肺癌耐药分子标志与个体性化疗课件

肺癌耐肺癌耐药分子分子标志志与个体性化与个体性化疗徐徐 萌萌暨南大学附属第一医院南大学附属第一医院肿瘤科瘤科整理ppt肺癌耐肺癌耐药药分子分子标标志志与个体性化与个体性化疗疗徐徐 萌整理萌整理ppt1整理ppt整理整理ppt2整理ppt整理整理ppt3 肺癌耐肺癌耐药分子分子标志志：药理理遗传学和学和药理基因理基因组学的研究表明与肺癌多学的研究表明与肺癌多药耐耐药相关的基因相关的基因及其异常信号及其异常信号传导通路。通路。个体性化个体性化疗：根据肺癌患者：根据肺癌患者药理理遗传学和基学和基因因组学特点，采用特异和最佳的化学特点，采用特异和最佳的化疗药物方物方案，提高化案，提高化疗疗效，尽量降低化效，尽量降低化疗副反副反应，最大延最大延长患者生存期。患者生存期。整理ppt 肺癌耐肺癌耐药药分子分子标标志：志：药药理理遗传遗传学和学和药药理基因理基因组组学的研究表学的研究表41肺癌化肺癌化疗耐耐药的复的复杂性性 2肺癌耐肺癌耐药逆逆转药物的局限性物的局限性3肺癌肺癌个体性化个体性化疗的的实践性践性4典型病例典型病例整理ppt整理整理ppt5l以以铂类药物物为基基础的的联合化合化疗比比单一化一化疗效果好，是效果好，是中晚期肺癌一中晚期肺癌一线治治疗的的金金标准准;l紫杉醇、紫杉醇、诺维本、多西紫杉醇、吉西他本、多西紫杉醇、吉西他滨;l在在过去三十年中，非小去三十年中，非小细胞肺癌的中位生存胞肺癌的中位生存时间只延只延长了大了大约三个月三个月;l中晚期非小中晚期非小细胞肺癌胞肺癌经验性化性化疗疗效停滞于平台期，效停滞于平台期，致力于致力于寻找各种敏感的化找各种敏感的化疗耐耐药分子分子标志和高效的耐志和高效的耐药逆逆转剂具有广泛的具有广泛的应用前景。用前景。Corey Langer 2000;Breathnach et al 2001;Schiller et al 2002 一一.肺癌化肺癌化疗耐耐药的复的复杂性性整理ppt以以铂类药铂类药物物为为基基础础的的联联合化合化疗疗比比单单一化一化疗疗效果好，是中晚期肺癌一效果好，是中晚期肺癌一线线6What is the Scope of the Problem?New Cancer Cases&Deaths 2001CA Cancer J Clin.51:23,2001*Vast majority of deaths due to chemoresistance*整理pptWhat is the Scope of the Probl7Resistant cellsTopotecanSensitive cellsMitoxantroneDRUG ACCUMULATION IS REDUCED IN DRUG-RESISTANT CELLS Resistant cellsSensitive cells整理pptResistant cellsTopotecanSensit8Why Does Chemo Fail?耐耐药参与机制主要有：参与机制主要有：(1)多多药耐耐药基因基因(MDR1)及其及其编码的的细胞膜胞膜P-糖蛋糖蛋白表达增加；白表达增加；(2)多多药耐耐药相关蛋白相关蛋白(MRP)表达增加；表达增加；(3)谷胱甘谷胱甘肽解毒解毒酶系系统活性增活性增强；(4)DNA拓扑异构拓扑异构酶活性降低或活性降低或结构异常；构异常；(5)DNA损伤的修复能力增的修复能力增强等等?整理pptWhy Does Chemo Fail?耐耐药药参与机制主要有：参与机制主要有：9耐耐药分分类(1)药理耐理耐药（pharmacological resistance）：）：由机体由机体对药物的影物的影响所响所导致的耐致的耐药，如，如药物物进入机体代入机体代谢增增强或活化障碍、或活化障碍、肿瘤血供瘤血供不足，不足，药物物组织穿透力差，穿透力差，导致致细胞有效胞有效浓度降低。度降低。(2)生化耐生化耐药（biochemical resistance）：）：肿瘤瘤细胞的胞的遗传性及生性及生化特性化特性发生复生复杂的的变化，致使化，致使细胞通胞通过不同途径不同途径对药物物产生耐生耐药性。性。(3)凋亡耐凋亡耐药（apoptosis resistance）：）：大部分抗大部分抗肿瘤瘤药物引起物引起细胞死亡是通胞死亡是通过细胞凋亡，而促凋亡基因的缺失或抗凋亡基因的胞凋亡，而促凋亡基因的缺失或抗凋亡基因的过度度表达都将相表达都将相应地地导致致肿瘤瘤细胞胞对化化疗药物物产生耐生耐药性。性。(4)微微环境耐境耐药(microenvironment resistance)：肿瘤瘤细胞的存活和胞的存活和生生长有有赖于器官微于器官微环境，器官微境，器官微环境可以通境可以通过调节不同耐不同耐药基因表基因表达来影响达来影响肿瘤瘤细胞胞对化化疗药物的敏感性。物的敏感性。整理ppt耐耐药药分分类类整理整理ppt10Reduced apoptosisAltered cell cycle checkpointsIncreased metabolism of drugsIncreased or altered targetsIncreased repair of damageCompartmentalization区室作用MECHANISMS OF RESISTANCE TO ANTI-CANCER DRUGSDecreaseduptakeIncreasedefflux整理pptReduced apoptosisMECHANISMS OF11与与肿瘤多瘤多药耐耐药性相关的性相关的ABC转运体运体多多多多药药耐耐耐耐药药性（性（性（性（Multidrug Resistance,MDRMultidrug Resistance,MDR）：）：）：）：意意意意义义：肿肿瘤瘤瘤瘤细细胞在抗胞在抗胞在抗胞在抗肿肿瘤瘤瘤瘤药药物物物物长长期和反复作用下期和反复作用下期和反复作用下期和反复作用下 对对其出其出其出其出现现耐耐耐耐药药性的同性的同性的同性的同时时，而且，而且，而且，而且对对其它多种其它多种其它多种其它多种 结结构乃至作用机制不同的抗构乃至作用机制不同的抗构乃至作用机制不同的抗构乃至作用机制不同的抗肿肿瘤瘤瘤瘤药药物也物也物也物也产产 生交叉抗性。