网织红细胞检测进展及其临床应用课件

网网织红细胞胞检测进展展及其及其临床床应用用网织红细胞检测进展及其临床应用网织红细胞检测进展及其临床应用概述 网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞(reticulocyte(reticulocyte，Ret)Ret)是是是是介介介介于于于于晚晚晚晚幼幼幼幼红红红红细细细细胞胞胞胞和和和和成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞之之之之间间间间的的的的过过过过渡渡渡渡阶阶阶阶段段段段细细细细胞胞胞胞，略略略略大大大大于于于于成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞。网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞是是是是有有有有核核核核红红红红细细细细胞胞胞胞刚刚刚刚刚刚刚刚失失失失去去去去核核核核的的的的阶阶阶阶段段段段，仍仍仍仍属属属属未未未未完完完完全全全全成成成成熟熟熟熟的的的的红红红红细细细细胞胞胞胞，浆浆浆浆内内内内尚尚尚尚残残残残留留留留有有有有嗜嗜嗜嗜碱碱碱碱性性性性RNARNA，经经经经碱碱碱碱性性性性染染染染料料料料（如如如如天天天天青青青青B B、煌煌煌煌焦焦焦焦油油油油蓝蓝蓝蓝或或或或新新新新亚亚亚亚甲甲甲甲蓝蓝蓝蓝）活活活活体体体体染染染染色色色色后后后后，在在在在包包包包体体体体内内内内可可可可见见见见蓝蓝蓝蓝色点状或网状结构，故名网织红细胞。色点状或网状结构，故名网织红细胞。色点状或网状结构，故名网织红细胞。色点状或网状结构，故名网织红细胞。2021/4/272概述 网织红细胞(reticulocy概述 红红红红细细细细胞胞胞胞在在在在骨骨骨骨髓髓髓髓中中中中生生生生成成成成，至至至至发发发发育育育育为为为为成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞，经经经经历历历历了了了了不不不不同同同同阶阶阶阶段段段段：干干干干细细细细胞胞胞胞、原原原原始始始始红红红红细细细细胞胞胞胞、早早早早幼幼幼幼红红红红细细细细胞胞胞胞、中中中中幼幼幼幼红红红红细细细细胞胞胞胞、晚晚晚晚幼幼幼幼红红红红细细细细胞胞胞胞、网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞，最最最最后后后后发发发发育育育育为为为为成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞。随随随随着着着着细细细细胞胞胞胞的的的的成成成成熟熟熟熟，RNARNA含含含含量量量量逐逐逐逐渐渐渐渐减减减减低低低低，至至至至细细细细胞胞胞胞完完完完全全全全成成成成熟熟熟熟后后后后消消消消失失失失或或或或接接接接近近近近消消消消失失失失，即即即即红红红红细细细细胞胞胞胞中中中中网网网网线线线线状状状状结结结结构构构构越越越越多多多多，表表表表示示示示细细细细胞胞胞胞越越越越幼幼幼幼稚稚稚稚。ICSHICSH将将将将RetRet分分分分为为为为4 4型型型型：型型型型（丝丝丝丝球球球球型型型型）、型型型型（花花花花冠冠冠冠型型型型或或或或网网网网型型型型）、型型型型（破破破破网网网网型型型型）、型型型型（颗颗颗颗粒粒粒粒型型型型）。正正正正常常常常生生生生理理理理状状状状态态态态下下下下，型型型型只只只只存存存存在在在在于于于于骨骨骨骨髓髓髓髓，型型型型在在在在外外外外周周周周血血血血也也也也很很很很难难难难见见见见到到到到，型型型型仅仅仅仅有有有有少少少少量量量量释释释释放放放放到到到到外外外外周周周周血血血血，因因因因此此此此外外外外周周周周血网织红细胞计数时以血网织红细胞计数时以血网织红细胞计数时以血网织红细胞计数时以型为主。型为主。型为主。型为主。2021/4/273概述 红细胞在骨髓中生成，至发育为成2021/4/2742021/4/274概述 RetRet是是是是红红红红细细细细胞胞胞胞成成成成熟熟熟熟过过过过程程程程中中中中的的的的一一一一个个个个重重重重要要要要阶阶阶阶段段段段，是是是是判判判判断断断断骨骨骨骨髓髓髓髓红红红红系系系系造造造造血血血血情情情情况况况况和和和和疗疗疗疗效效效效观观观观察察察察的的的的重重重重要要要要指指指指标标标标。其其其其检检检检测测测测方方方方法法法法既既既既有有有有传传传传统统统统的的的的显显显显微微微微镜镜镜镜目目目目测测测测法法法法，又又又又有有有有现现现现代代代代化化化化的的的的仪仪仪仪器器器器计计计计数数数数法法法法(如如如如流流流流式式式式细细细细胞胞胞胞仪仪仪仪、网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞计计计计数数数数仪仪仪仪及及及及血血血血细细细细胞胞胞胞分分分分析析析析仪仪仪仪)。