诊断学——骨髓细胞学检查课件

骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查骨髓骨髓细细胞学胞学检查检查目的和要求目的和要求掌握骨髓穿刺的适应证掌握骨髓穿刺的适应证血细胞的发育规律血细胞的发育规律了解骨髓检查的方法和内容了解骨髓检查的方法和内容细胞免疫分型细胞免疫分型熟悉骨髓检查的临床应用熟悉骨髓检查的临床应用常见细胞化学染色常见细胞化学染色目的和要求掌握骨髓穿刺的适目的和要求掌握骨髓穿刺的适应证应证了解骨髓了解骨髓检查检查的方法和内容熟悉骨的方法和内容熟悉骨血象分析血象分析血象分析我血象分析我们该们该做什么做什么检查检查？特殊的临床检验特殊的临床检验 -骨髓液制成涂片染色骨髓液制成涂片染色,观察细胞的数量、形态观察细胞的数量、形态 -结合临床和血象等资料结合临床和血象等资料 -明确诊断、协助诊断、观察疗效、判断预后明确诊断、协助诊断、观察疗效、判断预后 或排除某些疾病或排除某些疾病血液系统疾病诊断和鉴别诊断的重要手段之一血液系统疾病诊断和鉴别诊断的重要手段之一骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查特殊的特殊的临临床床检验检验骨髓骨髓细细胞学胞学检查检查 骨髓检查骨髓检查 诊断、辅助诊断、辅助 诊诊断血液诊诊断血液 系统疾病系统疾病 诊诊断、断、辅辅助助骨髓穿刺适应证骨髓穿刺适应证外周血象成分及形态异常外周血象成分及形态异常不明原因发热不明原因发热,肝、脾、淋巴结肿大肝、脾、淋巴结肿大骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加等血沉明显增加等化疗后疗效观察化疗后疗效观察骨髓活检、免疫分型、染色体核型分析、微生骨髓活检、免疫分型、染色体核型分析、微生物及寄生虫学检查物及寄生虫学检查骨髓穿刺适骨髓穿刺适应证应证外周血象成分及形外周血象成分及形态态异常异常骨髓？骨髓？骨髓骨髓:位于骨松质腔隙中的一种海绵样、胶状组织 骨髓分类骨髓分类：红骨髓（造血细胞）、黄骨髓（脂肪细胞）骨髓组成骨髓组成：结缔组织、血管、神经及造血实质细胞 造血微环境造血微环境：由血管系统、神经系统、基质细胞（血管外膜细胞、脂肪细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、网状细胞等）和细胞外基质构成,造血干细胞赖以生存的场所。骨髓骨髓:位于骨松位于骨松质质腔隙中的一种海腔隙中的一种海绵样绵样、胶状、胶状组织组织 骨髓骨髓胶状、海胶状、海绵样组织绵样组织红骨髓红骨髓各种造血细胞各种造血细胞微环境微环境骨髓组成及细胞生成骨髓组成及细胞生成骨髓胶状、海骨髓胶状、海红红骨髓各种造血骨髓各种造血细细胞微胞微环环境骨髓境骨髓组组成及成及细细胞生成胞生成多能（向）造血干多能（向）造血干细胞胞髓系干髓系干细胞胞淋巴系干淋巴系干细胞胞红红系祖系祖 细细胞胞粒粒-单系祖系祖细胞胞巨核系祖巨核系祖细胞胞嗜酸粒系嗜酸粒系祖祖细细胞胞原原红细红细胞胞早幼早幼红红 细细胞胞中幼中幼红红 细细胞胞晚晚幼幼红细红细胞胞网网炽红细胞胞嗜嗜碱碱粒系粒系祖祖细细胞胞原粒原粒细胞胞T-T-淋巴系淋巴系祖祖细细胞胞B-B-淋巴系淋巴系祖祖细细胞胞原原浆细浆细胞胞原原单细胞胞原巨核原巨核细细胞胞原粒原粒细细胞胞原粒原粒细细胞胞原淋巴原淋巴 