生交叉抗性。生交叉抗性。生交叉抗性。BiedlerBiedler首先描述了首先描述了首先描述了首先描述了MDRMDR表型（表型（表型（表型（2020世世世世纪纪7070年代）年代）年代）年代）现现已已已已发现发现100100余种与余种与余种与余种与MDRMDR相关的相关的相关的相关的转转运体（运体（运体（运体（20072007年）年）年）年）整理ppt与与肿肿瘤多瘤多药药耐耐药药性相关的性相关的ABC转转运体多运体多药药耐耐药药性（性（Multidr12“疏水真空清除模型疏水真空清除模型”（Hydropobic vaccum cleaner model）要点：要点：MDRMDR转运体的运体的2 2TMDsTMDs结构域形构域形成一个成一个药物通道，利用水解物通道，利用水解ATPATP提供的提供的能量把能量把药物（包括所有被修物（包括所有被修饰的疏的疏 水性水性药物）物）转运到运到细胞外，胞外，这种种药泵功能使胞内功能使胞内药物物 浓度度维持在低水平，持在低水平，从而从而导致致肿瘤瘤细胞胞产生耐生耐药性。性。证据：据：Rosenberg et al.(1997)Rosenberg et al.(1997)对纯化的化的P-gpP-gp的二的二维晶体晶体电镜 3-3-D D重重构（构（2.52.5nmnm），），发现分子中分子中间有直径有直径约5 5nmnm的漏的漏 斗状斗状结构，构，对MDRMDR转运体的运体的药物通道模型假物通道模型假设提供提供 较直接的直接的实验证据。据。整理ppt“疏水真空清除模型疏水真空清除模型”要点：要点：MDR转转运体的运体的2TMDs结结构构13相关相关临床床现象象：mdr1表达水平高的正常表达水平高的正常组织器官器官发生的生的肿瘤中，瘤中，检测到的到的mdr基基因的表因的表 达水平亦高，而且达水平亦高，而且这种种肿瘤在瘤在临床上床上 往往往往对化化疗药物也不敏感，即表物也不敏感，即表现抗性。反之亦然。抗性。反之亦然。证明明：mdr1基因基因编码的的P-gp的表达水平的表达水平与与肿瘤耐瘤耐药相关。相关。整理ppt相关相关临临床床现现象：象：mdr1表达水平高的正常表达水平高的正常组织组织器官器官发发生的生的肿肿瘤中瘤中14P-gp是一种具有是一种具有ATP酶活性活性药物排出物排出泵（drug efflux pump）overexpers in ritro/in rivo：P-gp 能能转运多种运多种结构构 和功能不相关的和功能不相关的药物（物（Mr：300-2000Da）：）：阿霉素（阿霉素（doxorubibin）柔柔红霉素（霉素（daunorubicin）放放线菌素（菌素（antinomycin D）依托泊苷（依托泊苷（etoposide）秋水仙素（秋水仙素（colchicines）长春新碱（春新碱（vincristine）氨茴氨茴环素（素（anthracyclines）表鬼臼毒素（表鬼臼毒素（epipodophyllotoxins）整理pptP-gp是一种具有是一种具有ATP酶酶活性活性药药物排出物排出泵泵（drug ef15MRP 的性的性质和功能和功能 （1）M.W.170KDa plus(N-端端连接的糖基接的糖基)约190KDa。（2）分布：）分布：在正常在正常细胞中：内膜系胞中：内膜系统，如内，如内质网、网、高高尔基体和运基体和运输囊泡膜等。囊泡膜等。在在肿瘤瘤细胞中：主胞中：主要在要在细胞胞质膜上，少部分在膜上，少部分在细胞胞质中多靠近中多靠近细胞胞核。核。（3）MRP1不不仅可直接外排可直接外排药物，物，负责药物的物的 胞内隔离，使胞内隔离，使药物不能与靶点物不能与靶点结合，合，导致耐致耐药性。性。MRP1的的药物抗性：物抗性：如如对：蒽：蒽环素（素（anthracyclins）生物碱生物碱(Vinka alkaloids)表鬼臼毒素表鬼臼毒素(epipodophyllotoxins)米托蒽米托蒽醌(mitoxantrone)整理pptMRP 的性的性质质和功能整理和功能整理ppt16P-gp与与MRP：相似：基本相似：基本结构，构，转运功能，运功能，药物抗性物抗性 不同：不同：P-gp:主要主要转运天然的和阳离子性运天然的和阳离子性 的疏水化合物的疏水化合物 MRP:主要主要转运阴离子性的化合物，运阴离子性的化合物，转运的运的药物常是与谷胱甘物常是与谷胱甘肽 和其他阴离子的和其他阴离子的缀含物，或含物，或 是与谷胱甘是与谷胱甘肽一起一起协同同转运运整理pptP-gp与与MRP：整理：整理ppt17MRP基因表达增基因表达增强是肺癌是肺癌原原发性耐性耐药发生的早期生的早期标记物，也是肺癌耐物，也是肺癌耐药的主要机的主要机制，肺癌制，肺癌细胞在化胞在化疗药物物诱导条件下的耐条件下的耐药表型改表型改变都都是是为了抵抗化了抵抗化疗药物物杀灭，保保护自身生存。自身生存。徐萌徐萌.恶性性肿瘤化瘤化疗及其及其对策策.第一版第一版.北京：北京：军事医学事医学科学出版社，科学出版社，2002.90-117.Xu Meng，et al.J Tumor Marker Oncology，2004，19(4):235-241.