现现现现对对对对RetRet的的的的检检检检测测测测进进进进展展展展，各各各各检检检检测测测测方方方方法法法法的的的的优优优优缺缺缺缺点点点点及及及及其其其其在在在在临临临临床床床床上上上上的的的的应应应应用用用用逐一讲述。逐一讲述。逐一讲述。逐一讲述。2021/4/275概述 Ret是红细胞成熟过程中的一个重要阶段，网织红细胞检测进展1.手工法手工法2.血细胞分析仪法血细胞分析仪法3.流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪2021/4/276网织红细胞检测进展1.手工法2021/4/2761.手工法 手手手手工工工工法法法法分分分分玻玻玻玻片片片片法法法法和和和和试试试试管管管管法法法法。由由由由于于于于玻玻玻玻片片片片法法法法容容容容易易易易使使使使混混混混合合合合血血血血液液液液中中中中的的的的水水水水分分分分蒸蒸蒸蒸发发发发，染染染染色色色色时时时时间间间间偏偏偏偏短短短短，因因因因此此此此结结结结果果果果偏偏偏偏低低低低；试试试试管管管管法法法法容容容容易易易易掌掌掌掌握握握握，重重重重复复复复性性性性较较较较好好好好，必必必必要要要要时时时时还还还还可可可可以以以以从从从从混混混混合合合合血血血血液液液液中中中中再再再再取取取取标标标标本本本本重重重重新新新新涂涂涂涂片片片片复复复复查查查查。试试试试管管管管法法法法被被被被列列列列为为为为手手手手工工工工法法法法RetRet计计计计数数数数的的的的参参参参考考考考方方方方法法法法。按按按按卫卫卫卫生生生生部部部部全全全全国国国国临临临临床床床床检检检检验验验验操操操操作作作作规规规规程程程程第第第第2 2版版版版，采采采采用用用用试试试试管管管管法法法法用用用用煌煌煌煌焦焦焦焦油油油油蓝蓝蓝蓝染染染染液液液液对对对对血血血血液液液液标标标标本本本本进进进进行行行行红红红红细细细细胞胞胞胞活活活活体体体体染染染染色色色色、制制制制片片片片，选选选选择择择择细细细细胞胞胞胞分分分分布布布布较较较较均均均均匀匀匀匀、厚厚厚厚薄薄薄薄适适适适中中中中的的的的体体体体尾尾尾尾交交交交界界界界处处处处，每每每每份份份份标标标标本本本本油油油油镜镜镜镜下下下下参参参参照照照照陈陈陈陈宝宝宝宝梁梁梁梁的的的的建建建建议议议议 ，即即即即Ret6 Ret6%，计计计计数数数数红红红红细细细细胞胞胞胞10001000个个个个；3%3%5 5%计计计计数数数数红红红红细细细细胞胞胞胞20002000个个个个；1 1%2%2%应应应应计计计计数数数数红红红红细细细细胞胞胞胞40004000个个个个；小小小小于于于于1 1%计计计计数数数数红红红红细细细细胞胞胞胞1000010000个。个。个。个。2021/4/2771.手工法2021/4/2771.手工法 传传传传统统统统的的的的显显显显微微微微镜镜镜镜计计计计数数数数方方方方法法法法操操操操作作作作较较较较繁繁繁繁琐琐琐琐、影影影影响响响响结结结结果果果果的的的的因因因因素素素素较较较较多多多多。近近近近年年年年来来来来，国国国国内内内内开开开开始始始始使使使使用用用用国国国国际际际际血血血血液液液液学学学学标标标标准准准准化化化化委委委委员员员员会会会会(ICSH)(ICSH)推推推推荐荐荐荐的的的的MillerMiller窥窥窥窥盘盘盘盘进进进进行行行行计计计计数数数数，规规规规范范范范了了了了计计计计算算算算区区区区域域域域，减减减减少少少少了了了了实实实实验验验验误误误误差差差差，使使使使结结结结果果果果准准准准确确确确性性性性有有有有所所所所提提提提高高高高(卫卫卫卫生生生生部部部部临临临临检检检检中中中中心心心心建建建建议议议议，CVCV控控控控制制制制在在在在15 15%之之之之内内内内)。MillerMiller窥窥窥窥盘盘盘盘法法法法是是是是将将将将一一一一种种种种光光光光学学学学圆圆圆圆片片片片状状状状MillerMiller窥窥窥窥盘盘盘盘安安安安放放放放在在在在显显显显微微微微镜镜镜镜目目目目镜镜镜镜中中中中，窥窥窥窥盘盘盘盘中中中中有有有有面面面面积积积积比比比比例例例例为为为为1 1：9 9的的的的2 2个个个个正正正正方方方方形形形形计计计计数数数数方方方方格格格格，只只只只需需需需计计计计数数数数1 19 9小小小小方方方方格格格格内内内内的的的的红红红红细细细细胞胞胞胞即即即即可可可可准准准准确估量出整个大方格内的红细胞数量。确估量出整个大方格内的红细胞数量。