细细胞胞幼淋巴幼淋巴 细细胞胞淋巴淋巴细细胞胞早幼粒早幼粒 细胞胞晚晚幼粒幼粒细胞胞中幼粒中幼粒细胞胞杆杆状状细胞胞幼幼单细胞胞单核核细胞胞幼巨核幼巨核细胞胞颗粒巨粒巨核核细胞胞产版巨版巨核核细胞胞裸核巨裸核巨核核细胞胞血小板血小板嗜酸早嗜酸早幼粒幼粒嗜酸中嗜酸中幼粒幼粒嗜酸嗜酸晚晚幼粒幼粒嗜酸杆嗜酸杆状状 细胞胞嗜酸杆嗜酸杆状状 细胞胞嗜酸分叶嗜酸分叶 细胞胞嗜嗜碱碱性早性早幼幼细胞胞嗜嗜碱碱中幼中幼细胞胞嗜嗜碱晚碱晚幼幼细胞胞嗜嗜碱碱杆杆状状细胞胞嗜嗜碱碱杆杆状状细胞胞嗜嗜碱碱分叶分叶细胞胞淋巴淋巴细细胞胞淋巴淋巴细细胞胞浆细浆细胞胞单单核核细细胞胞单单核核细细胞胞杆杆状状细细胞胞分叶分叶细细胞胞网网炽红 细胞胞红细胞胞幼幼浆细浆细胞胞多能（向）造血干多能（向）造血干细细胞髓系干胞髓系干细细胞淋巴系干胞淋巴系干细细胞胞红红系祖粒系祖粒-单单系祖系祖细细血细胞发育演变图血细胞发育演变图原原始始细细胞胞幼幼稚稚细细胞胞成成熟熟细细胞胞原幼成原幼成原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞基本特点基本特点诊诊断学断学骨髓骨髓细细胞学胞学检查课检查课件件 胞体胞体:较大较大 核仁核仁:清晰清晰,易见易见;胞核胞核:大、圆形、类圆形或不规则形；胞浆：少、蓝色（嗜碱性）大、圆形、类圆形或不规则形；胞浆：少、蓝色（嗜碱性）核染色质：细致，呈颗粒状；核染色质：细致，呈颗粒状；颗粒：无或少许颗粒：无或少许粒），核浆比粒），核浆比增大增大。原始细胞原始细胞 胞体胞体:较较大大 幼稚细胞幼稚细胞 胞体胞体:中等大小中等大小;核染色质：较粗；核染色质：较粗；胞核：圆形或类圆形；胞核：圆形或类圆形；核仁：多数无核仁：多数无 胞质：增多胞质：增多,呈嗜碱性（蓝色）；颗粒：多数有颗粒呈嗜碱性（蓝色）；颗粒：多数有颗粒 （有核红细胞例外有核红细胞例外）幼稚幼稚细细胞胞 胞体胞体:中等大小中等大小;核染色核染色成熟细胞成熟细胞胞体胞体:较小较小;胞核：分叶、扭曲或有切迹（红细胞和血小板无核）胞核：分叶、扭曲或有切迹（红细胞和血小板无核）胞质：多胞质：多,淡蓝色、淡红色，核质比小（小淋巴细胞除外）淡蓝色、淡红色，核质比小（小淋巴细胞除外）核仁：无核仁：无 ；染色质：粗；颗粒：有；染色质：粗；颗粒：有成熟成熟细细胞胞体胞胞体:较较小小;血细胞发育成熟的一般规律血细胞发育成熟的一般规律项目项目原始原始幼稚幼稚成熟成熟备注备注细胞大小胞质量胞质嗜碱性胞质颗粒胞核大小核形态核染色质核仁核质比例大大小小少少多多强强弱弱无无少少多多大大小小圆形圆形凹陷凹陷分叶分叶细致细致粗糙，疏松粗糙，疏松致密致密有有无无大大小小早幼粒细胞比原粒细胞大，巨核细胞由小变大小淋巴细胞除外红系从深蓝灰蓝灰红淡红色红系小淋巴无颗粒，粒系三种颗粒成熟红细胞核消失有的成熟细胞呈类圆形、不规则形小淋巴细胞核质比大血血细细胞胞发发育成熟的一般育成熟的一般规规律律项项目原始目原始幼稚幼稚成熟成熟备备注注细细胞大小大胞大小大骨髓细胞学检测的临床应用骨髓细胞学检测的临床应用诊断造血系统疾病 白血病、恶组、MM、AA、MA、戈谢病、尼曼病、海蓝组织细胞增生症、MDS等。