整理pptMRP基因表达增基因表达增强强是肺癌原是肺癌原发发性耐性耐药发药发生的早期生的早期标记标记物，也是肺癌物，也是肺癌18肿瘤瘤细胞胞MDR的机理的复的机理的复杂性：性：耐耐药表型可因表型可因肿瘤瘤类别和和细胞分化胞分化阶段的段的 不同而异，甚至有明不同而异，甚至有明显差差别；不同不同肿瘤瘤对不同的化不同的化疗药物的反物的反应和机理和机理 不同；不同；不同的不同的肿瘤瘤对同一种化同一种化疗药物的反物的反应和机和机 理也可能不同。理也可能不同。整理ppt肿肿瘤瘤细细胞胞MDR的机理的复的机理的复杂杂性：整理性：整理ppt19耐耐药的的肿瘤干瘤干细胞胞肿瘤形成中瘤形成中经过多次突多次突变形成形成肿瘤瘤细胞的异胞的异质性，性，其中少量的其中少量的细胞具有很胞具有很强的增殖能力，被称的增殖能力，被称为肿瘤干瘤干细胞（胞（tumor stem cell）。）。肿瘤的瘤的发生是由于生是由于肿瘤干瘤干细胞的增殖胞的增殖,治治疗的目的目的必的必须是确定和是确定和杀灭肿瘤干瘤干细胞，由于胞，由于肿瘤干瘤干细胞的增殖能力有限，比胞的增殖能力有限，比肿瘤瘤细胞胞对化化疗药物物更具耐更具耐药性性,体内残余的耐体内残余的耐药的的肿瘤干瘤干细胞足以胞足以使使肿瘤复瘤复发或或转移。以移。以肿瘤干瘤干细胞胞为靶向的治靶向的治疗疗效更效更为显著。著。整理ppt耐耐药药的的肿肿瘤干瘤干细细胞整理胞整理ppt20MDR:The major obstacle to successful cancer chemotherapyChemotherapyChemotherapy整理pptMDR:ChemotherapyChemotherapy整整21Cancer Stem Cell-Lung Cancer支气管肺癌干支气管肺癌干细胞胞BASCnBASC has self-renewal capacity.nBASC proliferates in airway damage,regeneration and tumor progression.Cell 2005;121:823-835K-ras conditioning mouselimiting dilution assay整理pptCancer Stem Cell-Lung Cancer支支22Stem Cells-Drug ResistancenHigh levels of ABC drug transportersnQuiescencenCapacity for DNA repairnAccumulation of mutationsNature Review Cancer 2005;5:275-284整理pptStem Cells-Drug ResistanceHigh23Nature Review Drug Discovery 2006;5:219-234Resistance-ABC Transporter整理pptNature Review Drug Discovery 224Targeting ABC TransporterNature Review Drug Discovery 2006;5:219-234整理pptTargeting ABC TransporterNatur25Cancer Stem Cell-high drug efflux capacitynCancer stem cell has ABC transporters with drug-efflux capacity.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101,1422814233(2004)human tumor cell linesSP:side populationJF&IMR 32:NB cell lines SPNon-SPcontrolfluorescenceHoechst 33342-stained flow cytometrySPNon-SP整理pptCancer Stem Cell-high drug ef26Stem Cell-ChemoresistancenCancer stem cell has higher levels of drug resistance proteins.Cancer Res 2000,60:4403-4411MRP:multiple resistance associated proteinLRP:lung resistance related proteinMFI:mean fluorescence intensitysemiquantitative RT-PCRflow cytometry整理pptStem Cell-ChemoresistanceCanc27l钙离子通道阻滞离子通道阻滞剂、环孢菌素、菌素、钙调蛋白抑制蛋白抑制剂、抗、抗疟药等；另外等；另外细胞因子、胞因子、类固醇激素、固醇激素、单克隆抗体、克隆抗体、免疫毒素、特异性双抗、反免疫毒素、特异性双抗、反义寡聚核苷酸、寡聚核苷酸、结合白蛋合白蛋白的白的药物都可逆物都可逆转肿瘤的耐瘤的耐药性性 l目前研究最多的目前研究最多的还是是维拉帕米、拉帕米、环孢素素A A及其衍生物及其衍生物 l全身性全身性应用逆用逆转剂副作用副作用较大，可大，可产生心生心脏损害，害，诱发黄疸，免疫抑制黄疸，免疫抑制 l目前在目前在临床床应用受到很大的限制用受到很大的限制二二.