确估量出整个大方格内的红细胞数量。确估量出整个大方格内的红细胞数量。2021/4/2781.手工法 传统的显微镜计数方法操作较繁琐、影卫生部临床检验中心控制卫生部临床检验中心控制RetRet计数计数CV15%CV15%需镜检的需镜检的RBCRBC数目数目Ret(%)Ret(%)计数计数计数计数MillerMiller窥盘小方窥盘小方窥盘小方窥盘小方格格格格RBC RBC 相当于缩视野法计数相当于缩视野法计数相当于缩视野法计数相当于缩视野法计数RBCRBC数目数目数目数目 1-21-2444444400040003-53-52222222000200066111111100010002021/4/279卫生部临床检验中心控制Ret计数CV15%需镜检的RBC数1.手工法 国国国国内内内内很很很很多多多多学学学学者者者者在在在在此此此此基基基基础础础础上上上上设设设设计计计计了了了了几几几几种种种种改改改改良良良良的的的的RetRet计计计计数数数数窥窥窥窥盘盘盘盘。张张张张时时时时民民民民等等等等设设设设计计计计了了了了一一一一种种种种双双双双环环环环式式式式结结结结构构构构的的的的RetRet计计计计数数数数窥窥窥窥盘盘盘盘，该该该该盘盘盘盘的的的的特特特特点点点点是是是是小小小小圆圆圆圆环环环环和和和和大大大大圆圆圆圆环环环环面面面面积积积积之之之之比比比比为为为为1 1：1010，小小小小圆圆圆圆环环环环为为为为计计计计数数数数红红红红细细细细胞胞胞胞数数数数量量量量，大大大大圆圆圆圆环环环环为为为为计计计计数数数数RetRet数数数数量量量量。其其其其圆圆圆圆形形形形结结结结构构构构更更更更加加加加适适适适合合合合于于于于人人人人们们们们观观观观察察察察和和和和计计计计数数数数显显显显微微微微镜镜镜镜下下下下细细细细胞胞胞胞数数数数量量量量的的的的习习习习惯惯惯惯，而而而而且且且且此此此此比比比比例例例例更更更更加加加加易易易易于于于于计计计计算算算算红细胞和红细胞和红细胞和红细胞和RetRet的比值。的比值。的比值。的比值。2021/4/27101.手工法 国内很多学者在此基础上设计了1.手工法 陈陈陈陈高高高高远远远远则则则则在在在在这这这这两两两两种种种种窥窥窥窥盘盘盘盘的的的的基基基基础础础础上上上上设设设设计计计计了了了了改改改改良良良良式式式式MillerMiller窥窥窥窥盘盘盘盘，采采采采用用用用双双双双正正正正方方方方形形形形结结结结构构构构，小小小小方方方方格格格格和和和和大大大大方方方方格格格格之之之之比比比比也也也也达达达达到到到到1 1：1010，只只只只是是是是将将将将红红红红细细细细胞胞胞胞计计计计数数数数区区区区域域域域位位位位移移移移至至至至中中中中心心心心部部部部位位位位，以以以以方方方方便便便便红红红红细细细细胞胞胞胞数数数数量量量量的计数。的计数。的计数。的计数。2021/4/27111.手工法 陈高远则在这两种窥盘的基础上1.手工法 刘刘刘刘志志志志贤贤贤贤设设设设计计计计了了了了一一一一种种种种新新新新的的的的RetRet计计计计数数数数窥窥窥窥盘盘盘盘即即即即180180 4 4扇扇扇扇形形形形RetRet计计计计数数数数窥窥窥窥盘盘盘盘：圆圆圆圆形形形形直直直直 径径径径 为为为为 19 19 mmmm，圆圆圆圆 心心心心 角角角角 AOB=AOB=COD=COD=EOF=EOF=GOH=180GOH=180。弧弧弧弧AB=CD=EF=GH=180AB=CD=EF=GH=180。计计计计算算算算公公公公式式式式为为为为：Ret Ret%=%=整整整整个个个个计计计计数数数数区区区区域域域域内内内内的的的的RetRet数数数数(4(4个个个个 小小小小 扇扇扇扇 面面面面 区区区区 域域域域 内内内内 的的的的 RBCRBC总总总总 数数数数5)1005)100 。这这这这种种种种新新新新型型型型RetRet计计计计数数数数窥窥窥窥盘盘盘盘4 4个个个个扇扇扇扇形形形形区区区区域域域域均均均均匀匀匀匀分分分分布布布布在在在在整整整整个个个个视视视视野野野野的的的的4 4个个个个方方方方向向向向，4 4个个个个扇扇扇扇形形形形面面面面积积积积之之之之和和和和是是是是整整整整个个个个圆圆圆圆形形形形面面面面积积积积的的的的1 15 5，因因因因此此此此在在在在理理理理论论论论上上上上基基基基本本本本解解解解决决决决了了了了红红红红细细细细胞胞胞胞分分分分布布布布不不不不均均均均匀匀匀匀引引引引起起起起的的的的问问问问题题题题，降低了系统误差和随机误差降低了系统误差和随机误差降低了系统误差和随机误差降低了系统误差和随机误差 。2021/4/27121.