辅助诊断某些疾病 恶性肿瘤细胞骨髓转移、淋巴瘤骨髓浸润,骨髓增生异常综合征、骨髓增生性疾病、IDA、溶血性贫血、脾亢、ITP提高某些疾病的诊断率 疟原虫、黑热病、噬血细胞综合征、SLE骨髓骨髓细细胞学胞学检测检测的的临临床床应应用用常见血液系统疾病常见血液系统疾病各种贫血各种贫血:IDA:IDA、MAMA、HAHA、AAAA、MDSMDS各种类型的白血病各种类型的白血病：AL(AML,ALL),AL(AML,ALL),慢性白血病（慢慢性白血病（慢粒粒,慢淋等）慢淋等）多发性骨髓瘤、淋巴瘤多发性骨髓瘤、淋巴瘤类脂质疾病类脂质疾病：戈谢病，尼曼：戈谢病，尼曼-匹克病，海蓝组织细胞匹克病，海蓝组织细胞综合征综合征白血病：白血病：骨髓中原始细胞骨髓中原始细胞20%20%常常见见血液系血液系统统疾病各种疾病各种贫贫血血:IDA、MA、HA、AA、MDSM1M1M3M3M2M2M4M4M1M3M2M4L2L2M5M5L1L1L3L3L2M5L1L3戈戈谢病病MMMMM6M6尼曼尼曼-匹克病匹克病戈戈谢谢病病MMM6尼曼尼曼-匹克病匹克病CLLCLLCMLCMLITPITPM7M7CLLCMLITPM7AAAAIDAIDAMAMAHAHAAAIDAMAHA 骨髓细胞学检验的方法和内容骨髓细胞学检验的方法和内容低倍镜观察低倍镜观察-取材、涂片、染色-有核细胞增生程度-计数巨核细胞-有无异常细胞油镜观察油镜观察-分类计数-形态变化结果计算结果计算-各类细胞%-粒红比值描述描述-骨髓象-血象分析与报告分析与报告-增生程度-粒红比值-各系数量、形态-综合分析-出具报告病例归档病例归档-申请单-涂片-报告单 骨髓骨髓细细胞学胞学检验检验的方法和内容低倍的方法和内容低倍镜观镜观察油察油镜观镜观察察结结果果计计1 1、低倍镜观察、低倍镜观察(1)判断骨髓涂片质量:观察涂片厚薄、骨髓小粒多少、油滴、色泽等,选择满意的区域进行有核细胞分类、计数涂片和取材涂片和取材A-A-涂片比较涂片比较:上下两张太短或太长上下两张太短或太长,不符不符 合要求合要求;中间的涂片长短厚薄适宜且片中间的涂片长短厚薄适宜且片 膜居中，符合要求。膜居中，符合要求。B-B-下面的涂片取材较好，有较多骨髓小粒下面的涂片取材较好，有较多骨髓小粒染色比较染色比较A-A-偏酸偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚，红细细胞核、颗粒结构不清楚，红细 胞染色偏红胞染色偏红B-B-较好，细胞核结构、颗粒、胞浆染色好较好，细胞核结构、颗粒、胞浆染色好 、红细胞染粉红色、红细胞染粉红色C-C-偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不 易辨认，红细胞染成蓝色易辨认，红细胞染成蓝色观察部位的选择观察部位的选择A-A-涂片头部细胞密集、细胞染色差涂片头部细胞密集、细胞染色差,结构不结构不 清，不能识别清，不能识别B-B-涂片体尾交界处细胞分布均匀、细胞染色涂片体尾交界处细胞分布均匀、细胞染色 较好，是合适的细胞形态观察部位较好，是合适的细胞形态观察部位C-C-涂片尾部细胞破损、变形，不合适观察涂片尾部细胞破损、变形，不合适观察1、低倍、低倍镜观镜观察涂片和取材察涂片和取材A-涂片比涂片比较较:上下两上下两张张太短或太太短或太长长,(2)判断骨髓增生程度 -骨髓中有核细胞的多少反映出骨髓增生程度 -采用五级分类法 