既往耐既往耐药逆逆转药物的局限性物的局限性整理ppt钙钙离子通道阻滞离子通道阻滞剂剂、环孢环孢菌素、菌素、钙调钙调蛋白抑制蛋白抑制剂剂、抗、抗疟药疟药等；另外等；另外细细28100bp标志物 对照组 MRP siRNA组 ADM组 MRP siRNA加ADM组图1 转染siRNA后肺癌细胞MRP mRNA表达水平整理ppt100bp标标志物志物 对对照照组组 MRP s29由于由于临床肺癌患者有原床肺癌患者有原发性耐性耐药以及体内以及体内肿瘤瘤细胞胞耐耐药倍数倍数较低，目前低，目前还没有一种逆没有一种逆转化化疗多多药耐耐药方法在方法在临床广泛床广泛应用，主要原因有用，主要原因有:现有逆有逆转剂老老药新用，逆新用，逆转耐耐药不是其主要功能，不是其主要功能，临床毒副作用大；床毒副作用大；生物逆生物逆转剂在体内不在体内不稳定，定，难以作用到靶点；以作用到靶点；临床耐床耐药往往数种机制同往往数种机制同时参与，只参与，只对单一机制一机制起作用的逆起作用的逆转剂难以以发挥显著的效著的效应。缺乏大缺乏大样本的循本的循证医学依据。医学依据。整理ppt由于由于临临床肺癌患者有原床肺癌患者有原发发性耐性耐药药以及体内以及体内肿肿瘤瘤细细胞耐胞耐药药倍数倍数较较低，目低，目30050100150200250020406080100ATP-TCAATP-TCA指指导的化的化疗(n=39)传统化化疗(n=17)p=0,0009Weeks%Patients050100150200250020406080100ATP-TCAATP-TCA指指导的化的化疗(n=39)传统化化疗(n=17)p=0,0016Weeks%PatientsOverall SurvivalProgression free Survival引自引自Kurbacher CM,Cree IA,Brucker.Anticancer Drugs.1998,9:51-57 传统化化疗和和ATP-TCAATP-TCA指指导的化的化疗的生存率比的生存率比较卵巢癌卵巢癌术后后整理ppt050100150200250020406080100ATP31三三 肺癌肺癌个体性化个体性化疗的的实践性践性l乳腺癌易感基因乳腺癌易感基因(BRCA1):铂类，抗微管，抗微管类药物物,预后？后？l错配切除修复配切除修复酶(ERCC1):铂类药物物 l微管蛋白微管蛋白(-tubulin):抗微管抗微管类药物物 l核糖核苷核糖核苷还原原酶M1(RRM1):嘧啶类抗代抗代谢(吉西他吉西他滨)l抗血管生成化抗血管生成化疗整理ppt三三 肺癌个体性化肺癌个体性化疗疗的的实实践性践性乳腺癌易感基因乳腺癌易感基因(BRCA1):铂铂32Gene expression according to histology in NSCLCSquamous cell carcinomaAdenocarcinomaP*Median(range)Median(range)ERCC11.41(0.45-7.34)0.72(0.23-2.45)0.0001MZF10.62(0.06-6.72)0.25(0.03-1.49)0.0001Twist10.37(0.30-76.01)2.50(0.14-19.16)0.0001RRM12(0.6-6.9)1.2(0.4-2.9)0.0001TRX2.13(0.40-11.88)0.91(0.31-7.94)0.0001Tdp11.7(0.6-7.3)1.3(0.1-2.6)0.02NFAT0.4(0.1-2.3)0.5(0.1-1.8)0.65BRCA14.26(0.55-18.48)1.50(0.09-8.08)0.0001BubR116.3(1.4-90)7(0.8-25)0.0001Clinical data from M Skrzypski,E Jassem,J Jassem整理pptGene expression according to h33铂类药物物lPlatinum based doublets are standard for patients with advanced NSCLC and good performance status.l40%-60%of patients NSCLC progress during platinum based therapy,while some have excellent responses.Schiller,Harrington et al.;N Engl J Med,2002lPlatinum doublets have a marginally increased RR(17%)vs third generation non-platinum doublets but OS is not improved.DAddario,Pintilie et al.;J Clin Oncol,2005整理ppt铂类药铂类药物物Platinum based doublets ar34Clinically important mediators of DNA repair for platinum based damagelEssential NERDNA unwinding:ERCC2(XPD)Incision of DNA:ERCC1(XPF)lTranscription coupled NERBRCA1lBase Excision RepairXRCC1整理pptClinically important mediators35General mechanisms of platinum resistancelDetoxificationlInhibitors of apoptosislDNA methylationlChanges in influx/effluxlIncreased