手工法 刘志贤设计了一种新的手工法网织红细胞活体染色染料评价染料染料染料染料评价评价评价评价新亚甲蓝新亚甲蓝新亚甲蓝新亚甲蓝WHOWHO推荐使用，对推荐使用，对RNARNA着色强，试剂稳定，着色强，试剂稳定，HbHb几乎不着色几乎不着色煌焦油蓝煌焦油蓝煌焦油蓝煌焦油蓝溶解度低，染料沉渣易附着红细胞表面，溶解度低，染料沉渣易附着红细胞表面，影响辨认；易受变性珠蛋白小体、影响辨认；易受变性珠蛋白小体、HbHHbH包包涵体干扰涵体干扰中性红中性红中性红中性红染液浓度低、背景清晰、网织颗粒与红细染液浓度低、背景清晰、网织颗粒与红细胞对比鲜明；不受变性珠蛋白小体、胞对比鲜明；不受变性珠蛋白小体、HbHHbH包涵体干扰包涵体干扰2021/4/2713手工法网织红细胞活体染色染料评价染料评价新亚甲蓝WHO推荐使2.血细胞分析仪法 19931993年年年年以以以以来来来来，可可可可进进进进行行行行RetRet计计计计数数数数的的的的血血血血细细细细胞胞胞胞分分分分析析析析仪仪仪仪相相相相继继继继问问问问世世世世，因因因因其其其其具具具具有有有有重重重重复复复复性性性性好好好好、准准准准确确确确度度度度高高高高、省省省省时时时时等等等等优优优优点点点点，正正正正被被被被越越越越来来来来越越越越多多多多的的的的医医医医院院院院所所所所采采采采用用用用。仪仪仪仪器器器器法法法法RetRet计计计计数数数数使使使使用用用用各各各各种种种种荧荧荧荧光光光光染染染染料料料料和和和和非非非非荧荧荧荧光光光光染染染染料料料料对对对对RetRet进进进进行行行行染染染染色色色色，采采采采用用用用鞘鞘鞘鞘流流流流技技技技术术术术和和和和射射射射频频频频技技技技术术术术等等等等不不不不同同同同原原原原理理理理进进进进行行行行检检检检测测测测。血血血血细细细细胞胞胞胞计计计计数数数数仪仪仪仪不不不不仅仅仅仅可可可可以以以以计计计计数数数数RetRet，同同同同时时时时还还还还能能能能检检检检测测测测出出出出网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞绝绝绝绝对对对对值值值值Ret#Ret#、网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞平平平平均均均均体体体体积积积积(MRV)(MRV)、网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞成成成成熟熟熟熟指指指指数数数数(RMI)(RMI)等等等等许许许许多多多多参参参参数数数数，这这这这些些些些参参参参数数数数是是是是RetRet分析、临床应用和研究的热门领域。分析、临床应用和研究的热门领域。分析、临床应用和研究的热门领域。分析、临床应用和研究的热门领域。2021/4/27142.血细胞分析仪法 1993年以来，可2.血细胞分析仪法 统统计计表表明明，仪仪器器法法测测定定Ret精精密密度度有有明明显显提提高高：对对低低Ret标标本本，CV值值在在10%21%之之间间；对对正正常常范范围围的的标标本本，C V值值在在3%16%之之间间；高高值值标标本本，C V值在值在2%10%之间。之间。2021/4/27152.血细胞分析仪法 统计表明，仪器法测定2.血细胞分析仪法 虽虽虽虽然然然然仪仪仪仪器器器器法法法法RetRet计计计计数数数数有有有有诸诸诸诸多多多多优优优优点点点点，而而而而且且且且精精精精密密密密度度度度明明明明显显显显优优优优于于于于手手手手工工工工法法法法，但但但但也也也也存存存存在在在在一一一一些些些些不不不不足足足足 ：第第第第一一一一，所所所所有有有有仪仪仪仪器器器器分分分分析析析析的的的的基基基基本本本本原原原原理理理理都都都都是是是是检检检检测测测测RetRet内内内内RNA RNA 的的的的存存存存在在在在量量量量来来来来决决决决定定定定其其其其百百百百分分分分率率率率和和和和绝绝绝绝对对对对值值值值，当当当当某某某某些些些些患患患患者者者者血血血血液液液液中中中中有有有有核核核核细细细细胞胞胞胞或或或或淋淋淋淋巴巴巴巴细细细细胞胞胞胞异异异异常常常常增增增增加加加加时时时时，可可可可导导导导致致致致RetRet计计计计数数数数结结结结果果果果的的的的假假假假性性性性增增增增加加加加；第第第第二二二二，冷冷冷冷凝凝凝凝集集集集素素素素存存存存在在在在、红红红红细细细细胞胞胞胞的的的的聚聚聚聚集集集集、某某某某些些些些病病病病理理理理因因因因素素素素或或或或药药药药物物物物都都都都能能能能使使使使红红红红细细细细胞胞胞胞产产产产生生生生自自自自身身身身荧荧荧荧光光光光；第第第第三三三三，自自自自动动动动化化化化分分分分析析析析仪仪仪仪结结结结果果果果的的的的准准准准确确确确性性性性除除除除了了了了依依依依赖赖赖赖于于于于仪仪仪仪器器器器本本本本身身身身的的的的良良良良好好好好性性性性能能能能外外外外，还还还还应应应应有有有有良良良良好好好好的的的的质质质质控控控控物物物物随随随随时时时时检检检检测测测测仪仪仪仪器器器器的的的的状状状状态态态态。