅助诊的辅助诊断。断。33332.7缺铁性贫血（IDA）的辅助诊断 研2.8透析性腹膜炎的诊断透析性腹膜炎的诊断透析性腹膜炎时，透析液中透析性腹膜炎时，透析液中ADA活性增活性增高高,直至腹膜炎治愈，炎症消失后才明显下直至腹膜炎治愈，炎症消失后才明显下降。所以降。所以ADA活性测定对于腹膜透析并发活性测定对于腹膜透析并发腹膜炎的诊断有意义，可作为透析性腹膜腹膜炎的诊断有意义，可作为透析性腹膜炎比较稳定的诊断指标炎比较稳定的诊断指标。34342.8 透析性腹膜炎的诊断 透析性腹膜炎时，2.9肾综合征出血热（肾综合征出血热（HFRS）的诊断）的诊断ADA测定对测定对HFRS的早期诊断有一定的早期诊断有一定的临床价值。的临床价值。HFRS发热期血清发热期血清ADA开始开始增高，低血压期和少尿期达峰值，多尿期增高，低血压期和少尿期达峰值，多尿期开始下降，恢复期降至正常。危重型少尿开始下降，恢复期降至正常。危重型少尿期的期的ADA活性较低，而中型明显升高。因活性较低，而中型明显升高。因此，此，HFRS血清血清ADA变化与患者病程分期变化与患者病程分期及病情的严重程度有密切联系，对了解疾及病情的严重程度有密切联系，对了解疾病预后有一定的临床价值病预后有一定的临床价值。35352.9 肾综合征出血热（HFRS）的诊断 2.10重症联合免疫缺陷病重症联合免疫缺陷病(SCID)1972年有报道年有报道ADA活性缺乏与活性缺乏与SCID有关，这有关，这一发现曾引起临床和基础免疫学的很大重视。一发现曾引起临床和基础免疫学的很大重视。ADA作为核酸代谢重要的酶类，其缺乏可导致核作为核酸代谢重要的酶类，其缺乏可导致核酸代谢障碍，影响到胸腺的发育，从而引起免疫酸代谢障碍，影响到胸腺的发育，从而引起免疫功能缺陷。综合国内外资料表明，功能缺陷。综合国内外资料表明，SCID的传递者的传递者细胞内细胞内ADA活性显著低于正常对照，活性显著低于正常对照，SCID患者该患者该酶活性更低，甚至不及正常人的酶活性更低，甚至不及正常人的10%，患儿羊水，患儿羊水细胞内细胞内ADA活性可能低至正常胎儿的活性可能低至正常胎儿的1%以下。因以下。因此，胎儿羊水中纤维细胞此，胎儿羊水中纤维细胞ADA活性能有效地对活性能有效地对SCID婴儿进行产前诊断。婴儿进行产前诊断。36362.10重症联合免疫缺陷病(SCID)2.11脑膜炎 1973年专家提出结核性脑膜炎患者年专家提出结核性脑膜炎患者CSF-ADA明显升高，明显升高，并用于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎及病毒性脑膜炎的鉴并用于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎及病毒性脑膜炎的鉴别。结脑患者别。结脑患者CSF-ADA增高的阳性率为增高的阳性率为73%99.4%。通。通过比较过比较64例结脑和非结脑例结脑和非结脑CSF-ADA值分别为值分别为18.242.36U/L和和1.430.21U/L，以，以1.85U/L(非结脑非结脑X+2SD)为结脑的诊断标准，其阳性率为为结脑的诊断标准，其阳性率为90.6%，非结脑，非结脑则全部阴性。还发现结脑发病初则全部阴性。还发现结脑发病初1个月内明显升高，治疗个月内明显升高，治疗3个月后则明显下降，治愈者可恢复正常。罗蔚锋等发现结个月后则明显下降，治愈者可恢复正常。罗蔚锋等发现结脑患者脑患者CSF-ADA活性显著高于正常对照和病脑组。以活性显著高于正常对照和病脑组。以8U/L为阳性界限值，病脑组和对照组均为阳性界限值，病脑组和对照组均100%阴性，结脑阴性，结脑组阳性率组阳性率91%，特异性为，特异性为100%，其含量变化与结脑患者，其含量变化与结脑患者抗痨治疗及病程发展有一定关系。因此，抗痨治疗及病程发展有一定关系。因此，CSF-ADA测定测定可作为早期结脑诊断、观察病情和疗效的常规检查项目。