DNA repair capacityRabik and Dolan;Cancer Treat Rev,2006整理pptGeneral mechanisms of platinum36Established mediators of platinum resistance in NSCLClBRCA1lERCC1Germline polymorphismsTumor expression by mRNAImmunohistochemistrylPolymorphisms in ERCC2&XRCC1整理pptEstablished mediators of plati37BRCA1lIn a breast cancer cell line low BRCA1 mRNA expression increased sensitivity to cisplatin and etoposide,but increased resistance to paclitaxel and vincristine.lIn a BRCA1-negative cell line,reconstitution of wild-type BRCA1 led to a 20-fold increase in cisplatin resistance and,in contrast,in a 100010 000-fold increase in sensitivity to antimicrotubule drugs.lLow BRCA1 mRNA levels in sporadic breast cancer were associated with a higher frequency of distant metastases.Taron,Rosell et al.;Hum Mol Genet,2004整理pptBRCA1In a breast cancer cell l38BRCA1 mRNA expression levels and survival in NSCLC patients treated with neo-adjuvant gemcitabine&cisplatin.lTotal 55 pts;Bottom:N=15,Middle=28,Top=12;p=0.01 Taron,Rosell et al.;Hum Mol Genet,2004整理pptBRCA1 mRNA expression levels a39Two strands of evidence for customizing therapy based on BRCA1 mRNA levels in SCATlAmong several DNA repair genes,BRCA1 is the most reliable predictive marker of chemotherapy outcome in stage IV and stage III NSCLClIn early-stage chemonaive NSCLC patients,BRCA1 is the best prognostic marker of survivallBRCA1 has been selected as the marker for assigning chemotherapy in the SCAT experimental armLow BRCA1 gem/cisIntermediate BRCA1 doc/cisHigh BRCA1 doc整理pptTwo strands of evidence for cu40Resected NSCLC pN1/pN2Q 2&3 BRCA1Q 4 BRCA1Gem/CisDocetaxelDocetaxel/CisQ 1 BRCA1 EGFR mutations in adenocarcinomas patients stratified by invasive gene signature(CSF-1,EGFR&CA IX)&tumor size Spanish Customized Adjuvant Therapy in completely resected N1&N2 NSCLC CONTROLEXPERIMENTALDocetaxel/Cis整理pptResected Q 2&3 BRCA1Q 4 BRCA41Customized adjuvant chemotherapy in stage II-IIIA NSCLCSpanish Lung Cancer Group整理pptCustomized adjuvant chemothera42BRCA1RR(95%CI)Pq10.170(0.04-0.66)0.010q2+q30.400(0.16-1)0.052q41-Survival to neoadjuvant gem/cis according to BRCA1 expression in stage III NSCLCHAZARD RATIO NMedian95%C.IPq1=14NR-0.014*q2+q3=2837.8010.6-65q4=1212.700-28.7q4q2+q3q1Taron,Rosell,Felip,et cla.Hum Molec Genet 2004整理pptBRCA1RR(95%CI)Pq10.170(0.04-43Outcome according to BRCA1,ERCC1&RRM1 mRNA in early NSCLCClinical data