分级有核细胞有核细胞数 临床意义 红细胞一个高倍镜视野 增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生极度减低 1:1 1：10 1：20 1：50 1：200 100 50100 2050 510 3+4+-RAS:环形铁粒幼细胞15%常用骨髓常用骨髓细细胞化学染色胞化学染色SE染色染色AE染色染色PAS染色染色Fe染色染色M1-POXM1-POXM2-POXM2-POXALL-POXALL-POXM5-POXM5-POXALL-POXALL-POXM4-POXM4-POXM5-POXM5-POXM3-POXM3-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXALL-CEALL-CEM3-CEM3-CEM1-CEM1-CEM3-CEM3-CEM1-AE+NaFM1-AE+NaFM1-AEM1-AEM5-AE+NaFM5-AE+NaFM5-AEM5-AEM1-POXM2-POXALL-POXM5-POXALL-PNAPNAP化化脓脓菌感染菌感染-NAP-NAPCML-NAPCML-NAPALL-NAPALL-NAPNAP化化脓脓菌感染菌感染-NAPCML-NAPALL-NAPL2-ACPL2-ACPc c单单核核细细胞胞-PAS-PASb b巨核巨核细细胞胞-PAS-PASa a成熟粒成熟粒细细胞胞-PAS-PASALL-PASALL-PAST T急淋急淋-ACPACPCLL-PASCLL-PAS红红色粗色粗颗颗粒粒状阳状阳性性M6-PASM6-PASMA-PASMA-PASd d幼幼红细红细胞胞-PAS-PASL2-ACPc单单核核细细胞胞-PASb巨核巨核细细胞胞-PASa成熟粒成熟粒细细胞胞IDAIDA铁染色铁染色:细胞内铁阴性细胞内铁阴性,幼红细胞内未见铁颗粒幼红细胞内未见铁颗粒铁粒幼红细胞铁粒幼红细胞环形铁粒幼红细胞环形铁粒幼红细胞铁粒幼红细胞铁粒幼红细胞IDAIDA铁染色铁染色:细胞外铁阴性细胞外铁阴性,IDA铁铁染色染色:细细胞内胞内铁铁阴性阴性,幼幼红细红细胞内未胞内未见铁颗见铁颗粒粒铁铁粒幼粒幼红细红细胞胞急性白血病细胞化学染色特点急性白血病细胞化学染色特点细胞化学染色细胞化学染色 急淋急淋 急粒急粒 急单急单 红白血病红白血病 M7POX -/+-+(粒细胞）粒细胞）-SB -+-+(粒细胞）粒细胞）-AS-D NCE -+-+(粒细胞）粒细胞）-NAE -+(单核细胞）单核细胞）-NAE+NaF -不被不被NaF抑制抑制 被被NaF抑制抑制NAP N或或PAS +粗颗粒状粗颗粒状/块状块状 -/+弥漫红色弥漫红色 -/+弥漫红色弥漫红色 +（幼红细胞（幼红细胞）+急性白血病急性白血病细细胞化学染色特点胞化学染色特点细细胞化学染色胞化学染色 细胞免疫分型细胞免疫分型 用用单克隆抗体及免疫克隆抗体及免疫学学技技术对细胞膜表面和（或）胞膜表面和（或）细胞胞质存在的特存在的特异异性抗原性抗原进行行检测,借以分析借以分析细胞所胞所属属系列系列，分化程度和功能，分化程度和功能状状态的一的一种种方法。方法。检测方法方法1 1、免疫、免疫荧光法光法用用荧光素光素标记的的单克隆抗体克隆抗体,在一在一定定条条件下件下与与细胞表面的分化抗胞表面的分化抗原原结合，合，经激激发光照射光照射产生生荧光。