另另另另外外外外，仪仪仪仪器器器器成成成成本本本本高高高高、价价价价格格格格贵贵贵贵，基层医疗单位投入较为困难。基层医疗单位投入较为困难。基层医疗单位投入较为困难。基层医疗单位投入较为困难。2021/4/27162.血细胞分析仪法 虽然仪器法Ret计3.流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪 流流流流式式式式细细细细胞胞胞胞仪仪仪仪(flowcytometry(flowcytometry，FCM)FCM)是是是是一一一一种种种种多多多多用用用用途途途途的的的的精精精精密密密密分分分分析析析析仪仪仪仪器器器器，应应应应用用用用派派派派若若若若宁宁宁宁、吖吖吖吖啶啶啶啶橙橙橙橙、噻噻噻噻唑唑唑唑橙橙橙橙等等等等这这这这些些些些特特特特殊殊殊殊的的的的荧荧荧荧光光光光染染染染料料料料与与与与RetRet中中中中的的的的RNARNA结结结结合合合合，当当当当FCM FCM 发发发发出出出出的的的的激激激激光光光光照照照照射射射射于于于于细细细细胞胞胞胞上上上上时时时时，根根根根据据据据细细细细胞胞胞胞能能能能否否否否发发发发射射射射出出出出特特特特定定定定颜颜颜颜色色色色的的的的荧荧荧荧光光光光，通通通通过过过过单单单单参参参参数数数数定定定定量量量量测测测测定定定定RNARNA，从从从从而而而而精精精精确确确确测测测测定定定定RetRet占占占占成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞的的的的比比比比率率率率。还还还还可可可可根根根根据据据据激激激激光光光光照照照照射射射射后后后后发发发发射射射射出出出出的的的的荧荧荧荧光光光光强强强强度度度度，或或或或光光光光吸吸吸吸收收收收量量量量大大大大小小小小、光光光光散散散散射射射射量量量量多多多多少少少少等等等等参参参参数数数数的的的的比比比比例例例例关关关关系系系系对对对对RetRet成成成成熟熟熟熟程程程程度度度度进进进进行行行行分分分分群群群群，将将将将其其其其划划划划分分分分为为为为低低低低荧荧荧荧光光光光强强强强度度度度网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞(LFR)(LFR)、中中中中荧荧荧荧光光光光强强强强度度度度网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞(MFR)(MFR)、高荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞(HFR)(HFR)。2021/4/27173.流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪 3.流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪 FCM FCM 测测测测定定定定精精精精密密密密度度度度明明明明显显显显高高高高于于于于手手手手工工工工法法法法3 36 6倍倍倍倍，可可可可在在在在数数数数秒秒秒秒中中中中检检检检测测测测2000020000个个个个以以以以上上上上的的的的红红红红细细细细胞胞胞胞，如如如如RetRet在在在在1.71.76.6 6.6%，其其其其平平平平均均均均CVCV值值值值在在在在4.3 4.3%。不不不不足足足足之之之之处处处处，流流流流式式式式细细细细胞胞胞胞仪仪仪仪计计计计数数数数RetRet受受受受HOWELLHOWELLJollyJolly小体、疟原虫和血小板等干扰。小体、疟原虫和血小板等干扰。小体、疟原虫和血小板等干扰。小体、疟原虫和血小板等干扰。2021/4/27183.流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪 FCM 网织红细胞计数方法学评价检测方法检测方法检测方法检测方法评价评价评价评价普通显微镜法普通显微镜法普通显微镜法普通显微镜法简便、成本低，可直观细胞形态；影响因素多，简便、成本低，可直观细胞形态；影响因素多，重复性差重复性差玻片法玻片法水分易蒸发，染色时间短，结果偏低水分易蒸发，染色时间短，结果偏低试管法试管法易掌握，重复性较好，易复查易掌握，重复性较好，易复查MillerMiller窥盘计数法窥盘计数法规范计算区域，减少了实验误差，规范计算区域，减少了实验误差，ICSHICSH推荐方推荐方法法仪器法仪器法仪器法仪器法检测细胞多，精密度高，与手工法相关性好，检测细胞多，精密度高，与手工法相关性好，易标准化。