可作为早期结脑诊断、观察病情和疗效的常规检查项目。37372.11脑膜炎 1973年专家提出结核性脑 结核性脑膜炎组结核性脑膜炎组CSF-ADA活性明显高活性明显高于细菌性脑膜炎组、脑炎组和对照组，以于细菌性脑膜炎组、脑炎组和对照组，以ADA活性活性5U/L为临界值，其对结核性脑膜为临界值，其对结核性脑膜炎的诊断灵敏度和特异分别为炎的诊断灵敏度和特异分别为89%和和92%。结核性脑膜炎结核性脑膜炎CSF-ADA水平与水平与CSF细胞数、细胞数、淋巴细胞百分数、蛋白浓度显著相关。认淋巴细胞百分数、蛋白浓度显著相关。认为为CSF-ADA活性可作为儿童结核性脑膜炎活性可作为儿童结核性脑膜炎早期鉴别的简便快速和有用的诊断指标。早期鉴别的简便快速和有用的诊断指标。3838 结核性脑膜炎组CSF-ADA活性明显高于2.12糖尿病糖尿病糖尿病的鉴别诊断据国内外文献报道，糖尿病的鉴别诊断据国内外文献报道，2型型糖尿病患者血清糖尿病患者血清ADA明显升高，且与明显升高，且与HbA1c有有明显正相关关系，明显正相关关系，1型糖尿病患者的型糖尿病患者的ADA与与HbA1c无明显相关关系。因此，测定血清无明显相关关系。因此，测定血清ADA对于鉴别诊断对于鉴别诊断1型与型与2型糖尿病、衡量型糖尿病、衡量2型糖尿病型糖尿病患者血糖控制好坏有一定的意义。患者血糖控制好坏有一定的意义。39392.12糖尿病 糖尿病的鉴别诊断据国内外2.13评价某些疾病的细胞免疫功能评价某些疾病的细胞免疫功能有研究表明，伤寒病及乙肝患者的外周有研究表明，伤寒病及乙肝患者的外周血淋巴细胞内腺苷脱氨酶（血淋巴细胞内腺苷脱氨酶（LADA）活性活性明显高于正常人。同时发现，外周血明显高于正常人。同时发现，外周血T淋巴淋巴细胞亚群中细胞亚群中CD4降低、降低、CD8升高，两者比升高，两者比值发生明显的倒置，呈高度负相关值发生明显的倒置，呈高度负相关。专家。专家认为，认为，ADA是是T淋巴细胞亚群分化成熟不淋巴细胞亚群分化成熟不可缺少的成分，故持续高活性的血可缺少的成分，故持续高活性的血LADA即即可使可使T淋巴细胞亚群不断处于旺盛的增殖状淋巴细胞亚群不断处于旺盛的增殖状态。这可能是态。这可能是CD8淋巴细胞增高的主要原淋巴细胞增高的主要原因，结果导致免疫调节机制紊乱。因，结果导致免疫调节机制紊乱。40402.13 评价某些疾病的细胞免疫功能 有3检测检测 近十几年来，随着对近十几年来，随着对ADA的深入研究，的深入研究，检测方法也不断发展。目前已发展了四代。检测方法也不断发展。目前已发展了四代。41413检测 近十几年来，随着对ADA的深入研究3.1第一代ADA测试 ADA将腺苷将腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷脱氨产生次黄苷(Inosine)和氨和氨(NH3）。一个）。一个ADA活性单位在测活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨试特定条件下每分钟脱氨1mole腺苷成为次黄苷。腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，处吸光度下降的速度，可以测算可以测算ADA的活性大小。的活性大小。Kaplan法法（1955）由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度低于法仅适用于腺苷浓度低于40M。如此低的底物浓。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成度达不到底物饱和要求，造成ADA活性检测失真。活性检测失真。因此，该法不适用于临床应用。因此，该法不适用于临床应用。