from R Bartolucci,F Puma,R Farabi整理pptOutcome according to BRCA1,ER44Gene expression analysis was performed in frozen tumor samples from 126 completely resected Polish NSCLC patients.NR=not reached*Survival data is not available for some patients.Gene amplification was not successfully performed in all samples for all genes.Rosell et al;ASCO 07Increased BRCA1 mRNA:an independent prognostic variable in completely resected chemonaive NSCLC patients 整理pptGene expression analysis was p45ERCC1lEssential component of NERlAssessed by:Functional germ-line polymorphismsExpression levels by mRNAExpressional levels by IHC整理pptERCC1Essential component of NE46Polymorphisms of ERCC1 and survival in cisplatin treated NSCLC.lERCC1单核苷酸多核苷酸多态性性预测铂类药物的物的疗效及患者效及患者预后后:ERCC1研究比研究比较多的多的单核苷酸多核苷酸多态性位点主要是性位点主要是Asn118Asn（C/T），第），第118位密位密码子的同子的同义突突变。携。携带有有C/C基因型的非小基因型的非小细胞肺癌患者胞肺癌患者对铂类化化疗疗效比携效比携带T/T 或或C/T 基基因型患者好，因型患者好，总体生存的体生存的时间长。lAsn118Asn（C/T）单核苷酸位点在不同人种中分布不同，核苷酸位点在不同人种中分布不同，这可能是解可能是解释不同的研究小不同的研究小组在不同人种中所做研究在不同人种中所做研究结果不同。果不同。在在亚洲人种中，目前洲人种中，目前发表的研究表的研究结果支持果支持C/C基因型是基因型是预测铂类敏感的指敏感的指标。Isla,Sarries et al.;Ann Oncol,2004 整理pptPolymorphisms of ERCC1 and sur47ERCC1 mRNA levels in advanced NSCLC treated with gemcitabine-cisplatin.l56 patients with advanced NSCLC.lLow vs high ERCC1 mRNARR:52%and 36%(p=NS),MS:15 months and 5 months(P 55lFor the study population as a whole,ERCC1 had no prognostic value.lOlaussen,Dunant et al.;N Engl J Med,2006整理pptERCC1 in IALT ResultsERCC1 was52Olaussen,Dunant et al.;N Engl J Med,2006ERCC1阴性的患者阴性的患者术后后辅助助铂类联合化合化疗能明能明显提高患者的生存（提高患者的生存（OR 0.65;95%CI:0.50-0.86;p=0.002），），然而然而ERCC1阳性的患者阳性的患者对术后含后含铂类方案方案却不能却不能获益（益（OR 1.14;95%CI:0.84-1.55;p=0.40）。）。整理pptOlaussen,Dunant et al.;N En53Low genotypic group docetaxel/cisplatinHigh genotypic groupdocetaxel/gemcitabine RANDOMIZEGenotypic armERCC1 levels1:2docetaxel/cisplatinControl armlow ERCC1 mRNAhigh ERCC1 mRNACustomizing cisplatin-based chemotherapy on quantitative ERCC1 mRNA expression:a phase III randomized trial in NSCLCCobo et al.JCO 2007整理pptLow genotypic group docetaxel 54Customizing cisplatin-based chemotherapy on quantitative ERCC1 mRNA expression:a phase III randomized trial in NSCLCCobo et al.JCO 2007整理pptCustomizing cisplatin-based ch55IALT Bio(Olaussen et al,NEJM 06)ERCC1 is a prognostic factor in CT-nave patients整理pptIALT Bio(Olaussen et al,NEJM56Tumor tissue availableTumor tissue not availableNever