仪器贵；受易标准化。仪器贵；受H-JH-J小体、有核红细胞、小体、有核红细胞、血小板等干扰血小板等干扰2021/4/2719网织红细胞计数方法学评价检测方法评价普通显微镜法简便、成本低网织红细胞检测的临床应用 Ret计计数数及及其其各各种种参参数数(IRF、RMI、MRV、RPI等等)在在贫贫血血的的诊诊治治、骨骨髓髓移移植植、肿肿瘤瘤的的放放化化疗疗和和药药物物疗疗效效检检测测等等方方面面具具有重要参考价值。有重要参考价值。2021/4/2720网织红细胞检测的临床应用 Ret计数及其各1网织红细胞计数的应用 贫贫贫贫血血血血的的的的恢恢恢恢复复复复是是是是通通通通过过过过骨骨骨骨髓髓髓髓释释释释放放放放红红红红细细细细胞胞胞胞生生生生成成成成素素素素(EPO)(EPO)完完完完成成成成的的的的，RetRet增增增增加加加加可可可可被被被被看看看看成成成成是是是是骨骨骨骨髓髓髓髓造造造造血血血血功功功功能能能能对对对对贫贫贫贫血血血血的的的的正正正正常常常常反反反反应应应应。失失失失血血血血性性性性贫贫贫贫血血血血时时时时患患患患者者者者RetRet各各各各项项项项指指指指标标标标会会会会显显显显著著著著增增增增高高高高，失失失失血血血血5 510 10 d d内内内内RetRet可可可可达达达达高高高高峰峰峰峰，出出出出血血血血停停停停止止止止后后后后2 2周周周周可可可可恢恢恢恢复复复复正正正正常常常常，临临临临床床床床上上上上可可可可应应应应用用用用此此此此参参参参数数数数和和和和特特特特点点点点来来来来判判判判别别别别出出出出血血血血是是是是否否否否停停停停止止止止；缺缺缺缺铁铁铁铁性性性性贫贫贫贫血血血血、巨巨巨巨幼幼幼幼细细细细胞胞胞胞性性性性贫贫贫贫血血血血时时时时也也也也可可可可见见见见患患患患者者者者RetRet轻轻轻轻度度度度增增增增加加加加。RetRet降降降降低低低低主主主主要要要要和和和和造造造造血血血血功功功功能能能能减减减减低低低低有有有有关关关关，典典典典型型型型病病病病例例例例为为为为原原原原发发发发性性性性再再再再生生生生障障障障碍碍碍碍性性性性贫贫贫贫血血血血、溶溶溶溶血血血血性性性性再再再再生生生生障障障障碍碍碍碍性性性性危危危危象象象象；此此此此外外外外还还还还有有有有急急急急性性性性白白白白血血血血病病病病、继继继继发发发发性性性性再再再再生生生生障障障障碍碍碍碍性性性性贫贫贫贫血血血血、化化化化疗疗疗疗和和和和放放放放疗疗疗疗引引引引起起起起的的的的骨骨骨骨髓髓髓髓造造造造血血血血功功功功能能能能抑抑抑抑制制制制或减退等或减退等或减退等或减退等。2021/4/27211网织红细胞计数的应用 贫血的恢复是2网织红细胞生成指数(RPI)的应用 RPI代代表表网网织织红红细细胞胞的的生生成成相相当当于于正正常常人人的的多多少少倍倍。不不同同生生理理、病病理理情情况况下下，Ret从从骨骨髓髓释释放放人人外外周周血血所所需需时时间间不不同同，故故Ret计计数数值值不不能能确确切切反反映映骨骨髓髓红红细细胞胞系系统统造造血血功功能能，还还应应考考虑虑Ret生生存存期期限限。通通常常Ret生生存存期期限限约约为为2d，若若未未成成熟熟网网织织红红细细胞胞提提前前释释放放入入血血，Ret生生存存期期限限将将延延长长，为为了了纠纠正正网网织织红红细细胞胞提提前前释释放放引引起起的的偏偏差差，用用RPI来来反反映映Ret生成速率。生成速率。2021/4/27222网织红细胞生成指数(RPI)的应用 R2网织红细胞生成指数(RPI)的应用 RPI=RPI=RET%RET%被被被被测测测测HCT/HCT/正正正正常常常常人人人人HCT HCT 1/1/RET RET 成成成成熟熟熟熟天天天天数数数数。释释释释放放放放入入入入外外外外周周周周血血血血的的的的网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞越越越越趋趋趋趋于于于于幼幼幼幼稚稚稚稚，其其其其成成成成熟熟熟熟时时时时间间间间越越越越长长长长。由由由由于于于于网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞体体体体积积积积大大大大于于于于成成成成熟熟熟熟红红红红细细细细胞胞胞胞，大大大大量量量量网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞的的的的提提提提前前前前释释释释放放放放在在在在某某某某种种种种程程程程度度度度上上上上影影影影响响响响血血血血细细细细胞胞胞胞比比比比容容容容的的的的测测测测定定定定结结结结果果果果。