42423.1第一代ADA测试 ADA将腺苷(Ade3.2第二代第二代ADA测试测试 原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨。然后用生次黄嘌呤核苷和氨。然后用Berthelot显色反应显色反应（1859）测定反应过程中产生氨的量，从而计算）测定反应过程中产生氨的量，从而计算血清血清ADA活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，但灵敏度低，易受外源性但灵敏度低，易受外源性NH3影响，空白过高，影响，空白过高，不能直接测定红细胞不能直接测定红细胞ADA活性。活性。同样原因，同样原因，ADA偶联谷氨酸脱氢酶偶联谷氨酸脱氢酶(GlutamateDehydrogenase,GLDH）反应：）反应：通过测量通过测量340nm处还原型辅酶处还原型辅酶(NADPH)吸光度下降的速度来测算吸光度下降的速度来测算ADA活性。该法也因血活性。该法也因血清含氨干扰，以及测试系统中过高清含氨干扰，以及测试系统中过高NADPH造成非造成非特异性氧化而无成算。特异性氧化而无成算。43433.2第二代ADA测试 原理为腺苷脱氨酶催3.3第三代ADA测试 Kalckar氏应用氏应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶偶联嘌呤核苷磷酸化酶(Purinenucleosidephosphorylase，PNP)和黄嘌呤氧化酶和黄嘌呤氧化酶(XanthineOxidase,XOD)反应反应连续监测法。通过测量连续监测法。通过测量293nm处尿酸盐吸光度处尿酸盐吸光度上升的速度来测算上升的速度来测算ADA活性。但是，活性。但是，293nm时时血清吸光度太高，造成临床应用不便。血清吸光度太高，造成临床应用不便。44443.3第三代ADA测试 Kalckar氏应用A3.4第四代ADA测试最新对第四代测试方法的改进为偶联偶联嘌最新对第四代测试方法的改进为偶联偶联嘌呤核苷磷酸化酶呤核苷磷酸化酶，黄嘌呤氧化酶和过氧化物酶，黄嘌呤氧化酶和过氧化物酶反应。反应。ADA酶解腺苷脱氨产生次黄苷；再通过酶解腺苷脱氨产生次黄苷；再通过PNP的作用，生成次黄嘌呤的作用，生成次黄嘌呤;后者在黄嘌呤氧化后者在黄嘌呤氧化酶氧化下生成尿酸和过氧化氢酶氧化下生成尿酸和过氧化氢;最后在过氧化物最后在过氧化物酶的作用下过氧化氢再与酶的作用下过氧化氢再与4-氨基安替比林等反应氨基安替比林等反应（Trinder氏反应），生成紫红色的有色醌。通氏反应），生成紫红色的有色醌。通过动态测量有色醌过动态测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来处吸光度上升的速度来测算测算ADA的活性。从反应原理可知的活性。从反应原理可知NH4+对该法对该法无影响。无影响。45453.4第四代ADA测试 最新对第四代测试方4检测简介检测简介剂剂型型:液体双试剂，直接使用，避免复溶引起瓶间差。液体双试剂，直接使用，避免复溶引起瓶间差。线性范围线性范围:0200U/L。准准确确度度:不准确度正常水平不准确度正常水平15%，异常水平，异常水平10%。稳稳定定性性:密闭避光贮存密闭避光贮存28可稳定可稳定12个月，开瓶上机个月，开瓶上机28避光稳定避光稳定30天。天。抗干扰能力抗干扰能力:标本中胆红素标本中胆红素342umol/L，血红蛋白，血红蛋白200mg/dl，甘油三酯，甘油三酯8.47mmol/L，抗坏血酸，抗坏血酸4mg/dl及及NH4+对本试剂测定无影响。对本试剂测定无影响。适适用用性性:适用于各种半适用于各种半/全自动生化仪。全自动生化仪。参考范围参考范围:422U/L(37)，建议各实验室建立自己的参考，建议各实验室建立自己的参考值范围值范围46464检测简介剂 型:液体双试剂，直接使用，避免复溶引起瓶间差。474747 谢谢484848