借助流式光。借助流式细胞胞仪观察察荧光光抗原。有抗原。有荧光者光者为阳阳性，无性，无荧光者光者为阴阴性性2 2、免疫酶染色法、免疫酶染色法细细胞免疫分型胞免疫分型 用用单单克隆抗体及免疫学技克隆抗体及免疫学技术检测术检测方法方法细胞免疫分型的临床应用细胞免疫分型的临床应用T T淋巴细胞亚群检测淋巴细胞亚群检测全T细胞-CD3、CD4和CD8T细胞-TH(CD4+、CD8-）-TS(CD4-、CD8+)CD4+/CD8+:机体免疫状态、疾病诊断、病情分析、监测治疗和判断预后白血病免疫分型白血病免疫分型1 1、明确诊断、明确诊断ALLALL和和AMLAMLALL-CD2CD5CD7CD10CD19CD20ALL-CD2CD5CD7CD10CD19CD20AML-AML-CD13CD33MPOCD15CD14HLA-CD13CD33MPOCD15CD14HLA-DRDR2 2、确定、确定ALLALL的细胞类型（的细胞类型（B B细胞或细胞或T T细胞）和细胞）和ALLALL的分化阶段的分化阶段3 3、鉴定、鉴定AMLAML的特征的特征4 4、少见类型的白血病、少见类型的白血病,M6,M6、M7M7、M0M0、双表型、双表型、CLLCLL、毛白、毛白、MMMM白血病微小残留病检测白血病微小残留病检测完全缓解的白血病,出现CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34等任何一种抗原阳性同时伴有TdT+可诊断微小残留存在。敏感性达10-4细细胞免疫分型的胞免疫分型的临临床床应应用用T淋巴淋巴细细胞胞亚亚群群检测检测白血病免疫分型白血病白血病免疫分型白血病ALLALL与与AMLAML的免疫表型特点的免疫表型特点 CD19 CD7 CD33 CD13 HLA-DR TdTB-ALL +-+/-T-ALL -+-/+AML -/+-ALL与与AML的免疫表型特点的免疫表型特点 CD19 急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点 系列系列 亚型亚型 主要的蛋白标记主要的蛋白标记B系列系列 早期早期B型型 CD19+,CD10-普通型普通型 CD19+,CD10+前前B型型 CD19+，胞质，胞质链链+系列系列 亚型亚型 主要的蛋白标记主要的蛋白标记T系列系列 B细胞型细胞型 CD19+，胞膜，胞膜Ig+前前T型型 CD7+,CD2-T细胞型细胞型 CD7+,CD2-急性淋巴急性淋巴细细胞白血病的免疫表型特点胞白血病的免疫表型特点 系列系列 亚亚型型 急性髓细胞白血病的免疫分型急性髓细胞白血病的免疫分型亚型亚型 典型的蛋白标记典型的蛋白标记M0 CD34，33，13M1 同上同上M2 CD34，33，15，13M3 CD33，13，(HLA-DR-)亚型亚型 典型的蛋白标记典型的蛋白标记M4 CD34，33，15，14，13M5 CD33，15，14，13M6 CD33,血型糖蛋白（血型糖蛋白（GyA)M7 CD33，41,42,61急性髓急性髓细细胞白血病的免疫分型胞白血病的免疫分型亚亚型型 典型的蛋白典型的蛋白标记标记Thanks for your attention!Thanks for your attention!