经经经经观观观观察察察察，网网网网织织织织红红红红细细细细胞胞胞胞成成成成熟熟熟熟时时时时间间间间与与与与HctHct存存存存在在在在下下下下列列列列关关关关系系系系 HCTHCT0.39-0.450.39-0.450.34-0.380.34-0.380.24-0.330.24-0.330.15-0.230.15-0.230.150.15RetRet成熟成熟时间时间(d)(d)1 11.51.52.02.02.52.53.03.02021/4/27232网织红细胞生成指数(RPI)的应用 2网织红细胞生成指数(RPI)的应用 RPI在在估估计计红红细细胞胞生生成成有有效效性性和和贫贫血血起起因因的的分分类类方方法法中中起起到到重重要要作作用用。Kinetic等等应应用用RPI较较为为准准确确地地表表达达出出Ret的的成成熟熟状状态态，从从而而对对贫贫血血的的类类型型进进行行划划分分，如如健健康康者者平平均均RPI为为1，当当RPI3时时表表示示红红细细胞胞生生成成增增加加，如如溶溶血血性性贫贫血血和和治治疗疗后后的的营营养养性性贫贫血血；而而RPI2时时为为红红细细胞胞生生成成减减少少，如如缺缺铁铁性性贫贫血血；对对于于EPO缺缺乏乏、无无效效造造血血等等情情况况时时，RPI多多在在23之间，之间，Kinetic法则还无法确定。法则还无法确定。2021/4/27242网织红细胞生成指数(RPI)的应用 3网织红细胞成熟度(IRF)的应用 IRFIRF为为为为不不不不成成成成熟熟熟熟的的的的RetRet与与与与总总总总RetRet的的的的比比比比值值值值，健健健健康康康康者者者者平平平平均均均均值值值值为为为为0.220.22，参参参参考考考考范范范范围围围围0.10.10.380.38，IRFIRF越越越越大大大大表表表表示示示示不不不不成成成成熟熟熟熟的的的的RetRet的的的的数数数数量量量量越越越越多多多多。这这这这种种种种幼幼幼幼稚稚稚稚RetRet水水水水平平平平的的的的改改改改变变变变一一一一般般般般比比比比患患患患者者者者HGBHGB、血血血血小小小小板板板板、白白白白细细细细胞胞胞胞和和和和临临临临床床床床症症症症状状状状的的的的变变变变化化化化出出出出现现现现更更更更早早早早。IRFIRF和和和和HFRHFR的的的的增增增增高高高高在在在在很很很很多多多多白白白白血血血血病病病病患患患患者者者者化化化化疗疗疗疗中中中中是是是是与与与与粒粒粒粒细细细细胞胞胞胞反反反反应应应应一一一一致致致致的的的的指指指指标标标标和和和和骨骨骨骨髓髓髓髓移移移移植植植植后后后后恢恢恢恢复复复复的的的的第第第第一一一一信信信信号号号号 。IRFIRF与与与与Ret#Ret#和和和和RPIRPI呈呈呈呈一一一一弱弱弱弱的的的的、显显显显著著著著的的的的正正正正相相相相关关关关：IRFIRF增增增增加加加加(0.23)(0.23)，一一一一般般般般伴伴伴伴有有有有Ret#Ret#增增增增加加加加，提提提提示示示示患患患患者者者者对对对对于于于于贫贫贫贫血血血血有有有有足足足足够够够够的的的的红红红红系系系系反反反反应应应应；若若若若IRFIRF0.230.23，且且且且RPIRPI 2 2，则则则则说说说说明明明明红红红红系系系系造造造造血血血血活活活活性性性性下下下下降降降降，则则则则以以以以慢慢慢慢性性性性肾肾肾肾功功功功能能能能不不不不全全全全居居居居多多多多；Ret#Ret#正正正正常常常常或或或或略略略略低低低低，RPI2RPI2，但但但但IRF0.23IRF0.23，见见见见于于于于急急急急性性性性感感感感染染染染、镰镰镰镰状状状状细细细细胞胞胞胞性性性性贫贫贫贫血血血血危危危危象象象象、妊妊妊妊娠娠娠娠和和和和MDSMDS等等等等状状状状况况况况。IRFIRF是是是是评评评评价价价价贫贫贫贫血血血血红红红红系系系系增增增增生生生生活活活活性性性性的的的的一一一一项项项项新新新新的的的的有有有有用用用用的的的的指指指指标标标标，IRFIRF结结结结合合合合Ret#Ret#和和和和RPIRPI可可可可以以以以为为为为进进进进一一一一步步步步阐阐阐阐明明明明贫血分类提供有价值的信息。贫血分类提供有价值的信息。贫血分类提供有价值的信息。贫血分类提供有价值的信息。2021/4/27253网织红细胞成熟度(IRF)的应用 4网织红细胞成熟指数(RMI)的应用 该该该该参参参参数数数数是是是是计计计计算算算算参参参参数数数数，可可可可由由由由仪仪仪仪器器器器自自自自动动动动计计计计算算算算，也也也也可可可可将将将将仪仪仪仪器器器器测测测测定定定定的的的的RetRet分分分分群群群群参参参参数数数数经经经经过过过过人人人人工工工工计计计计算算算算得得得得 到到到到。