smokerSmokerEGFR mutationserlotinibmRNA levels(QPCR)BRCA1ERCC1MZF1MAD2BubR1Q1 gem/cisQ2&Q3 doc/cis Q4 docSerum DNANever smokerSmokerMSP66yrsCHFREGFR mutationsPBCserlotinibSNP 60 yrMet/Metdoc/cisgem/cisgem/cis14-3-3Diagnostic testing to guide treatment decisions整理pptTumor tissue availableTumor ti57Filipits,M.et al.J Clin Oncol;25:2735-2740 2007Fig 2.Kaplan-Meier analyses of overall survival according to treatment(A)in patients with p27Kip1-negative tumors and(B)in patients with p27Kip1-positive tumorsNSCLC patients with p27-negative tumors benefit from adjuvant cisplatin-based chemotherapy整理pptFilipits,M.et al.J Clin Onc58Prognostic and Predictive Importance of p53 and RAS for Adjuvant Chemotherapy in NonSmall-Cell Lung Cancerlthe prognostic and predictive value of p53 gene/protein aberrations using tumor samples from JBR.10,a North American phase III intergroup trial that randomly assigned 482 patients with completely resected stage IB and II nonsmall-cell lung cancer(NSCLC)to receive four cycles of adjuvant cisplatin plus vinorelbine or observation alone.lResults:Of 253 patients,132(52%)were positive for p53 protein overexpression.Untreated p53-positive patients had significantly shorter overall survival than did patients with p53-negative tumors).However,these p53-positive patients also had a significantly greater survival benefit from adjuvant chemotherapy compared with patients with p53-negative tumors.Mutations of p53 and RAS genes were found in 124(31%)of 397 and 117(26%)of 450 patients,respectively.lConclusion:p53 protein overexpression is a significant prognostic marker of shortened survival,and also a significant predictive marker for a differentially greater benefit from adjuvant chemotherapy in completely resected NSCLC patients.lJournal of Clinical Oncology,Vol 25,No 33(November 20),2007:pp.5240-5247整理pptPrognostic and Predictive Impo59 RRM1和和ERCC是靶向化是靶向化疗的敏感性分子指的敏感性分子指标。可根据基因表。可根据基因表达高低达高低选择个体化个体化疗方案，方案，RRM1高表达者建高表达者建议避免使用吉西避免使用吉西他他滨，ERCC1阴性者可考阴性者可考虑使用使用铂类药物治物治疗，可根据下列，可根据下列四种表达情况知道四种表达情况知道临床化床化疗：ERCC1(+)/RRM1()多多选择紫杉醇紫杉醇/吉西他吉西他滨化化疗方案；方案；ERCC1(+)/RRM1(+)可可选择长春瑞春瑞滨/紫杉醇方案；紫杉醇方案；ERCC1(-)/RRM1()可可选择铂类/吉西他吉西他滨方案；方案；ERCC1(-)/RRM1(+)可可选择铂类/紫杉醇方案。紫杉醇方案。整理ppt RRM1和和ERCC是靶向化是靶向化疗疗的敏感性分子指的敏感性分子指标标。可。