计计计计 算算算算 公公公公 式式式式 为为为为：RMI=(MFR+HFR)RMI=(MFR+HFR)LFR100 LFR100%。文文文文献献献献报报报报道道道道RMIRMI的的的的参参参参考考考考范范范范围围围围，男男男男性性性性：17 17%37 37%，女女女女性性性性：1 1 6 6%35 35%。据据据据报报报报道道道道，急急急急性性性性白白白白血血血血病病病病化化化化疗疗疗疗后后后后Ret#Ret#正正正正常常常常而而而而RMIRMI较较较较高高高高，化化化化疗疗疗疗中中中中则则则则Ret#Ret#和和和和RMIRMI都都都都低低低低；出出出出现现现现溶溶溶溶血血血血危危危危象象象象时时时时Ret#Ret#和和和和RMIRMI都高；都高；都高；都高；ITPITP则则则则Ret#Ret#正常而正常而正常而正常而RMIRMI较高。较高。较高。较高。2021/4/27264网织红细胞成熟指数(RMI)的应用 该参数是5网织红细胞分群的应用LFR LFR 和和和和HFRHFR可作为贫血鉴别诊断的初筛指标。可作为贫血鉴别诊断的初筛指标。可作为贫血鉴别诊断的初筛指标。可作为贫血鉴别诊断的初筛指标。研研研研究究究究表表表表明明明明，溶溶溶溶血血血血性性性性贫贫贫贫血血血血(HA)(HA)患患患患者者者者由由由由于于于于骨骨骨骨髓髓髓髓造造造造血血血血功功功功能能能能活活活活跃跃跃跃，大大大大量量量量新新新新生生生生的的的的RetRet释释释释放放放放到到到到外外外外周周周周血血血血，导导导导致致致致RetRet、LFRLFR和和和和HFRHFR明明明明显显显显增增增增高高高高；。肾肾肾肾性性性性贫贫贫贫血血血血时时时时HFRHFR上上上上升升升升，LFRLFR下下下下降降降降而而而而RetRet变变变变化化化化不不不不大大大大；缺缺缺缺铁铁铁铁性性性性贫贫贫贫血血血血患患患患者者者者铁铁铁铁剂剂剂剂治治治治疗疗疗疗前前前前，RetRet无无无无明明明明显显显显改改改改变变变变，HFRHFR轻轻轻轻度度度度增增增增高高高高，铁铁铁铁剂剂剂剂治治治治疗疗疗疗一一一一周周周周后后后后，RetRet及及及及HFRHFR可可可可呈呈呈呈中中中中度度度度增增增增高高高高，因因因因此此此此两两两两个个个个参参参参数数数数可可可可作作作作为为为为缺缺缺缺铁铁铁铁性性性性贫贫贫贫血血血血患患患患者者者者铁铁铁铁剂剂剂剂治治治治疗疗疗疗后后后后的的的的疗疗疗疗效效效效观观观观察察察察指指指指标标标标；再再再再生生生生障障障障碍碍碍碍性性性性贫贫贫贫血血血血(AA)(AA)患患患患者者者者外外外外周周周周血血血血RetRet中中中中度度度度减减减减低低低低，而而而而HFRHFR中中中中度度度度增增增增高高高高，这这这这种种种种现现现现象象象象可可可可能能能能反反反反映映映映了了了了AAAA患患患患者者者者造造造造血血血血功功功功能能能能紊紊紊紊乱乱乱乱时时时时的的的的红红红红细细细细胞胞胞胞生生生生成成成成变变变变化化化化；在在在在鉴鉴鉴鉴别别别别诊诊诊诊断断断断MDSMDS方方方方面面面面，MDSMDS患患患患者者者者产产产产生生生生的的的的大大大大量量量量生生生生存存存存期期期期延延延延长长长长的的的的“幼幼幼幼稚稚稚稚”的的的的RetRet是是是是导导导导致致致致HFRHFR增加的原因。增加的原因。增加的原因。增加的原因。2021/4/27275网织红细胞分群的应用LFR 和HFR可作为贫血鉴别诊断5网织红细胞分群的应用HFRHFR和和和和MFR+HFRMFR+HFR可作为骨髓移植、化疗的可作为骨髓移植、化疗的可作为骨髓移植、化疗的可作为骨髓移植、化疗的监测指标，尤其是监测指标，尤其是监测指标，尤其是监测指标，尤其是MFR+HFRMFR+HFR的变化可以作为的变化可以作为的变化可以作为的变化可以作为评价肿瘤患者化疗期间检测骨髓造血功能受抑评价肿瘤患者化疗期间检测骨髓造血功能受抑评价肿瘤患者化疗期间检测骨髓造血功能受抑评价肿瘤患者化疗期间检测骨髓造血功能受抑制和开始恢复的较敏感指标。文献报道制和开始恢复的较敏感指标。文献报道制和开始恢复的较敏感指标。文献报道制和开始恢复的较敏感指标。文献报道 ，骨，骨，骨，骨髓移植后血小板、中性粒细胞、白细胞、髓移植后血小板、中性粒细胞、白细胞、髓移植后血小板、中性粒细胞、白细胞、髓移植后血小板、中性粒细胞、白细胞、RetRet及目测法及目测法及目测法及目测法RetRet计数恢复的天数分别为计数恢复的天数分别为计数恢复的天数分别为计数恢复的天数分别为16.416.4、16.816.8、16.216.2、13.713.7、14.8 d14.8 d。2021/4/27285网织红细胞分群的应用HFR和MFR+HFR可作为骨髓移谢谢观赏谢谢观赏谢谢观赏