可60 Molecular signatures in resected patientsPotential clinical implicationslPrognosis assessmentlObjective;selection of patients for adjuvant CT:Adjuvant chemotherapy in patients with high-risk gene signaturelMolecular signatures should be validated in adjuvant therapy trialslHow to integrate molecular signatures with single gene prognostic and predictive markers should be explored整理ppt Molecular signatures in res61肺癌肺癌抗血管生成化抗血管生成化疗Adapted from Poon RT,et al.J Clin Oncol 2001;19:120725新生血管生成在新生血管生成在肿瘤瘤发展展过程的不同程的不同阶段所扮演的角色段所扮演的角色恶变前期前期恶性性肿瘤瘤肿瘤生瘤生长血管侵血管侵袭微微转移移处于于休眠状休眠状态明明显的的转移移(肿瘤无血管瘤无血管)(血管新生开始血管新生开始)(肿瘤形成血管瘤形成血管)(肿瘤瘤细胞胞进入血管内入血管内)(远道种植道种植)(再次形成新生血管再次形成新生血管)整理ppt肺癌抗血管生成化肺癌抗血管生成化疗疗Adapted from Poon RT,62l传统的化的化疗用用药方法在理方法在理论上可上可对抗内皮抗内皮细胞的增殖，胞的增殖，但不能起到持但不能起到持续阻断血管生成的作用。阻断血管生成的作用。l密集式低密集式低剂量量给药可能会增加化可能会增加化疗药对再生内皮再生内皮细胞的胞的抗血管生成效抗血管生成效应以及以及对肿瘤瘤细胞的促凋亡效胞的促凋亡效应。这种种剂量低、量低、间歇期短、能持歇期短、能持续应用的用的给药方式称方式称抗血管生成抗血管生成化化疗,是迄今是迄今肿瘤化瘤化疗新的治新的治疗模式之一。模式之一。l小小剂量量(最大耐受量的最大耐受量的1/101/3)、长时间连续或高或高频率率(如每周如每周13 次次)给药模式。模式。抗血管生成化抗血管生成化疗整理ppt传统传统的化的化疗疗用用药药方法在理方法在理论论上可上可对对抗内皮抗内皮细细胞的增殖，但不能起到持胞的增殖，但不能起到持63靶靶细胞的胞的选择:血管内皮血管内皮细胞胞 VS 肿瘤瘤细胞胞l血管内皮血管内皮细胞基因胞基因组较为稳定定,不易不易产生耐生耐药性性;l正常成熟正常成熟组织毛毛细血管内皮血管内皮细胞胞处于静止状于静止状态,而而肿瘤血管内瘤血管内皮皮细胞增殖活胞增殖活跃,出出现许多相多相对特异的特异的标记分子分子,表达表达较正常静正常静止内皮止内皮细胞可高达胞可高达50倍以上倍以上,是潜在的抗是潜在的抗肿瘤血管靶向分子瘤血管靶向分子;l一个内皮一个内皮细胞可支持胞可支持50100肿瘤瘤细胞的生胞的生长。因此。因此针对血管血管内皮内皮细胞比直接胞比直接针对肿瘤瘤细胞更胞更为有效有效;l针对肿瘤血管治瘤血管治疗策略具有抗瘤的广策略具有抗瘤的广谱性。性。l重重组内皮抑素具有抑制内皮抑素具有抑制肿瘤瘤组织新生血管生成和直接抑制新生血管生成和直接抑制肿瘤瘤细胞生胞生长及迁移的双重抗及迁移的双重抗肿瘤活性。瘤活性。整理ppt靶靶细细胞的胞的选择选择:血管内皮血管内皮细细胞胞 VS 肿肿瘤瘤细细胞血管内皮胞血管内皮细细胞胞64抗血管生成化抗血管生成化疗药物物筛选标准准差异的差异的细胞毒性：抑制内皮胞毒性：抑制内皮细胞胞剂量量应低于低于对肿瘤瘤细胞胞干干扰内皮内皮细胞功能：紫杉醇胞功能：紫杉醇明确的作用机制：抑制血管生成具体明确的作用机制：抑制血管生成具体环节体内抑制血管生成：如紫杉醇体内抑制血管生成：如紫杉醇整理ppt抗血管生成化抗血管生成化疗药疗药物物筛选标筛选标准整理准整理ppt65抗血管生成化抗血管生成化疗显示示较强的的临床床应用价用价值:为常常规化化疗不敏感或不敏感或(和和)复复发患者的治患者的治疗开辟新开辟新领域域,由于无明由于无明显骨髓毒性骨髓毒性,也也为因体力不支、状因体力不支、状态不佳等因不佳等因素不宜接受常素不宜接受常规化化疗的患者提供新的治的患者提供新的治疗方法方法;不存在耐不存在耐药,可用于常可用于常规化化疗后耐后耐药患者患者;与与传统抗血管生成抑制抗血管生成抑制剂联合合疗效更佳效更佳;与常与常规化化疗、放、放疗联合可能会使合可能会使疗效效进一步提高。一步提高。整理ppt抗血管生成化抗血管生成化疗显疗显示示较较强强的的临临床床应应用价用价值值:整理整理ppt66四四.典型病例典型病例张X，男，男，57岁,右上肺低分化腺癌并多右上肺低分化腺癌并多发性骨性骨转移移T3N2M1，期，期，MRP(+),p-gp(+),ERCC1(-),RRM1(+).整理ppt四四.典型病例典型病例张张X，男，男，57岁岁,右上肺低分化腺癌并多右上肺低分化腺癌并多发发性性67治治疗前前整理ppt治治疗疗前整理前整理ppt68治治疗后后整理ppt治治疗疗后整理后整理ppt69整理ppt整理整理ppt70小小结与展望与展望MDR分子机制深入研究将分子机制深入研究将实现对肺癌的肺癌的发生机生机制、制、诊断及化学治断及化学治疗的突破性的突破性。肺癌患者化肺癌患者化疗耐耐药分子分子标志基因与化志基因与化疗疗效之效之间关系能关系能够尽早得到建立。尽早得到建立。根据肺癌患者化根据肺癌患者化疗耐耐药分子分子标志，精确志，精确选择并并制定特异化制定特异化疗方案，科学方案，科学调整个体化整个体化剂量，量，实现肺癌个体化性化肺癌个体化性化疗方案方案疗效的新效的新飞跃。整理ppt小小结结与展望与展望MDR分子机制深入研究将分子机制深入研究将实现对实现对肺癌的肺癌的发发生机制、生机制、诊诊断断71整理ppt谢谢谢谢整理整理ppt72